Name: 拍動バイオリアクターを用いた工学生物学ベースの人工血管 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-14T12:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 22 s
Description: 学ぶ拍動バイオリアクターを用いた人工血管の工学生物学的製造法。PGAメッシュスカフォールドと平滑筋細胞を使用し、冠動脈疾患治療のための移植可能な小径血管グラフトの再生に向けた有望なアプローチを探索する。

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この作品は、健康グラントR01 EB - 008836とR01 HL083895（LENの両方）の国民の協会によって資金を供給される。我々は研究のためのバイオリアクターを作るためにダリルスミス、大学のガラス吹き工を、感謝することができます。

オートクレーブ図1及び図2に指示フローシステムとバイオリアクターの成分（バイオリアクター自体とシリコンストッパーの蓋）のためのチューブを組み立て、オートクレーブ。栄養チューブは、一端にオスコネクタと反対側の開放端を持っています。 3つのショートチューブセグメントはガス交換のためのシリコンキャップを通して挿入されています。 1。縫製PGAメッシュ<ol><li> 1.1センチメートルX〜8cmのシート（バイオリアクターのサイズに依存）にPGAメッシュを切る。 </li><li>蒸留水（・ Alarm_D）および使用する前に、乾いた空気ときれいなシリコンチューブ（3ミリメートル内径）。 </li><li>シングルステッチに続く3つの手術のノット​​で始まるクリーンなシリコンチューブの周りにPGAメッシュを縫うためにDexon 6.0縫合糸を使用してください。 </li></ol> 2。 PGA足場表面処理<ol><li> 1 - 2分、処理時間を記録し、すべてのPGA足場に同じ時間を使うための1MのNaOHのディップPGA足場。 </li><li> 2分間3回dH2O風呂でPGA足場をすすぐ。 </li><li>パットPGAはのdH 2 Oバスの各ディップの間にキムワイプで乾燥した足場。 </li><li>組織培養フードの下で乾燥したPGAは、足場上に送風機で15分間風乾する。 </li></ol> 3。ミシンダクロンアーム<ol><li> 2〜3ミリメートルのオーバーラップのPGAメッシュの各端にダクロンの袖口（1CM）の小片を縫うためにProlene 4.0の縫合糸を使用してください。注：ない穿刺のシリコンチューブ（図3）に注意してください。 </li><li>ダクロンの袖口の自由端3周ステッチを縫うために、同じ糸を使用してください。ステップ5.1のProlene縫合（図3）の自由端で十分な縫合糸を残していることを確認します。 </li></ol> 4。バイオリアクターのアセンブリ（バイオリアクターの培養開始前日） <ol><li>縫製メッシュとシリコンチューブ、手術器具、20〜30分間70％エタノール浴中の細い線を浸す。 </li><li>前の組み立てに少なくとも30分間70％エタノール浴中のバイオリアクターと浸し、それを含むオートクレーブ袋を開きます。エタノールで徹底的にバイオリアクターをフラッシュすることを確認してください。 70％エタノールへのすべてのバイオリアクターのコンポーネントの曝露は、加算の滅菌工程です。このステップでは、オートクレーブで除去されていないエンドトキシンを、削除して、血管細胞に有害です。 </li><li>それを介してプルに細いワイヤーを使用して、サイ​​ドのアームを介してシリコンチューブを引き出します。 </li><li> （エタノールに浸けメッシュを保つ）エタノール浴からバイオリアクターを取る。 Prolene縫合（図3）締めと上下連結して、フレアガラスの唇上のダクロンの袖口を締め込んで、バイオリアクター内のPGA足場を修正。 </li><li>シリコンチューブを介してコネクタにバイオリアクターのサイドアームの片側を接続します。 </li><li>十分なテンションでシリコンチューブの反対側を引っ張るとシリコンチューブに残りの二つのコネクタを挿入します。コネクタを挿入するときにしっかりとシリコンチューブにホールド！ </li><li>再び挿入のエタノール浴にバイオリアクターと静かにサイドアームのコネクタを引き抜き、エタノールで洗い流してください。 </li><li>バイオリアクターを裏返し、10分間浸すことができます。 </li><li>フリップバイオリアクターは、右サイドアップしてさらに10分間浸す。 </li><li>すべてのエタノールを排出します。 </li><li>チューブの端部から滴下過剰のエタノールを保持するために中央の皿の中でシリーズと場所バイオリアクターに3つの大きなペトリ皿を（10cm）に設定します。 </li><li> 5ミリリットルまたは10mlのピペットを用いて組織培養水をバイオリアクターとPGAメッシュをフラッシュします。シリコンチューブにもフラッシュの組織培養水。 </li><li>徹底的にバイオリアクターのいずれかの側にペトリ皿にすべての余分な水を抜く。 </li><li>上に送風機付きフードとUVのOFFで一晩乾燥したバイオリアクター。 </li><li>追加メモ：滅菌攪拌棒がバイオリアクターになっていることを確認。汚染を避けるために、前方にこの点から、バイオリアクターの上に"置く"にしないようにしてください。パラフィルムのストリップの多くをカットし、小70％エタノールのバス（大型のペトリ皿がうまくいく）でそれらを浸す。 </li></ol> 5。 1日目：バイオリアクターのセットアップ<ol><li>汚染物質からPGA足場の内側を保護するため、各バイオリアクターの開口部に滅菌ペトリ皿を置きます。 </li><li>図4およびパラフィルム、すべての接続の関節に示すようにバイオリアクターへのフローシステムを組み立てます。 <ol><li>アルコール綿で最初のコネクタを拭きます。 </li><li>バイオリアクターの第三の、未使用の腕に注入口を取り付けます。 </li><li>セイウチのチューブを外し、できるだけY -ジャンクショ​​ンの近くに設定された生理食塩水希釈の青い端を結紮する。チューブのこの部分には液体の転送のないことを確認するために設けられている、チューブクランプを引いて</li><li> IVの袋を取り外し、及びIVの袋の遠端にセイウチのチューブ（赤）を接続します。アルコールが最初にワイプで挿入口を拭くようにしてください。 </li><li>フローシステムの一方の側（白端チューブを介して）にセイウチを取り付けます。 </li><li>フローシステムに3方活栓を挿入します。 </li><li>圧力トランスデューサを取り外します＆三方活栓に接続します。 </li><li>袋の中央の開口部に圧力変換器のもう一方の端を取り付けます。 </li></ol></li><li>接続Y -ジャンクショ​​ンを経由して流れのシステムへのバイオリアクター。 IVの袋に1％fungizone（PBSの495ミリリットルとミックス5ミリリットルのfungizone）の350ミリリットルを追加するには、60ミリリットル注射器を使用してください。 </li><li> PBSの流れを可能にするためにストップコックを調整して流れるシステムをフラッシュするためにIVの袋を絞る。注：そこに漏れていることを確認しないためにバイオリアクターの中身をチェック。 </li><li>各PGA scafffold上に培地と種子の1.25ミリリットルで再懸8 × 10 6平滑筋細胞（約コンフルエントT75）。細胞懸濁液が均一にPGAメッシュの底面側にだけでなく、PGAメッシュダクロンのジャンクショ​​ン上に滴下されていることを確認します。 </li><li>アルコールは、バイオリアクターは、横向きにホバリングを避けるために回転を経由してワイプでバイオリアクターのリムを拭いてください。 </li><li>シリコンストッパーの蓋のアセンブリ（図2） <ol><li>オートクレーブ袋ピールバック慎重に、蓋の底部を露出しないようにして作る。 </li><li>オスコネクタで栄養チューブに注入口を取り付けます。 </li><li> three空気ポートのそれぞれにPTFE 0.20μmのフィルターを取り付けます。 </li><li>このプロセス中に公開する/蓋の底面に触れないように注意してください。 </li><li>パラフィルム注入口。 </li></ol></li><li>ガラスのバイオリアクターにシリコンストッパーの蓋を挿入し、バイオリアクター内の栄養チューブがシードPGAの足場に接触しないことを確認してください。蓋の周りパラフィルム。 </li><li>インキュベーター内部の流れのシステム（その側）とバイオリアクターを配置し、バイオリアクターの25〜30分が5分おきに回転させる。 </li><li>で説明されているように私たちの40から10培養培地の400ミリリットル（表1）とバイオリアクターチャンバーを埋める。この培地は、ブタ工学動脈のために"最適化"されています。 </li></ol> 6。日6-7：ポンプをオンにし、まず食べさせる<ol><li> 6-7日のためのシリコンチューブを介してポンピングどんな拍動することなく、静的に生成済の足場を拡大。この時間の間に培地交換やビタミンCの補充は必要ありません。 </li><li>ポンプの電源を入れる前にPBSまたはフローシステムのチューブのよじれの漏れがないことを確認してください。 </li><li>フローシステムのポンプの電源をオンにし、圧力が約270/-30mmHg読み取るようにポンプの設定を調整することを確認してください。 </li><li>レコード文化を通じて日々プレッシャーと270/-30mmHgの圧力を維持する。圧力トランスデューサーは、圧力を読んで、監視するコンピュータに接続することができます。 </li></ol>最初の給餌<ol start="5"><li>培地交換や培地廃棄物廃位両方の目的のために蓋を餌に注入ポート＆PTFEフィルターを組み立てます。 </li><li>ポンプにしっかりと栄養チューブを置き、餌蓋にバイオリアクターのポート、もう一方の端を供給する一方の端を差し込みます。エタノールのワイプで注入ポートを拭いていることを確認してください。 </li><li>培地の200ミリリットルを汲み出すために双方向のMasterflexポンプを使用してください。その後、バイオリアクターに戻って新鮮な培地の200ミリリットルをポンプするための新しい栄養チューブを使用してください。常にバイオリアクターに戻って培地をポンプ場合は特に、非常に遅い速度で始まります。 </li><li>培地とサプリメントのアスコルビン酸の2x/weekを変更します。アスコルビン酸を追加するには、培地の25ミリリットルを取り出し、組織のボンネットに置いて置くために30ミリリットル注射器を使用してください。 PBS 5mlのでアスコルビン酸の25mgを溶解し、0.22μmフィルターを通してそれをフィルタリングする。最初の栄養チューブに無菌のアスコルビン酸を注入し、それ以前の取り出し25ミリリットル培地を再度追加します。