Name: 毒PLA2の膜栄養作用に及ぼすホスファチジルイノシトールリン酸基の影響を調べるためのリポソーム膜透過性アッセイ (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 31 s
Description: 学ぶ リポソーム膜透過性アッセイを用いて、ホスファチジルイノシトールリン酸基が毒PLA₂の膜栄養作用に与える影響を評価する方法です。高感度でコスト効率の良い膜バイオ物理学研究に適しています。

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<ol><li>De Matteis, A., De Camilli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphoinositides%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Lipids%22%5BJournal%5D)">Phosphoinositides.</a> Biochim Biophys Acta Lipids. 1851 (6), 697-918 (2015).</li>
<li>Hokin, M. R., Hokin, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzyme+secretion+and+the+incorporation+of+P32+into+phospholipids+of+pancreas+slices%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Enzyme secretion and the incorporation of P32 into phospholipids of pancreas slices.</a> J Biol Chem. 203 (2), 967-977 (1953).</li>
<li>Hokin, L. E., Hokin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+acetylcholine+on+the+turnover+of+phosphoryl+units+in+individual+phospholipids+of+pancreas+slices+and+brain+cortex+slices%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Effects of acetylcholine on the turnover of phosphoryl units in individual phospholipids of pancreas slices and brain cortex slices.</a> Biochim Biophys Acta. 18, 102-110 (1955).</li>
<li>Hokin, L. E., Hokin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphoinositides+and+protein+secretion+in+pancreas+slices%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Phosphoinositides and protein secretion in pancreas slices.</a> J Biol Chem. 233, 805-810 (1958).</li>
<li>Lolicato, F., Nickel, W., Haucke, V., Ebner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphoinositide+switches+in+cell+physiology%3A+from+molecular+mechanisms+to+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Phosphoinositide switches in cell physiology: from molecular mechanisms to disease.</a> J Biol Chem. 300, 105757(2024).</li>
<li>Powis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pleckstrin+homology+%28PH%29+domain%2C+structure%2C+mechanism%2C+and+contribution+to+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Pleckstrin homology (PH) domain, structure, mechanism, and contribution to human disease.</a> Biomed Pharmacother. 165, 115024(2023).</li>
<li>Burke, J. E., Triscott, J., Emerling, B. M., Hammond, G. R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+PI3Ks%3A+targeting+phosphoinositide+kinases+in+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Beyond PI3Ks: targeting phosphoinositide kinases in disease.</a> Nat Rev Drug Discov. 22, 357-386 (2023).</li>
<li>Palamiuc, L., Ravi, A., Emerling, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphoinositides+in+autophagy%3A+current+roles+and+future+insights%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+J%22%5BJournal%5D)">Phosphoinositides in autophagy: current roles and future insights.</a> FEBS J. 287, 222-238 (2020).</li>
<li>Calvillo-Robledo, A., Cervantes-Villagrana, R. D., Morales, P., Marichal-Cancino, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oncogenic+lysophosphatidylinositol+%28LPI%29%2FGPR55+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">The oncogenic lysophosphatidylinositol (LPI)/GPR55 signaling.</a> Life Sci. 301, 120596(2022).</li>
<li>Madsen, R. R., Vanhaesebroeck, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cracking+the+context-specific+PI3K+signaling+code%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Signal%22%5BJournal%5D)">Cracking the context-specific PI3K signaling code.</a> Sci Signal. 13, eaay2940(2020).</li>
<li>Wills, R. C., Hammond, G. R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PI%284%2C5%29P2%3A+signaling+the+plasma+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">PI(4,5)P2: signaling the plasma membrane.</a> Biochem J. 479, 2311-2325 (2022).</li>
<li>Epand, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Features+of+the+phosphatidylinositol+cycle+and+its+role+in+signal+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Membr+Biol%22%5BJournal%5D)">Features of the phosphatidylinositol cycle and its role in signal transduction.</a> J Membr Biol. 250, 353-366 (2017).</li>
<li>De Craene, J. O., Bertazzi, D. L., Bär, S., Friant, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphoinositides%2C+major+actors+in+membrane+trafficking+and+lipid+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Phosphoinositides, major actors in membrane trafficking and lipid signaling pathways.</a> Int J Mol Sci. 18, E634(2017).</li>
<li>Ivanova, A., Atakpa-Adaji, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphatidylinositol+4%2C5-bisphosphate+and+calcium+at+ER-PM+junctions%3A+complex+interplay+of+simple+messengers%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Mol+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate and calcium at ER-PM junctions: complex interplay of simple messengers.</a> Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 1870, 119475(2023).</li>
