血液脳関門の重要性は何ですか？

血液脳関門は有害物質から脳を保護し、必須栄養素の輸送を調節します。

受容体を介した輸送はどのように機能しますか？

受容体を介した輸送は、細胞表面の特定の受容体に物質が結合し、それらの内在化と膜を通じた輸送を促進します。

この研究でFITCはどのような役割を果たしていますか？

FITCは血液脳関門を通じた物質の輸送を視覚化し測定するために使用される蛍光色素です。

研究の主な発見は何ですか？

研究では、FITC-フェリチンが遊離FITCと比較してBBBを通じた透過性を著しく向上させることが分かりました。

蛍光強度を測定するためにどのような方法が使用されましたか？

蛍光強度は、下部チャンバーからサンプルを回収した後に分光蛍光光度計を使用して測定されました。

これらの結果は薬物送達にどのような影響を与えますか？

この発見は、受容体を介した輸送を利用するために薬物製剤を修正することで脳への薬物送達を改善できることを示唆しています。

In Vitro血液脳関門モデルによるFITCおよびFITC-フェリチンの浸透の研究

JoVE Encyclopedia of Experiments

Neuroscience

0 views • 1:58 min • July 8th, 2025

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vitro血液脳関門またはBBBモデルを含むマルチウェルプレートから始めます。

このモデルは、マトリックスでコーティングされたメンブレンインサートの上側または血液側に付着した内皮細胞と、下側または脳側に付着した星状細胞で構成されています。

フルオレセインイソチオシアネートまたは蛍光色素であるFITCをコントロールウェルの上部チャンバーに添加します。

逆に、FITC負荷フェリチン、またはFITCフェリチンをサンプルウェルの上部チャンバーに追加してからインキュベートします。

制御井戸では、遊離FITCは上部チャンバーに限定されたままで、BBBを通過する交差は最小限に抑えられます。

一方、サンプルウェルでは、FITC-フェリチン複合体が内皮細胞上の受容体に結合します。

これにより、受容体を介した内在化と下部チャンバーへの輸送が可能になります。

次に、両方のウェルの下部チャンバーから定期的に培地を収集し、蛍光強度を測定します。

対照は蛍光が低く、サンプルは蛍光が高く、FITCとFITCフェリチンのBBB透過性が異なることが確認されています。

血液脳関門システムを通るFITCフェリチンフラックスを測定するには、各製剤の少なくとも3つの血液脳バリアシステムの上部にFITC負荷フェリチンまたは遊離FITCを追加します。

インキュベーターで7時間後、3つのサンプルおよびコントロールインサートの下部チャンバーから2ミリリットルの培地を取り出します。収集したサンプルの 500 マイクロリットルの蛍光強度を蛍光分光計で測定し、プロトコルの書面部分の指示に従って透過 FITC または FITC-フェリチンの濃度を決定します。