JoVE 実験百科事典
微生物学
0 回視聴 • 1:35 分 • January 30th, 2026
まず、外層が厚くなった結 核菌の非複製持続性(NRP)期を含む管から始めます。
1本のチューブにガラスビーズを入れて振ると、機械的にマイコバクテリアの外層を破壊し、透水性を高めます。
次に、ビーズで叩いたマイコバクテリア懸濁液を新しいチューブに移します。
未処理およびビーズバッドされた細胞懸濁液の両方に、蛍光標識された抗結核抗生物質リファンピシンを加えます。
蛍光標識リファンピシンがマイコバクテリアに入り込むために、振って培養します。
時間が経つにつれて、さらに多くのリファンピシンがマイコバクテリアに入ります。
サンプルを遠心分離して細胞を分離し、結合していないリファンピシンを含む上清液を除去します。
マイコバクテリアを新しい培地に再懸浮させてください。
フローサイトメトリーを用いてサンプルを解析します。細胞がレーザービームを通過する際、細胞内の蛍光リファンピシンに比例した蛍光を放出します。
異なる時期において、未処理のNRP細胞はビーズビード細胞よりも蛍光が低いことを示します。
これは、厚くなった外層がリファンピシンの侵入を制限し、宿主と病原体の相互作用中に細菌の持続を支えていることを示しています。