にバインドされた熱安定、発現、精製、およびヒトセロトニントランスポーターの結晶化

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2016年11月27日

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本稿では、変異を熱安定をスクリーニングヒトセロトニントランスポーターの精製、高親和性抗体を生成し、抗うつ薬のSの -シタロプラムにバインドされたセロトニントランスポーター-抗体複合体を結晶化する方法について説明します。このプロトコルは、他の挑戦的な膜輸送体、受容体、およびチャネルの研究に適合させることができます。

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S-シタロプラム結合

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タイトル

0:47

熱安定性スクリーニングのための付着性HEK293S GnTI-細胞へのトランスフェクション

2:24

シタロプラムを用いたシンチレーション近接法による熱安定性スクリーニング

4:18

HEK293S GnTI-細胞におけるヒトセロトニントランスポーターの発現

5:24

免疫法および結晶化のためのセロトニントランスポーターのアフィニティー精製

7:12

トランスポーター-抗体複合体の形成およびサイズ排除クロマトグラフィーによる分離

8:21

ハンギングドロップ法によるトランスポーター-抗体複合体の結晶化

10:01

結果:抗うつ薬結合状態におけるセロトニントランスポーターの熱安定化および結晶化

11:25

結論

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