Valutazione dell'attività di riparazione della rottura del doppio filamento del DNA utilizzando saggi reporter ad alto rendimento e quantitativi basati sulla luminescenza

Artios sta sviluppando nuovi farmaci antitumorali mirati alla risposta al danno del DNA. A tal fine, abbiamo sviluppato una serie di nuovi saggi per misurare l'attività di riparazione del DNA cellulare. Questi test hanno avuto un impatto importante sui nostri programmi, portando a testare le risorse in fase clinica in pazienti con elevate esigenze mediche insoddisfatte.

Misurare con precisione l'attività cellulare sul bersaglio è essenziale per far progredire nuove terapie mirate. La generazione di saggi per i fattori di riparazione del DNA con le proprietà necessarie per alimentare un'efficiente campagna di scoperta di farmaci è stata una sfida, sia che si tratti di un elevato rendimento, di un robusto rapporto segnale-rumore, di una rapida inversione di tendenza e, idealmente, di una portabilità in diversi sistemi biologici. Abbiamo sviluppato una serie di saggi reporter robusti, quantitativi e titolabili basati sulla luminescenza per misurare la competenza di quattro principali percorsi di riparazione a rottura a doppio filamento, ricombinazione omologa, giunzione di estremità non omologa, giunzione di estremità mediata da microomologia e ricottura a singolo filamento.

Questi saggi reporter sono convalidati come lettura della riparazione dipendente dal percorso, sono sensibili alla modulazione farmacologica e hanno un tempo di risposta rapido. I substrati di riparazione che abbiamo sviluppato sono extracromosomici, quindi possono essere trasfettati transitoriamente in modelli di interesse e facilmente scalati in un formato ad alto rendimento. Riteniamo che i nostri sistemi di analisi abbiano un ruolo importante nel consentire la scoperta di farmaci DDR, ma anche nel migliorare la nostra comprensione della biologia DDR in modo più ampio.

A questo proposito, speriamo che i metodi contribuiscano ad accelerare l'identificazione e la prosecuzione di nuovi bersagli farmacologici, portando a farmaci per malattie come il cancro dove c'è un elevato bisogno medico insoddisfatto.