Name: 調製とキャラクタリゼーション個々のとマルチ薬ロード物理的に捕捉さ高分子ミセル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-08-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: 学ぶ高分子ミセルの調製と特性評価の手法。溶媒鋳造法で薬物を安定に封入し、動的光散乱と透析でサイズと放出特性を評価する。再現性のあるドラッグデリバリーシステムの構築に役立つ。

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この研究は、AACP New Pharmacy Faculty Research Award Program、Medical Research Foundation of Oregon New Investigator Grant、Oregon State University-Startup fund、Pacific University, School of Pharmacy Start-up fundからの助成金によって支援されました。

ソルベントキャスト法により個人およびマルチ薬剤ロードミセルの調製<ol><li>デュアル薬物ミセルのために各1mg（DDM）でDTX 1 mgまたはそれEVR 1ミリグラムまたは両方の薬剤を秤量。 </li><li> PEG 2000の15 mgの秤量- -pla 1800またはPEG 4000 bを - B -pla 2200個人またはDDMのいずれかのために。 </li><li>薬物/薬物や5ミリリットルの丸底フラスコ中のアセトニトリルと場所の0.5ミリリットル中にポリマーを溶解します。 </li><li>ロータリーエバポレーターを用いて減圧下薬（S） - ポリマーアセトニトリル溶液を蒸発させて、薄い薬物分散ポリマーフィルムを形成します。 100rpmで、40°Cのウォーターバスの温度とさらに3分間100ミリバールに還元し、5分間260ミリバールの真空圧力に回転蒸発器を設定します。 </li><li> 50 O℃で脱イオン水0.5mlを有する薬物-ポリマーフィルムを再水和及び穏やかにミセルを形成するために、フラスコを振盪します。 </li><li>結果をフィルター1.5ミリリットル遠心管に任意の未溶解した薬物または汚染物質を除去するために0.2μmのナイロンフィルターを通してミセル溶液をる。 </li></ol>逆相高速液体クロマトグラフィー（RP-HPLC）を用いてミセル中の薬物負荷と安定性の評価2。 <ol><li> 1ml /分の流速で0.1％のリン酸および1％のメタノールを含有するアセトニトリル/水の移動相（62/38）を用いてアイソクラチックモードで、40℃で平衡化C8カラムでRP-HPLC分析を行い、 10μlの注入量。 </li><li>初期薬物負荷を決定するために、RP-HPLCで分析する前に、移動相中の100：新たに調製したミセル（セクション1）1を希釈します。 RP-HPLCにより再評価し、24時間かけてミセル中の薬剤（複数可）の安定性を決定するために、移動相に100希釈したサンプル：ストア希釈していない個々のミセルと48時間室温（25 O℃）でのDDMとは、新鮮な1を準備します。 </li><li>それぞれ227および279 nmでのDTXとEVRピークを監視1.7および5.7分の保持時間で、それぞれ。三連ですべての測定を実行します。平均±SD薬物負荷として存在するデータ。 </li></ol>動的光散乱によってミセル粒子サイズの3アセスメント（DLS） <ol><li> 1.5 mg / mlの最終的なポリマー濃度を得るために、1：20の比率で脱イオン水（セクション1に記載したように）新たに調製されたミセルを希釈します。 </li><li>散乱を決定するために、173℃でHe-Neレーザー（633nm）の強度を測定します。 2分間プレ平衡化した後、25℃ですべての測定を実行します。 </li><li>三連ですべての測定を実行します。分布の多分散指数（PDI）と共に、平均値±SD Z平均サイズとして存在するデータ。 </li></ol>個々のミセルとDDMから4次評価でのインビトロ薬物放出<ol><li>ミセルの1ロード2.5ミリリットルがで3ミリリットル透析カセットにセクションで説明したように、個々のミセルとDDMを準備7,000グラム/モルの分子量カットオフ（MWCO）。 注：このMWCOは、カセットの外に自由に拡散することにより、シンク条件を確保するために関連付けられていないポリマー分子と一緒に遊離薬物（複数可）を有効にするために選ばれました。 </li><li> （株式200 mM溶液を希釈することにより調製）10mMのpH7.4のリン酸緩衝液2.5リットルにカセットを置き、シンク条件を確保するために、バッファごとに3時間を変更します。実験期間を通じて37°Cの時のバッファの温度を維持します。 </li><li> 0、0.5、1、2、3、6、9、12、24、および48時間では、カセット内の溶液の150μLを撤回し、新鮮な緩衝液150μlで交換してください。 </li><li>セクション2で確立された薬物の濃度を決定するためにRP-HPLCを用いてサンプルを分析します。薬剤（複数可）stastiticalソフトウェアを使用して、1つの位相指数関数的会合を持つ単純な拡散モデルに基づく放出データを曲線適合。 </li><li> Eの薬物放出（T 1/2）の50％に達するのに必要な時間を算出しますフィッティング曲線に基づいて、個々のミセルまたはDDMでACH薬。四つですべての測定を実行します。 </li></ol>