培地レシピを表1に示されている。 </li></ol> 7。代表的な結果： <img src="/files/ftp_upload/2646/2646fig1.jpg" alt="図1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図1"> 図1。フローシステムのアセンブリのためのチューブとコネクタを上に示します。 <img src="/files/ftp_upload/2646/2646fig2.jpg" alt="図2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図2"> 図2。シリコンストッパーの蓋のアセンブリを上に示します。 <img src="/files/ftp_upload/2646/2646fig3.jpg" alt="図3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図3"> 図3。バイオリアクターアセンブリの回路図は、上記示されています。バイオリアクターのダクロンの袖口が青縫合の結び目を持つガラスの腕に固定されている内側。 <img src="/files/ftp_upload/2646/2646fig4.jpg" alt="図4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図4"> 図4。チューブとバイオリアクターに接続されているフローシステムは、上記の通りです。L/S18チューブがMasterflexポンプで汲み上げ、したがって流れを駆動されます。圧力トランスデューサは、上流でのバイオリアクターに入る前に圧力を測定します。 <img src="/files/ftp_upload/2646/2646fig5.jpg" alt="図5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図5"> 図5。収穫された人工血管の画像。エンジニア船舶が不透明であることが表示され、拍動性の条件下で8週間の培養後、約250μmの壁の厚さを実現します。 <img src="/files/ftp_upload/2646/2646fig6.jpg" alt="図6" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図6"> 図6。人工血管のヘマトキシリンおよびエオシン染色したクロスセクションでは、。とBはそれぞれ、容器の8週間の非パルスとパルスです。CとDは、4週間非パルスとパルスの船舶、それぞれです。 Lは、血管の内腔側を示している。スケールバーは100μmのです。 <img src="/files/ftp_upload/2646/2646fig7.jpg" alt="図7" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図7"> 図7。人工血管の断面のためのコラーゲン（青）のためのマッソントリクローム染色。AとBはそれぞれ、8週間の非パルスとパルスの船舶です。 CとDは、4週間非パルスとパルスの船舶、それぞれです。 4週間のパルス船舶がその非パルスのものよりコラーゲンを示していることに注意してください。白い矢印は血管内の残りのPGAのフラグメントを指す。スケールバーは100μmのです。 <img src="/files/ftp_upload/2646/2646fig8.jpg" alt="図8" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図8"> 図8。ウシ人工動脈におけるSMCのマーカーの免疫染色。平滑筋α-アクチン、カルポニン- 1、および平滑筋ミオシン重鎖（SMMHC）はそれぞれ、、初期の中間、そして後半SMC収縮マーカーです。 12週間の文化の終わりまでに、容器内の細胞壁に発現するSMα-アクチンとカルポニン- 1とSMMHCの適量。スケールバーは20μmのです。 <table border="1"><tbody><tr><td> コンポーネント </td><td> 量は </td></tr><tr><td> DMEM（DME /低に変更） </td><td> 500ミリリットル</td></tr><tr><td> FBS（ウシ胎児血清）熱不活性化</td><td> 100ミリリットル</td></tr><tr><td> HEPES、1.0 M </td><td> 5ミリリットル</td></tr><tr><td>ビタミンC（PBSまたはDMEMに溶解） </td><td> 25mgの</td></tr><tr><td>プロリン/グリシン/アラニン25 mg/25 mg/10ミリグラム（PBS 5mlの溶解） </td><td> 5ミリリットル</td></tr><tr><td>のCuSO 4は1.5μg（PBSのIN1 mlを溶解） </td><td> 1ミリリットル</td></tr><tr><td>ペニシリン10,000台で、G / mlの</td><td> 5ミリリットル</td></tr><tr><td> 10ng/mlでのPDGF - BB（血小板由来成長因子- BB） </td><td> 5μg </td></tr><tr><td> 10ng/mlでのbFGF（塩基性線維芽細胞増殖因子） </td><td> 5μg </td></tr></tbody></table> 表1。 "40〜10"培地の成分は、上記の表に示します。PDGF - BBとbFGFの例外を除き、他のすべてのコンポーネントは使用前に0.2μmのフィルターでろ過することです。

