Name: Valutazione dinamica della funzione piastrinica multiparametrica mediante un biosensore capacitivo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T12:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: Scopri una nuova tecnica per valutare la funzione piastrinica in condizioni fisiologiche mediante un biosensore capacitivo. Questo metodo misura conteggio, stimolazione e attivazione piastrinica in un unico saggio.

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<li>Alafeef, M., Dighe, K., Moitra, P., Pan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid%2C+ultrasensitive%2C+and+quantitative+detection+of+sars-cov-2+using+antisense+oligonucleotides+directed+electrochemical+biosensor+chip%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Rapid, ultrasensitive, and quantitative detection of sars-cov-2 using antisense oligonucleotides directed electrochemical biosensor chip.</a> ACS Nano. 14 (12), 17028-17045 (2020).</li>
<li>Chowdhury, A. D., Takemura, K., Li, T. C., Suzuki, T., Park, E. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrical+pulse-induced+electrochemical+biosensor+for+hepatitis+e+virus+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Electrical pulse-induced electrochemical biosensor for hepatitis e virus detection.</a> Nat Commun. 10 (1), 3737(2019).</li>
<li>Park, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capacitive+biosensor+based+on+vertically+paired+electrodes+for+the+detection+of+sars-cov-2%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">Capacitive biosensor based on vertically paired electrodes for the detection of sars-cov-2.</a> Biosens Bioelectron. 202, 113975(2022).</li>
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<li>Rassaei, L., Mathwig, K., Kang, S., Heering, H. A., Lemay, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+biodetection+in+a+nanofluidic+device%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Integrated biodetection in a nanofluidic device.</a> ACS Nano. 8 (8), 8278-8284 (2014).</li>
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<li>Zhurauski, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitive+and+selective+affimer-functionalized+interdigitated+electrode-based+capacitive+biosensor+for+her4+protein+tumor+biomarker+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">Sensitive and selective affimer-functionalized interdigitated electrode-based capacitive biosensor for her4 protein tumor biomarker detection.</a> Biosens Bioelectron. 108, 1-8 (2018).</li>
<li>Pourang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+fibrinolytic+status+in+whole+blood+using+a+dielectric+coagulometry+microsensor%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">Assessment of fibrinolytic status in whole blood using a dielectric coagulometry microsensor.</a> Biosens Bioelectron. 210, 114299(2022).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>1-Dodecanetiol</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>471364-100ML</td><td>1 mM</td></tr><tr><td>200-proof etanolo</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>EX0276-1</td><td></td></tr><tr><td>stampante 3D</td><td>Shenzhen Creality 3D Technology Co, Ltd.</td><td>Ender-3 V3</td><td></td></tr><tr><td>materiale per la stampa 3D</td><td>HATCHBOX 3D, CA, U.S.A</td><td>3D PLA-1KG-1.75</td><td></td></tr><tr><td>Adenosina 5&prime;-difosfato</td><td>Sigma Aldrich, U.S.A</td><td>01905-250MG-F</td><td></td></tr><tr><td>ADP Aspirina&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, MO, Stati Uniti</td><td>A2093-100G</td><td></td></tr><tr><td>Incisione ionica reattiva profonda</td><td>Omega Engineering, Inc.</td><td>SPTS Rapier DRIE</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl Sulfoxide</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>D8418-50ML</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>Sistemi di deposizione ad alto vuoto</td><td>CHA</td><td>SEC-600</td><td></td></tr><tr><td>Fibronectina umana</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>CLS356008-1EA</td><td>Fn</td></tr><tr><td>KOH</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>P1767-250G</td><td></td></tr><tr><td>LCR meter&nbsp;</td><td>Keithley Instruments, Inc., OH, U.S.A</td><td>Keithley EL 4980AL</td><td></td></tr><tr><td>LCR portametri</td><td>Signatone Corporation, CA, U.S.A</td><td>SCA-50-4</td><td></td></tr><tr><td>Mask Aligner System</td><td>ABM, U.S.A, Inc.</td><td>ABM/6/350/NUV/DCCD/SA</td><td></td></tr><tr><td>Micro-posizionatori</td><td>Signatone, CA, U.S.A</td><td>S-725</td><td></td></tr><tr><td>sonda ad ago</td><td>Signatone Corporation, CA, U.S.A</td><td>SCAT5T-4</td><td>12.5 &mu; m</td></tr><tr><td>radius Soluzione salina tamponata con fosfato</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>P4474-1L</td><td>PBS, pH 7.4</td></tr><tr><td>Reactive Ion Etching</td><td>Plasma-Therm, U.S.A</td><td>RIE Vision 320</td><td></td></tr><tr><td>substrato di silicio</td><td>Wafer World Inc</td><td>SKU# 1766</td><td></td></tr><tr><td>Provette standard al 3,2% di citrato</td><td>Tiger Medical, NJ, U.S.A.</td><td>Covidien / Cardinal Health 8881340478 Monoject</td><td></td></tr><tr><td>Thrombin</td><td>Enzyme Research Laboratories, U.S.A</td><td>HT 1002a</td><td></td></tr><tr><td>Ticagrelor</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>PHR2788-400MG</td><td></td></tr><tr><td>Tyrode' s tampone</td><td>Boston Bioproducts, U.S.A</td><td>BSS-375</td><td></td></tr><tr><td>UV fotoresist</td><td>AZ materiali elettronici, NC, U.S.A.</td><td>AZ 9260</td><td>15um</td></tr></tbody></table>

valutazione dinamica della funzione piastrinica multiparametrica mediante un biosensore capacitivo

