Isolation of Cortical Microglia with Preserved Immunophenotype and Functionality From Murine Neonates

Stefano G. Daniele; Amanda A. Edwards; Kathleen A. Maguire-Zeiss

doi:10.3791/51005

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Isolation of Cortical Microglia with Preserved Immunophenotype and Functionality From Murine Neonates

マウス新生児から保護免疫表現と機能皮質ミクログリアの分離

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09:12 min

January 30, 2014

DOI: 10.3791/51005-v

Stefano G. Daniele¹, Amanda A. Edwards¹, Kathleen A. Maguire-Zeiss¹

¹Department of Neuroscience,Georgetown University Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ミクログリア生物学の成功の調査の一つの鍵は、CNS組織からの単離の間にex vivoでミクログリア免疫機能の維持である。蛍光イメージング、免疫細胞、および炎症誘発性刺激リポ多糖（LPS）とパム₃ CSK _4（PAM）を用いたELISA次のミクログリアの活性化によって評価されるように、高純度と免疫機能細胞培養で回転振盪結果を経由してミクログリアを分離する。

この手順の全体的な目標は、マウスの新生児から皮質ミクログリアを分離することです。これは、ミューレン新生児から皮質脳組織を解剖する最初のマイクロによって達成されます。第2のステップは、混合グリア細胞培養物をin vitroで17〜21日間増殖させることです。

次に、これらの混合グリア培養物からミクログリアを単離します。最後のステップは、さらなる実験のためにミクログリア細胞を細胞培養プレートにプレートすることです。最終的に、免疫蛍光顕微鏡法とElizaを使用して、この単離プロトコルがミクログリアの免疫表現型と機能を維持することを示します。

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