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</ol>

利害の衝突は宣言されません。

人工血管の品質は、組織培養で使用されている平滑筋細胞の品質によって決まる大部分です。 SMC表現型の重要な側面は収縮形態、低継代数、およびバイオリアクターの内部に増殖する能力が含まれています。我々は、継代数がポリマー骨格に細胞播種の時にP3以下であることをお勧めします。また、SMCソースを使用する前にマイコプラズマフリーであることを確認することが重要です。我々はマイコプラズマで汚染された細胞はバイオリアクターの培養中の細胞増殖およびコラーゲンマトリックスの沈着を大幅に減少につながることを観察した。 40万人以上の冠動脈グラフトは小径（&lt;6mm）の人工血管12の需要が高い、その結果、毎年のバイパス操作のために必要です。究極の目標は、ネイティブ組織の生理的機能を模倣する機能小径血管を設計することです。私たちの拍動性のバイオリアクターシステムは、病気の動脈を復元し、置き換えることができる機能的な動脈グラフトを構成するための有望な平均値です。化学的および機械的に制御された環境では、バイオリアクターは、私たちは強力な縫合糸の保持と優れた機械的性質を示す埋め込み型...

<table border="1"><tbody><tr><th>試薬/材料の名称</th><th>サプライヤー</th><th>カタログ番号</th></tr><tr><td> FBS（ウシ胎児血清）熱不活化</td><td> HyClone </td><td> SH30071 </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> GIBCO </td><td> 11885 </td></tr><tr><td> rhFGF -基本</td><td> R＆B </td><td> 234 - FSE </td></tr><tr><td> rrPDGF - BB </td><td> R＆B </td><td> 520 - BB </td></tr><tr><td> Penicilin G </td><td>シグマ</td><td>ペンナ</td></tr><tr><td>硫酸銅（II） </td><td>シグマ</td><td> C8027 </td></tr><tr><td> Gylcine </td><td>シグマ</td><td> C8790 </td></tr><tr><td> L -アラニン</td><td>シグマ</td><td> A7469 - 25G </td></tr><tr><td> L -プロリン</td><td>シグマ</td><td> P5607 - 25G </td></tr><tr><td>アスコルビン酸</td><td>シグマ</td><td> A4544 - 25G </td></tr><tr><td> HEPES </td><td>シグマ</td><td> H3375 - 100G </td></tr><tr><td>シリコンストッパー</td><td>コー​​ル - パーマー</td><td> 06298〜24 </td></tr><tr><td> MasterflexチューブL / S </td><td>コー​​ル - パーマー</td><td> 06508〜16、06508〜18 </td></tr><tr><td> Masterflexポンプ</td><td>コー​​ル - パーマー</td><td> 7553〜80 </td></tr><tr><td>ダクロンのカフ</td><td> MAQUET </td><td> 174406 </td></tr><tr><td> PGAフェルト</td><td>コンコルディア</td><td> MO000877 - 01 </td></tr><tr><td> 4から0まで1.5メートルSurgipro II縫合</td><td> Syneture </td><td> VP - 557 - X </td></tr><tr><td> 6から0 0.7メトリックDexonの縫合</td><td> Syneture </td><td> 7538〜11 </td></tr><tr><td> 0.22μmのPTFEフィルター</td><td>ワットマン紙</td><td> 6780-2502 </td></tr><tr><td>スリーウェイストップコック</td><td>エドワーズライフサイエンス</td><td> 593WSC </td></tr><tr><td>圧力トランスデューサー</td><td>エドワーズライフサイエンス</td><td> PX212 </td></tr><tr><td> IVバッグ</td><td>バクスター</td><td> R4R2110 </td></tr><tr><td>生理食塩水希釈セット</td><td>矢印</td><td> W20030 </td></tr><tr><td>シリコンチューブ</td><td>サンゴバン</td><td> F05027 </td></tr></tbody></table>

拍動バイオリアクターを用いた工学生物学ベースの人工血管

Engineering Biological-Based Vascular Grafts Using a Pulsatile Bioreactor

多くの努力は、機能的な小径動脈バイパスを再生成する方法論を開発し、推進することに専念してきました。生理的環境では、両方の機械的および化学的刺激が動脈血管の1,2の適切な開発と機能性を維持することが義務付けられています。 私たちのグループによって開発されたバイオリアクター培養システムは、ネイティブの船のことを模倣する正確に制御された化学機械環境の中で血管の再生をサポートするように設計されています。私たちのバイオリアクターの組み立てとメンテナンスの手順はかなり簡単と3,4 -再現性の高いです。平滑筋細胞（平滑筋細胞）に準拠したシリコンチューブを介してスレッド化と、最大12週間までのために拍動性刺激の有無にかかわらず、バイオリアクターで培養されている管状のポリグリコール酸（PGA）のメッシュに播種されています。いくつかの前任者から私たちのバイオリアクターを区別する4つの主要な属性があります。 1）唯一のネイティブ血管の周囲の生化学をシミュレートする他の培養システムとは異なり、私たちのバイオリアクターは、また文化の容器に循環半径方向ひずみを適用することにより、生理的拍動性の環境を作成します。 2）複数の人工血管は、制御された化学物質の環境内のさまざまな機械的な条件の下で同時に培養することができる。 3）バイオリアクターは、簡単に動物の移植モデルのための人工血管の内腔側上に塗布される内皮細胞の単層（EC）が可能になります。 4）私たちのバイオリアクターは、異なる直径の大きさと文化エンジニアリング船舶は、特定の直径のサイズに合わせて個々のバイオリアクターを調整する手間が省けます、1mmから3mmまでであったができます。 私たちのバイオリアクターで培養した人工血管はある程度組織学的にネイティブの血管に似ている。血管壁の細胞は平滑筋ミオシン重鎖（SMMHC）3のような成熟したSMC収縮マーカーを発現する。コラーゲンはかなりの量の人工血管5の究極の機械的強度を担当する細胞外マトリックス内に堆積される。生化学分析はまた、人工血管のコラーゲン含有量は、ネイティブ動脈6と同等であることを示します。重要なのは、拍動性のバイオリアクターは、一貫して動物モデル3,7で成功した移植実験を許可する機械的性質を示す血管を再生成しています。さらに、このバイオリアクターは、さらに非線形光学顕微鏡（NLOM）8を使用して 、非侵襲的に、時間の経過とともにコラーゲンのリモデリングのリアルタイム評価と追跡を許可するように変更することができます。結論として、このバイオリアクターは、機能的な小口径人工血管の再生を制御する基本的なメカニズムを研究するための優れたプラットフォームとしてご利用ください。

