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12:21 分
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2016年11月27日
2016年11月27日
•本稿では、変異を熱安定をスクリーニングヒトセロトニントランスポーターの精製、高親和性抗体を生成し、抗うつ薬のSの -シタロプラムにバインドされたセロトニントランスポーター-抗体複合体を結晶化する方法について説明します。このプロトコルは、他の挑戦的な膜輸送体、受容体、およびチャネルの研究に適合させることができます。
Chapters in this video
0:05
Title
0:47
Transfection of Adherent HEK293S GnTI-cells for Thermostability Screen
2:24
Scintillation Proximity-based Thermostability Screen with Citalopram
4:18
Expression of the Human Serotonin Transporter in HEK293S GnTI-cells
5:24
Affinity-purification of the Serotonin Transporter for Immunization and Crystallization
7:12
Formation of Transporter-antibody Complexes and Separation by Size-exclusion Chromatography
8:21
Crystallization of Transporter-antibody Complexes by Hanging Drop
10:01
Results: Thermostabilization and Crystallization of the Serotonin Transporter in an Antidepressant-bound State
11:25
Conclusion
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