Dynamic Multiparameter Platelet Function Assessment Using a Capacitive Biosensor

Questo studio mira a condurre una valutazione dinamica della funzione piastrinica. Seguendo il protocollo sopra descritto, è stata preparata la soluzione di c-PRP e le piastrine sono state seminate sull'elettrodo rivestito di Fn in T-MCC. Le piastrine libere sono state lavate via dalla fase di lavaggio ed è stato aggiunto un agonista per attivare le piastrine attaccate. I risultati dettagliati e le discussioni sono disponibili nel nostro precedente rapporto28.
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Valutazione dinamica della funzione piastrinica multiparametrica mediante un biosensore capacitivo

Platelets play a fundamental role in blood clotting through a series of regulated responses, including adhesion, spreading, granular secretion, ...

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Questo video dimostra il metodo per valutare l'impatto dello sforzo di taglio sulle piastrine. Il trattamento con anticorpi induce dissociazione e cambiamenti conformazionali nei complessi meccanorecettori, attivando le piastrine ed esprimendo marcatori sulla superficie. Questi marcatori vengono osservati tramite immunocolorazione e citometria a flusso.

Gli effetti dello stress da taglio sulle piastrine trattate con anticorpi contro i recettori meccanosensoriali

La trasfusione piastrinica e l'emostasi sono state modellate utilizzando la ricostituzione del sangue e camere a flusso microfluidico per studiare la funzione delle piastrine della banca del sangue. I dati dimostrano le conseguenze della lesione da accumulo piastrinico sull'emostasi, in vitro.

Microfluidic Flusso Camere con sangue ricostituito al modello Emostasi e piastrine Transfusion<em&gt; In Vitro</em

Questo articolo descrive un modello sperimentale di emostasi che misura contemporaneamente la funzione piastrinica e la coagulazione. Piastrine e di fibrina fluorescenza viene misurata in tempo reale, e il tasso di piastrine di adesione, il tasso di coagulazione, e l'inizio della coagulazione sono determinati. Il modello viene utilizzato per determinare le proprietà delle piastrine procoagulanti sotto flusso nei concentrati di trasfusione.

Un Microfluidic flusso Camera Modello per la trasfusione di piastrine e Emostasi Misure Deposizione delle piastrine e la formazione di fibrina in tempo reale

Qui, presentiamo un protocollo per la rilevazione e la quantificazione delle molecole abbondanti bassi in soluzioni complesse utilizzando molecolare imprinting in combinazione con un biosensore di capacitanza.

Ultrasensibile rilevazione di biomarcatori utilizzando un Imprinting molecolare basato biosensore capacitivo

Viene fornito un protocollo dettagliato per l'imaging di singole piastrine in migrazione utilizzando cavi avidina-biotina funzionalizzati con RGD con densità regolabile, rivelando che le piastrine generano una forza sufficiente per rompere il legame avidina-biotina.

Un test in vitro per studiare la migrazione piastrinica utilizzando tethers avidina-biotina funzionalizzati con RGD

La formazione di piastrine procoagulanti è stata correlata con un aumentato rischio di trombosi. Di seguito viene presentato un preciso protocollo per l'isolamento delle piastrine lavate dal sangue umano, volto a quantificare l'esposizione alla fosfatidilserina e al rilascio di microvescicole, caratteristiche distintive delle piastrine procoagulanti.

Caratterizzazione piastrinica procoagulante mediante misurazione dell'esposizione alla fosfatidilserina e del rilascio di microvescicole da piastrine purificate umane

La funzione piastrinica sotto flusso può essere valutata e la rianimazione emostatica simulata può essere modellata utilizzando un dispositivo microfluidico, che ha applicazioni nella medicina traumatologica e trasfusionale.

Microfluidica nella valutazione della funzione piastrinica

La citometria a flusso multicolore per le piastrine può identificare nuovi sottotipi piastrinici all'interno delle sottopopolazioni piastriniche classiche, come le piastrine a riposo, aggregatorie, procoagulanti e apoptotiche. Ciò consente il confronto di diversi modelli di sottopopolazione indotti da vari agonisti piastrinici. Qui, viene descritta in dettaglio una procedura per stabilire un pannello di citometria a flusso multicolore.

Analisi delle sottopopolazioni piastriniche mediante citometria a flusso multicolore

Il presente protocollo fornisce una serie completa di procedure necessarie per analizzare le piastrine procoagulanti, che presentano caratteristiche sovrapponibili di necrosi, apoptosi e attivazione piastrinica.

Analisi completa delle piastrine procoagulanti che presentano caratteristiche di necrosi, apoptosi e attivazione piastrinica

Questo lavoro descrive un saggio microfluidico che utilizza lo stress di taglio per innescare la formazione di trombo nel sangue e caratterizza il trombo tramite molteplici dimensioni di lettura. Il test può misurare la tendenza protrombotica dei campioni di sangue ed è quindi utile nella diagnosi di malattie, nella scoperta di farmaci e in studi meccanicistici di base relativi alla trombosi.

Saggio di profilazione trombonica: una piattaforma basata sulla microfluidica per caratterizzare in modo completo la trombogenesi biomeccanica

Scopri una nuova tecnica per valutare la funzione piastrinica in condizioni fisiologiche mediante un biosensore capacitivo. Questo metodo misura conteggio, stimolazione e attivazione piastrinica in un unico saggio.

Valutazione dinamica della funzione piastrinica multiparametrica mediante un biosensore capacitivo

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