当社グループは、植込み型小径人工血管を再生成する心臓血管系の生理的拍動性のストレスを模倣したバイオリアクター培養システムを開発しました。

機能的な小径動脈バイパスを再生させるための手法の開発と進展に、多大な努力が注がれてきました。生理学的な...

本手順の全体的な目的は、拍動型バイオリアクターシステムを用いて、生物学的根拠に基づいた血管グラフトを作製することです。これは、細胞が成長するための足場となるPGAメッシュから生分解性スキャフォールドを調製し、それらをバイオリアクターチャンバー内に組み込むことで達成されます。その後、スキャフォールドに平滑筋細胞を播種し、空気および給餌チューブのシールが付いた蓋でバイオリアクターチャンバーを密閉します。次に、バイオリアクターをフローシステムに接続し、バイオリアクター内の血管に拍動流を供給します。リアクター内で細胞が血管へと成長し、免疫化学的、生化学的、および機械的な試験に合格します。この技術は、動脈バイパス用の移植可能な小径血管グラフトを再生するための有望なアプローチであるため、冠動脈疾患の治療への応用が期待されます。この手法は血管工学への知見を提供できるだけでなく、周期的な生理学的負荷を受ける他の器官系にも適用可能です。一般的に、この手法に不慣れな方は習得に苦労する可能性があります。スキルを完全に習得するには、多くの練習が必要です。私たちは、工学的構築物を再生させるために生理学的な機械的刺激を適用することの重要性に気づいたとき、初めてこのアプローチを考案しました。バイオリアクターの操作プロセスは工程が多く、詳細な実演を通じてのみ習得できるため、この手法を視覚的に示すことが極めて重要です。まず、蒸留水を用いて内径 3 mm のシリコンチューブを 30 cm の長さに切り出したセクションを洗浄し、自然乾燥させます。ハサミを使用して、チューブ1本につき1.1 cm × 8 cmのPGAメッシュを切り出します。止血鉗子を用いて、Dexon 6.0縫合糸でPGAメッシュをチューブに固定し、外科結紮を3回行い、続いて止血鉗子でシングルステッチを行います。これにより固定されたメッシュがPGAスキャフォールドとなります。まず、スキャフォールドを1 Mの水酸化ナトリウム溶液に1〜2分間浸し、次に蒸留水に2分間ずつ3回浸して洗浄します。洗浄の合間には軽く水分を拭き取り、3回目の洗浄後はフード内で15分間自然乾燥させます。乾燥後、メッシュの両端に1 cmのダクロンカフを3針で縫い付けます。チューブを2〜3 mm重ねて配置し、チューブに穴を開けないようにしてください。このプロトコルの後で使用するため、約15 cmの縫合糸をそのまま残しておいてください。すべてのバイオリアクターの構成部品およびツールは、事前にオートクレーブ滅菌します。バイオリアクターでの培養を開始する前日に、バイオリアクターの一部を組み立て、バイオリアクターの構成部品、スキャフォールド、メッシュ、シリコンチューブ、手術器具、およびバイオリアクターの全長より長い細いワイヤーを、70%エタノール液に少なくとも30分間浸漬さ

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

バイオエンジニアリング（生体工学）

拍動流のバイオリアクターで培養した血管平滑筋細胞とエラストマーPGSの足場は比較的短い培養期間でネイティブECM生産との有望な小口径動脈の構造につながる可能性があります。...