<ol><li>Yokoyama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymeric+micelles+as+a+new+drug+carrier+system+and+their+required+considerations+for+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Polymeric micelles as a new drug carrier system and their required considerations for clinical trials.</a> Expert Opin Drug Deliv. 7, 145-158 (2010).</li>
<li>Shin, H. C., Alani, A. W., Rao, D. A., Rockich, N. C., Kwon, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-drug+loaded+polymeric+micelles+for+simultaneous+delivery+of+poorly+soluble+anticancer+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Multi-drug loaded polymeric micelles for simultaneous delivery of poorly soluble anticancer drugs.</a> J Control Release. 140, 294-300 (2009).</li>
<li>Adams, M. L., Lavasanifar, A., Kwon, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphiphilic+block+copolymers+for+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Amphiphilic block copolymers for drug delivery.</a> J Pharm Sci. 92, 1343-1355 (2003).</li>
<li>Oerlemans, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymeric+micelles+in+anticancer+therapy%3A+targeting%2C+imaging+and+triggered+release%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Polymeric micelles in anticancer therapy: targeting, imaging and triggered release.</a> Pharm Res. 27, 2569-2589 (2010).</li>
<li>Shin, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+3-in-1+polymeric+micelle+nanocontainer+for+poorly+water-soluble+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pharm%22%5BJournal%5D)">A 3-in-1 polymeric micelle nanocontainer for poorly water-soluble drugs.</a> Mol Pharm. 8, 1257-1265 (2011).</li>
<li>Hasenstein, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antitumor+activity+of+Triolimus%3A+a+novel+multidrug-loaded+micelle+containing+Paclitaxel+Rapamycin%2C+and+17-AAG%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Antitumor activity of Triolimus: a novel multidrug-loaded micelle containing Paclitaxel Rapamycin, and 17-AAG.</a> Mol Cancer Ther. 11, 2233-2242 (2012).</li>
<li>Mazzaferro, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bivalent+sequential+binding+of+docetaxel+to+methyl-beta-cyclodextrin%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Bivalent sequential binding of docetaxel to methyl-beta-cyclodextrin.</a> Int J Pharm. 416, 171-180 (2011).</li>
<li>Iwase, Y., Maitani, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+and+in+vivo+evaluation+of+liposomal+everolimus+for+lung+carcinoma+and+thyroid+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Pharm+Bull%22%5BJournal%5D)">Preparation and in vivo evaluation of liposomal everolimus for lung carcinoma and thyroid carcinoma.</a> Biol Pharm Bull. 35, 975-979 (2012).</li>
<li>Mishra, G. P., Doddapaneni, B. S., Nguyen, D., Alani, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiangiogenic+effect+of+docetaxel+and+everolimus+as+individual+and+dual-drug-loaded+micellar+nanocarriers%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Antiangiogenic effect of docetaxel and everolimus as individual and dual-drug-loaded micellar nanocarriers.</a> Pharm Res. 31, 660-669 (2014).</li>
<li>Xu, W., Ling, P., Zhang, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymeric+micelles%2C+a+promising+drug+delivery+system+to+enhance+bioavailability+of+poorly+water-soluble+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Polymeric micelles, a promising drug delivery system to enhance bioavailability of poorly water-soluble drugs.</a> J Drug Deliv. 2013, 340315(2013).</li>
<li>Lavasanifar, A., Samuel, J., Kwon, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poly%28ethylene+oxide%29-block-poly%28L-amino+acid%29+micelles+for+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Poly(ethylene oxide)-block-poly(L-amino acid) micelles for drug delivery.</a> Adv Drug Deliv Rev. 54, 169-190 (2002).</li>
</ol>

