Approcci sperimentale per lo studio mitocondriale localizzazione e funzione di un nucleare di cellule ciclo chinasi, Cdk1

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25 febbraio 2016

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Qui, descriviamo come studiare la localizzazione mitocondriale di una chinasi (ciclo cellulare) e come determinare la sua posizione sub-mitocondriale, nonché potenziali substrati/bersagli mitocondriali. L'espressione forzata di proteine nei mitocondri fornisce uno strumento utile per studiare le conseguenze funzionali della localizzazione mitocondriale di una proteina di interesse.

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Chinasi Cdk1

Chapters in this video

0:05

Titolo

1:01

Estrazione di mitocondri intatti con carbonato di sodio

3:07

Separazione delle membrane interna ed esterna dei mitocondri

4:22

Costruzione di vettori CyclinB1/Cdk1 marcati con GFP/RFP mirati ai mitocondri e localizzazione mitocondriale

7:23

Determinazione della durata delle fasi del ciclo cellulare mediante saggio di incorporazione di EdU

10:58

Risultati: analisi mitocondriale di CyclinB1 e Cdk1

12:25

Conclusione

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