動脈組織工学におけるエラストマーのPGSの足場

動物の屠殺まで、インビボでのエンドツーエンドの吻合およびリアルタイムデジタル評価を用いて、ヒツジの頸動脈への組織工学的船（TEVS）の間の位置に配置するためのステップバイステップのプロトコル。...

組織工学血管移植片とその後の移植のために手術手技<em&gt;インビボ</em&gt;モニタリング

ここでは、二重播種部分的人工多能性幹細胞がマウスにグラフトするための機能的な組織工学血管移植片を生成するためのプロトコルを提示する（PiPSC）は - 脱細胞化血管足場バイオリアクターに由来内皮細胞 - 平滑筋細胞およびPiPSC由来。...

マウスモデルにおける組織工学血管の生成とグラフト

この研究では、コラーゲン、平滑筋細胞、内皮細胞を直接培養することにより、生体血管組織を迅速に作製する技術を紹介します。さらに、人工血管組織の機械的特性評価のための新しいプロトコルについて説明します。...

エンジニアリング3D細胞化血管組織再生のためのコラーゲンゲル

これは、組織工学チャンバー内の顕微動動静脈ループまたはフロースルー椎弓根構成を使用して、in...

中に組み込み血管新生による組織工学<em&gt;インビボ</em&gt;ティッシュ・エンジニアリング商工会議所

スケーラブルな設計された血管は、臨床適用性を改善するであろう。簡単にかなりの3Dプリントガイドを使用して、血管平滑筋のリングは、血管移植片を形成し、筒状に作成して積層しました。移植片は、単純に、3Dプリントガイドサイズを変更することによってヒト冠状動脈寸法の範囲を満たすような大きさにすることができます。...

3Dプリントガイドとリングスタッキング法を用いたエンジニア血管移植片のスケーリング

我々 は、二次電池の種類がさらに血管柄付き組織とオルガノイドを生成するには、このを用いた構造の間質性スペースに播種できるを用いた血管床をエンジニア...

マイクロ流体工学バイオプリンティング血管組織や Organoids

私たちは、社内に設計された体外流れ商工会議所モデル、移植組織の細菌付着の検討を可能にするについて説明します。...

移植組織の細菌付着を勉強する平行平板灌流システムのIn Vitroモデル

このプロトコルの目的は、剪断応力と環状ストレッチの分離を可能にするバイオリアクターを使用して、材料駆動組織再生を調査するために、管状の電気スピン足場でヒトマクロファージと筋線維芽細胞の動的共培養を実行することです。...

フローとストレッチの下でバイオ材料の炎症と再生能力を評価するマルチキューバイオリアクター

このプロトコルは、灌流中の血管の ex vivo 培養のために、新たに開発された3Dプリントされたバイオリアクターのセットアップと操作を示しています。このシステムは、他のユーザーが簡単に採用できるように設計されており、実用的で手頃な価格で、基礎生物学や薬理学的研究などのさまざまな実験アプリケーションに適応できます。...

Ex Vivo(エクス・ビボ )3Dプリントされたバイオリアクターでの大血管の灌流培養

ここでは、カフ技術を使用してマウス頸動脈に組織工学的血管移植片を移植するためのプロトコルが提示され、血管組織再生メカニズムを調査するための適切な動物モデルが提供されます。...

カフ法 による マウス頸動脈への組織改変血管移植片の移植

学ぶ拍動バイオリアクターを用いた人工血管の工学生物学的製造法。PGAメッシュスカフォールドと平滑筋細胞を使用し、冠動脈疾患治療のための移植可能な小径血管グラフトの再生に向けた有望なアプローチを探索する。

拍動バイオリアクターを用いた工学生物学ベースの人工血管

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