Immunohistochemistry and Multiple Labeling with Antibodies from the Same Host Species to Study Adult Hippocampal Neurogenesis

Anne Ansorg; Katja Bornkessel; Otto W. Witte; Anja Urbach

doi:10.3791/52551

大人の海馬神経新生を研究するために、同じホスト種由来の抗体による免疫組織化学および複数のラベル

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Neuroscience

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Immunohistochemistry and Multiple Labeling with Antibodies from the Same Host Species to Study Adult Hippocampal Neurogenesis

大人の海馬神経新生を研究するために、同じホスト種由来の抗体による免疫組織化学および複数のラベル

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09:24 min

April 22, 2015

DOI: 10.3791/52551-v

Anne Ansorg*¹, Katja Bornkessel*¹, Otto W. Witte¹, Anja Urbach¹

¹Hans Berger Department of Neurology,Jena University Hospital

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

このビデオ記事は、同じ組織切片内の成体海馬ニューロン新生のすべての段階を検出し定量化するための包括的なプロトコルを示しています。私たちは、異なる宿主種からの適切な抗体が利用できない場合に生じる間接的な多重免疫蛍光の限界を克服する方法を詳しく説明しました。

この手順の全体的な目標は、間接免疫蛍光法の限界を回避して神経前駆細胞を研究することです。異なる宿主動物種由来の適切な一次抗体が利用できない場合。最初に、分裂する細胞を標識するためにチミジン類似体を注入し、その後、組織を回収、処理、およびクライオ切片にスライスします。

その後、逐次多重免疫蛍光法を行い、開始します。非標識一次抗体を塗布し、蛍光標識二次抗体に結合させます。次に、第1の二次抗体の開放ペリコープを第一次抗体種の血清でブロックし、第2の二次抗体が認識する可能性のあるすべての免疫グロブリンを非標識のfabフラグメントで覆います。

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