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DOI: 10.3791/51359-v
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Per comprendere la struttura delle reti neuronali, caratterizzazione funzionale e morfologica dei singoli neuroni è una necessità. Qui, dimostriamo etichettatura juxtasomal biocitina, che permette registrazioni elettrofisiologiche nella configurazione extracellulare, pur mantenendo la capacità di etichettare intracellulare neurone per la ricostruzione post-hoc di dendritiche e dell'architettura assonale.
L'obiettivo generale di questa procedura è quello di collegare il potenziale d'azione specifico del tipo di cellula che aumenta nella corteccia sensoriale durante l'elaborazione delle informazioni all'identità morfologica dei neuroni registrati. Ciò si ottiene preparando prima chirurgicamente il ratto per le registrazioni juxtasomiali. Una volta preparato, un elettrodo registra l'attività di picco evocata spontaneamente e sensorialmente e il neurone registrato viene caricato con biocidina utilizzando corrente e iniezioni.
Successivamente, il cervello viene elaborato per la colorazione della biotina. Infine, il neurone riempito di biotina viene ricostruito digitalmente dalle sezioni successive per la classificazione del tipo di cellula. In definitiva, le registrazioni juxtasomiali di singoli neuroni consentono lo studio dell'elaborazione sensoriale e delle informazioni strutturali all'interno della rete corticale.
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