著者らは開示するものは何もない。

薬物送達のための高分子ミセルの使用は、その多用途性とさまざまな病状に対する疎水性薬物を送達する能力により拡大し続けています。 したがって、細胞培養または動物で使用する前にこれらの製剤を調製および特性評価するために必要な技術は、薬物とポリマーの間の最適な組み合わせを決定するための重要な最初のステップです。 PEG-b-PLAは、ドラッグデリバリー目的で優れた両親媒性ブロック共重合体です。 ただし、親水性および疎水性切片のブロック長は、薬物のカプセル化と安定性に重要な役割を果たし、組み込まれるために選択された薬物に固有のものです。 したがって、他の研究を開始する前に、薬物とポリマーの最適なペアリングを特定するために、複数のブロック共重合体を使用した最初の研究が必要になる場合があります。
ミセル調製の溶媒キャスティング方法は十分に文書化されており、再現性のある方法です。 ロータリーエバポレーターの実際の条件は、ウォーターバス温度、ロータリーエバポレーターの時間、回転速度、真空圧を変更することにより、混合物に合わせて最適化する必要があります。 最終結果は、連続的で気泡のな...

親水性および疎水性ドメインからなる繰り返し構造を有する両親媒性ブロック共重合体は自発的に重合体ミセルとして知られている三次元の高分子集合体を形成するために自己組織化することができます。これらの構造は、親水性シェルによって囲まれた内側の疎水性コアを有します。疎水性コアは、ポリマー骨格上に疎水性相互作用を介して、または化学結合により物理的捕捉のいずれかによって疎水性薬物を組み込む能力を有している。1、多くの利点は、薬物送達のためのミセルを形成するために、これらのブロックコポリマーを使用して存在します。これらは難溶性薬物、組み込まれた薬物の薬物動態を改善し、生体適合性および/ ​​またはポリマーの生分解性の組み込みは、従来の可溶化剤への安全な代替なり含む2高分子ミセルを使用する別の利点は、15-間に、それらのコロイド粒子のサイズであります150nmの3、PAのためにそれらが魅力的renteral配信。このため、過去20年間にポリマーミセルは、特に、癌治療のための難水溶性薬物のための実行可能な薬物送達システムとして浮上している。3,4 現在臨床試験を受けている癌治療のための5つの高分子ミセル製剤がある。最後にポリエチレンオキシドを含むトリブロック共重合体であるが、臨床試験中でミセルの4つは、PEGベースのジブロックコポリマーです。これらのミセルのサイズは、85ナノメートル、20ナノメートルから変化しました。 PEGベースのポリマーを使用することの利点は、その生体適合性であり、第二のブロックに応じて、また生分解性であることができます。 polyethyleneglycol- ブロック -polylactic酸（-pla PEG- B）高分子ミセルに基づいて、最近、新しい薬物送達システムは、複数の抗癌剤の同時送達のために開発されています。 PEG-B-PLAミセルは、生体適合性および生分解性の両方です。ロードされたミセルのように示されているこれらの多剤ynergistic インビトロおよびインビボ 2,5,6- における異なる癌モデルの阻害および抵抗を防止するために化学療法で複数の薬物を利用し、毒性を低下させる現在のパラダイムに適合。したがって、癌および他の疾患状態において使用するためのこれらのミセルの薬物送達システムを調製し、特徴付けるにおける大きな関心があります。 私たち以下の作業では、このようなミセルが関心の疾患状態でそれらを評価する前に準備し、特徴付けすることが可能なステップバイステップのプロセスを概説しています。この研究の目的のために2難溶性の抗がん剤は、ドセタキセル（DTX）及びエベロリムス（EVR）が選択されています。 DTXとEVRの両方がそれぞれML / 1.9と9.6μgのに固有の水溶解性と難水溶性化合物である。分子量の異なる7,8-二PEG-Bの -plaポリマーを配合、ポリマーのためのビルディングブロックとして、このプロトコルで使用されていましたミセル、-pla 1800（3800ダ）およびPEG 4000 B - - -pla 2200（6200 Da）でBこれらのポリマーは、PEG 2000です。 PEG-Bの -plaミセルは、したがって、個別に組み合わせてDTXとEVRのためのナノキャリアとしてのユニークなプラットフォームを提供することができます。必要な試薬/材料および装置は、これらのミセルを準備し、特徴づけるために必要な、表1に記載されています。

