Characterization of Complex Systems Using the Design of Experiments Approach: Transient Protein Expression in Tobacco as a Case Study

Johannes Felix Buyel; Rainer Fischer

doi:10.3791/51216

ケーススタディとして、タバコにおける一過性タンパク質発現：実験アプローチのデザインを使用した複雑...

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Bioengineering

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Characterization of Complex Systems Using the Design of Experiments Approach: Transient Protein Expression in Tobacco as a Case Study

ケーススタディとして、タバコにおける一過性タンパク質発現：実験アプローチのデザインを使用した複雑系のキャラクタリゼーション

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20:24 min

January 31, 2014

DOI: 10.3791/51216-v

Johannes Felix Buyel¹, Rainer Fischer^1,2

¹Institute for Molecular Biotechnology,RWTH Aachen University, ²Institute for Molecular Biology and Applied Ecology,Fraunhofer Gesellschaft

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

我々は、植物におけるモノクローナル抗体およびレポータータンパク質の一過性発現に対する導入遺伝子の調節エレメント、植物の成長および発達パラメータ、およびインキュベーション条件の影響を決定し、モデル化するのに使用することができる実験アプローチの設計を記載している。

次の実験の全体的な目標は、植物の葉におけるタンパク質の一過性発現の予測モデルを生成することです。これは、一過性発現の最も重要なパラメータを特定し、それらがタンパク質蓄積に与える影響を定量化するための実験デザインを設定することで達成されます。第2のステップとして、遺伝子をクローニングしてアグロバクテリアに導入し、葉に注入して一過性のタンパク質発現を引き起こします。

次に、タンパク質の発現レベルを決定するために、葉のサンプルを分析します。実験モデル評価のデザインに基づいて、さまざまな年齢の葉やさまざまなインキュベーション条件での一過性タンパク質発現レベルのパターンを示す結果が得られます。この手法の主な利点は、一度に1つの因子のような既存の方法と比較して、葉の年齢や位置別の葉などの異なるパラメータ間の相互作用を検出して定量化できることです。

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