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2016年11月27日
2016年11月27日
•本稿では、変異を熱安定をスクリーニングヒトセロトニントランスポーターの精製、高親和性抗体を生成し、抗うつ薬のSの -シタロプラムにバインドされたセロトニントランスポーター-抗体複合体を結晶化する方法について説明します。このプロトコルは、他の挑戦的な膜輸送体、受容体、およびチャネルの研究に適合させることができます。
Chapters in this video
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タイトル
0:47
熱安定性スクリーニングのための付着性HEK293S GnTI-細胞へのトランスフェクション
2:24
シタロプラムを用いたシンチレーション近接法による熱安定性スクリーニング
4:18
HEK293S GnTI-細胞におけるヒトセロトニントランスポーターの発現
5:24
免疫法および結晶化のためのセロトニントランスポーターのアフィニティー精製
7:12
トランスポーター-抗体複合体の形成およびサイズ排除クロマトグラフィーによる分離
8:21
ハンギングドロップ法によるトランスポーター-抗体複合体の結晶化
10:01
結果:抗うつ薬結合状態におけるセロトニントランスポーターの熱安定化および結晶化
11:25
結論
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