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PCR bloccante wild-type combinata con sequenziamento Sanger per il rilevamento di mutazioni somat...
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JoVE Journal Genetics
Wild-type Blocking PCR Combined with Sanger Sequencing for Detection of Low-frequency Somatic Mutation

PCR bloccante wild-type combinata con sequenziamento Sanger per il rilevamento di mutazioni somatiche a bassa frequenza

Full Text
1,460 Views
07:17 min
August 23, 2024

DOI: 10.3791/65647-v

Haixia Xu*1, Junyan Lu*2, Zhou Li1, Ran Chen1

1Kindstar Global Technology Inc., 2Yongzhou Central Hospital

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

Questo articolo introduce l'applicazione di un metodo di rilevamento a bassa frequenza basato sul sequenziamento Sanger nel linfoma angioimmunoblastico. Fornire una base per l'applicazione di questo metodo ad altre malattie.

Transcript

Siamo interessati a comprendere le mutazioni somatiche a bassa frequenza nei tessuti tumorali. Questo articolo introduce l'applicazione del metodo di rilevamento delle mutazioni a bassa frequenza basato sul nostro sequenziamento Sanger nel test del linfoma angioimmunoblastico, fornendo una base per l'applicazione di questo metodo ad altri test di malattia. Attualmente esistono metodi di rilevamento delle mutazioni a bassa frequenza come la PCR quantitativa, la PCR digitale e l'NGS.

Ma non esiste un rapporto sul rilevamento della mutazione a bassa frequenza IGHV7-3 basata sul sequenziamento Sanger, di cui il limite di rilevamento è solo dal 5% al 20%Generalmente, a causa di limitazioni tecniche, il rilevamento a bassa frequenza basato sul sequenziamento Sanger non può essere quantificato con precisione. La nostra tecnica offre un'elevata sensibilità, un basso costo e una forte flessibilità, rendendola la scelta ideale per il rilevamento di mutazioni a bassa frequenza. Stiamo progettando primer pseudogenici e primer GCR multiplex per esplorare la loro applicazione nelle malattie del sangue.

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Genetica Numero 210 Sequenziamento con Sanger WTB-PCR alta sensibilità mutazioni a bassa frequenza AITL RHOA G17V

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