<table><tbody><tr><td>PEG2000-b-PLA1800</td><td>Advanced Polymer Materials, Inc</td><td>6-01- PLA/2000</td><td>PLA MW は</td></tr><tr><td>PEG4000-b-PLA2200</td><td>Advanced Polymer Materials, Inc</td><td>6-01- PLA/4000</td><td>PLA MW を注文して指定できます</td></tr><tr><td>Docetaxel</td><td>LC Laboratories</td><td>D-1000</td><td>100 mg</td></tr><tr><td>Everolimus</td><td>LC Laboratories</td><td>E-4040</td><td>100 mg</td></tr><tr><td>アセトニトリル</td><td>EMD/VWR</td><td>EM-AX0145-1</td><td>HPLC グレード 4L</td></tr><tr><td>丸底フラスコ&nbsp;</td><td>Glassco/VWR</td><td>89426-496</td><td>5 ml</td></tr><tr><td>RV 10 制御ロータリーエバポレーター</td><td>IKA Works</td><td>8025001</td><td>Rotoevaporator</td></tr><tr><td>島津 HPLC DAD検出器付き</td><td>島</td><td></td>津 <td>RP-HPLC</td></tr><tr><td>Slide-a-lyzer 透析カセット MWCO 7000</td><td>Thermo Scientific, Inc</td><td>66370</td><td>3 ml</td></tr><tr><td>リン酸緩衝液 pH 7.4, 200 mM</td><td>VWR</td><td>100190-870</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>Malvern NanoZS</td><td>Malvern Instruments, UK</td><td></td><td>DLS</td></tr><tr><td>ナイロンフィルター</td><td>Acrodisc/VWR</td><td>28143-242</td><td>13 mm; 0.2&micro;M</td></tr><tr><td>リン酸、NF</td><td>Spectrum Chemical/VWR</td><td>700000-626</td><td>100 ml</td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td><a href="http://www.graphpad.com/">www.graphpad.com</a></td><td></td><td>Analysis software</td></tr><tr><td>Zorbax SB-C8 Rapid Resolution cartridge&nbsp;</td><td>アジレントテクノロジー</td>ズ<td>866953-906</td><td>4.6 &times;75 mm、3.5 &#956;メートル</td></tr></tbody></table>

