High-throughput Screening for Protein-based Inheritance in <em>S. cerevisiae</em>

James S. Byers; Daniel F. Jarosz

doi:10.3791/56069

JoVE Journal
Biology

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JoVE Journal Biology

High-throughput Screening for Protein-based Inheritance in S. cerevisiae

出芽酵母におけるタンパク質ベース継承の高速スクリーニング

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08:12 min

August 8, 2017

DOI: 10.3791/56069-v

James S. Byers¹, Daniel F. Jarosz^1,2

¹Department of Developmental Biology,Stanford University School of Medicine, ²Department of Chemical and Systems Biology,Stanford University School of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

このプロトコルでは、出芽酵母でタンパク質に基づく継承のため画面の機能的に高スループット方法論について説明します。

このハイスループット酵母表現型の全体的な目標は、タンパク質ベースの遺伝の代理として、発現が過ぎ去ったという持続的な表現型の記憶を不正にするタンパク質をスクリーニングすることです。この方法は、酵母プリオン分野の重要な問題、例えば、このタイプの遺伝を不正に行うことができるタンパク質の数などに答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、多くのタンパク質と経路を偏りなくスクリーニングできることです。

この手順は、テキストプロトコルに記載されているように、96ウェルプレートで30°Cの適切な酵母細胞を増殖させることから開始します。培養物を目視検査して、培養物が飽和していること、各ウェルの底に細胞が目視で見えることを確認します。リキッドハンドリングロボットを使用して、ウェルあたり45マイクロリットルの適切な培地を含む384ウェルプレートを準備します。

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