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電気化学発光免疫測定法により血清心臓ミオシン結合タンパク質-Cの定量のための高感度で特異的な定量法
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JoVE Journal Biology
A Sensitive and Specific Quantitation Method for Determination of Serum Cardiac Myosin Binding Protein-C by Electrochemiluminescence Immunoassay

電気化学発光免疫測定法により血清心臓ミオシン結合タンパク質-Cの定量のための高感度で特異的な定量法

Full Text
17,120 Views
10:12 min
August 8, 2013

DOI: 10.3791/50786-v

Diederik W.D. Kuster1, David Barefield1, Suresh Govindan1, Sakthivel Sadayappan1

1Department of Cell and Molecular Physiology,Loyola University Chicago

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

複雑な生体試料中のバイオマーカーの測定はますます意思決定臨床指導されています。私たちは、同時に心臓ミオシン結合タンパク質C、クレアチンキナーゼMB、および心筋梗塞と健常者の被験者からの血清サンプル中の心筋トロポニンIを測定する高感度な方法を説明します。

この手順の全体的な目標は、血清サンプル中の心筋ミオシン結合タンパク質Cと心筋トロポニンIを同時に定量することです。これは、最初に96ウェルプレートを心筋ミオシン結合タンパク質C抗体でコーティングしてプレックスアッセイを行うか、または事前にコード化されたthreeplexアッセイを使用することによって達成されます。第2ステップでは、コーティングされたプレートをキャリブレーターおよび血清サンプルとインキュベートします。

次に、最終ステップで標識検出抗体を添加し、化学発光シグナルを産生し、これをプレートリーダーで検出します。最終的に、血清サンプル中に存在する目的の心臓タンパク質のレベルは、単一または多重のイムノアッセイによって決定できます。実験の前日、ゼラチンフリーマウスモノクローナル抗心筋ミオシン結合タンパク質C抗体を96ウェル味噌スケールの裸の標準プレートの各ウェルの下隅に30マイクロリットルピペットで固定します。

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