調製とキャラクタリゼーション個々のとマルチ薬ロード物理的に捕捉さ高分子ミセル

Preparation and Characterization of Individual and Multi-drug Loaded Physically Entrapped Polymeric Micelles

polyethyleneglycol- ブロック -polylactic酸（PEG-B-PLA）のような両親媒性ブロックコポリマーは、水性環境中の親水性シェルによって囲まれた疎水性コアを形成し、その臨界ミセル濃度以上のミセルに自己組織化することができます。これらのミセルのコアは、ドセタキセル（DTX）とエベロリムス（EVR）のような疎水性、水難溶性薬物をロードするために利用することができます。ミセル構造と薬物負荷能力の体系的特徴付けを行うことができ、 インビトロおよびインビボ研究の前に重要です。本明細書に記載されたプロトコルの目的は、標準化されたミセル生成物を達成するの​​に必要な特性評価手順を提供することにあります。 DTXとEVRはそれぞれ、これらのミセルの調製は、それぞれ、1.86および1.85 mg / mlの、にDTXとEVRの水溶性を増加させ、溶媒キャスティングを介して達成することができるML / 1.9と9.6μgの固有の溶解度を有します。 evalのミセル中の薬物安定性48時間にわたって室温でuatedは、薬物の97％以上が溶液中に保持されていることを示しています。ミセルのサイズは、動的光散乱法を用いて評価し、これらのミセルの大きさが50nm未満であったポリマーの分子量に依存することが示されました。ミセルからの薬物放出は、48時間にわたって37℃でO pH7.4のシンク条件下で透析を用いて評価しました。カーブフィッティングの結果は、薬物の放出は、それが拡散が駆動されることを示す一次プロセスによって駆動されることを示します。

個々のDTXまたはEVRミセルおよびミセルが正常にPEG 4000のいずれかで処方される-pla bは PEG-でDTXとEVR DDM - B -pla 2200またはPEG 2000 - B -pla 1800（ 図1）。 48時間（ 図2）を介して-pla 1800 bは - -pla 2200またはPEG 2000 B - DTX、EVR、とDDMは、PEG 4000で同様の安定性を示しました。 PEG 4000でEVRの初期薬物負荷- -pla 2200及びPEG 2000 B - -pla 1800 Bそれぞれ/ 1....

このプロトコルの目標は、両親媒性ブロック共重合体で構成されるミセル薬物送達システムにおける物理的に閉じ込められた難水溶性薬物の調製と特性評価を記述することです。

Amphiphilic block copolymers like polyethyleneglycol-block-polylactic acid (PEG-b-PLA) can self-assemble into micelles above their critical micellar ...

本実験の総合的な目的は、関心のある疾患状態で評価を行う前に、薬物を担持させたmy cellsを調製し、その特性を解析する段階的なプロセスを概説することである。これは、溶媒キャスト法を用いてmy cellsを調製し、研究用に再現性のあるmy cellsを生成することで達成される。第二のステップとして、my cellsの担持安定性とサイズを評価し、臨床的に有用な濃度を担持および保持できる能力を決定する。次に、in vivoでの安定性を評価する前に、my cellsが適切なin vitro放出特性を備えているかを確認するため、my cellsからの薬物放出速度を測定します。結果から、再現性高く作製された安定なmy cellsは、ここで提示した評価手法に基づき、さまざまな疾患状態におけるドラッグデリバリーを追求するためのプラットフォームとなり得ることが示されました。本手法の、平衡担持法や透析法などの既存手法に対する主な利点は、再現性のある薬物担持量とサイズを持つミオシンを、より迅速に調製できることです。ナノスケールの薬剤は従来の形態を超えた可能性を提供するため、この技術の意義はさまざまな疾患状態の治療や診断へと広がります。一般的に、初心者の方は、これらの手法が単純であっても、放出試験を行う必要があるため、バースト効果を正確に評価することに苦労するかもしれません。これらの手順のデモンストレーションは、私の大学院生のShaman Dukeと、共同研究者のDeepaが行います。まず、2剤搭載ミセル（DDM）用に、DTX 1 mg、EVR 1 mg、およびPeg 4,000 block PLA 2200 15 mgを量り取ります。量り取り後、薬剤とポリマーを0.5 mLのアセトニトリルに溶解し、その溶液を5 mLの丸底フラスコに移します。ロータリーエバポレーターを用いて減圧下で薬剤・ポリマーのアセト溶液を蒸発させ、薄い薬剤分散ポリマーフィルムを形成させます。続いて、50 °Cに予熱した脱イオン水0.5 mLを用いて薬剤ポリマーフィルムを再水和させ、50 °Cの恒温水槽内でフラスコを穏やかに振とうしてミセルを形成させます。溶液を遠心管に移し、7,200 ×gで3分間遠心分離します。溶液を針で吸い上げ、0.2 µmのナイロンフィルターを用いて得られたミセル溶液を新しい1.5 mL遠心管にろ過し、未溶解の薬剤や不純物を除去します。この時点で、40 °Cに平衡化したC8カラムを用い、アセトニトリルと水の移動相によるアイソクラティックモードで逆相HPLC分析を行います。初期の薬剤担持量を決定するため、逆相HPLCで分析する前に、調製したばかりのミセルをアセトニトリルで1:100の割合で希釈します。希釈していない細胞サンプルを室温で48時間保存した後、新鮮な希釈サンプルを調製し、逆相HPLCによって再評価を行うことで、細胞内における48時間後の薬剤安定性を決定します。DTXおよびDVRのピークを、それぞれ227および279 nmでモニタリングし、保持時間はそれぞれ1.7分および5.7分とします。データは、薬剤充填量の平均値±標準偏差として示します。次に、調製したばかりのmy cellsと脱イオン水を1:20の比率で希釈し、最終的なポリマー濃度を1.5 mg/mLにします。この溶液をキュベットに移し、動的光散乱測定を行います。173度におけるヘリウムネオンレーザーの強度を測定し、散乱を決定します。データを、平均Z平均粒子径の平均値±標準偏差、および分布の多分散指数（PDI）として提示します。前述の方法でDDMを調製した後、my cells 2.5 mLを分画分子量7,000 g/molの3 mL透析カセットに充填します。このカセットを、以下の間隔で10 mM pH 7.4 リン酸緩衝液 2.5 Lの中に浸します。溶液を150 µL分取し、150 µLの新しいバッファーと交換します。同期条件を確保するため、3時間ごとにバッファーを交換してください。逆相HPLCを用いてサンプルを分析し、薬物濃度曲線を決定します。統計ソフトD-T-X-E-V-Rを用いて、単相指数関数的結合による単純拡散モデルに基づき薬物放出データをフィッティングさせたところ、DDMはPEG 2000ブロックPLA 1800およびPEG 2000ブロックPLA 2200において、48時間にわたり同様の安定性を示した。いずれの細胞においても、室温での48時間後における初期充填量の保持率は97%以上であった。動的光散乱の結果に基づくと、すべての細胞は単峰性分布を示し、PDI値は0.2未満であった。データに基づくと、個々のmycellおよびDDMからのDTX放出率は、48時間で約60%でした。個々のmycellおよびDDMからのEVR放出率は、それぞれ60%および50%でした。個々のmycellおよびDDMから50%の薬剤が放出されるまでに要した時間と、適合度データ（goodness of fit data）をここに示します。EVR個体を除くすべての細胞において、曲線適合度は0.950を上回っており、これは1次放出の仮定が、個々の細胞およびDDMからの薬物放出を説明する良好な近似であることを意味します。これらの手法を習得すれば、数時間から数週間のうちに、薬剤やポリマーのライブラリに対して日常的に実施することが可能です。本手順を行う際は、細胞培養や動物モデルに移行する前に、細胞の特性を完全に評価することが重要です。治療効率における薬物輸送システムの役割という疑問に答えるために、リポソーム輸送システムのような他の輸送システムの評価や特性解析を行うことも可能です。このビデオを視聴することで、疾患状態での評価を行う前に、薬剤をロードした細胞をどのように調製し、特性評価するかについて十分に理解できるはずです。

preparation-characterization-individual-multi-drug-loaded-physically

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Chemistry

化学

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