<li>Premrajan, P., Abhithaj, J. A., Variyar, E. J. PLA2: implications in neurological disorders as a prospective therapeutic target. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPremrajan%2C+P+%22Phospholipases+in+Physiology+and+Pathology%22">Phospholipases in Physiology and Pathology</a>. 2, Academic Press. 139-158 (2023).</li>
<li>André, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+cytosolic+phospholipase+A2+as+a+potential+therapeutic+strategy+for+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Alzheimers+Dis+Rep%22%5BJournal%5D)">Modulation of cytosolic phospholipase A2 as a potential therapeutic strategy for Alzheimer's disease.</a> J Alzheimers Dis Rep. 7 (1), 1395-1426 (2023).</li>
<li>Trotter, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+phospholipase+A2+in+multiple+sclerosis%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Mult+Scler+Relat+Disord%22%5BJournal%5D)">The role of phospholipase A2 in multiple sclerosis: a systematic review and meta-analysis.</a> Mult Scler Relat Disord. 27, 206-213 (2019).</li>
<li>Schaloske, R. E., Dennis, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+phospholipase+A2+superfamily+and+its+group+numbering+system%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">The phospholipase A2 superfamily and its group numbering system.</a> Biochim Biophys Acta. 1761 (11), 1246-1259 (2006).</li>
<li>Petrovic, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ammodytoxin%2C+a+neurotoxic+secreted+phospholipase+A2+can+act+in+the+cytosol+of+the+nerve+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Ammodytoxin, a neurotoxic secreted phospholipase A2 can act in the cytosol of the nerve cell.</a> Biochem Biophys Res Commun. 324 (3), 981-985 (2004).</li>
<li>Gasanov, S. E., Dagda, R. K., Rael, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Snake+venom+cytotoxins%2C+phospholipase+A2s%2C+and+Zn-dependent+metalloproteinases%3A+mechanisms+of+action+and+pharmacological+relevance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Snake venom cytotoxins, phospholipase A2s, and Zn-dependent metalloproteinases: mechanisms of action and pharmacological relevance.</a> J Clin Toxicol. 4 (1), 1000181(2014).</li>
<li>Harris, J. B., Scott-Davey, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secreted+phospholipases+A2+of+snake+venoms%3A+effects+on+the+peripheral+neuromuscular+system+with+comments+on+the+role+of+phospholipases+A2+in+disorders+of+the+CNS+and+their+uses+in+industry%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Secreted phospholipases A2 of snake venoms: effects on the peripheral neuromuscular system with comments on the role of phospholipases A2 in disorders of the CNS and their uses in industry.</a> Toxins (Basel). 5 (12), 2533-2571 (2013).</li>
<li>Ramazanova, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterodimeric+neurotoxic+phospholipases+A2%3A+the+first+proteins+from+venom+of+recently+established+species+Vipera+nikolskii%3A+implication+of+venom+composition+in+viper+systematics%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicon%22%5BJournal%5D)">Heterodimeric neurotoxic phospholipases A2: the first proteins from venom of recently established species Vipera nikolskii: implication of venom composition in viper systematics.</a> Toxicon. 51 (4), 524-537 (2008).</li>
<li>Chaudary, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sphingomyelin+inhibits+hydrolytic+activity+of+heterodimeric+PLA2+in+model+myelin+membranes%3A+pharmacological+relevance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Membr+Biol%22%5BJournal%5D)">Sphingomyelin inhibits hydrolytic activity of heterodimeric PLA2 in model myelin membranes: pharmacological relevance.</a> J Membr Biol. 258, 29-46 (2025).</li>
<li>Li, M., Gasanoff, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cationic+proteins+rich+in+lysine+residue+trigger+formation+of+non-bilayer+lipid+phases+in+model+and+biological+membranes%3A+biophysical+methods+of+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Membr+Biol%22%5BJournal%5D)">Cationic proteins rich in lysine residue trigger formation of non-bilayer lipid phases in model and biological membranes: biophysical methods of study.</a> J Membr Biol. 256 (4-6), 373-391 (2023).</li>
<li>Gasanoff, E. S., Dagda, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cobra+venom+cytotoxins+as+a+tool+for+probing+mechanisms+of+mitochondrial+energetics+and+understanding+mitochondrial+membrane+structure%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Cobra venom cytotoxins as a tool for probing mechanisms of mitochondrial energetics and understanding mitochondrial membrane structure.</a> Toxins. 16, 287(2024).</li>
<li>Li, F., Shrivastava, I. H., Hanlon, P., Dagda, R. K., Gasanoff, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanism+by+which+cobra+venom+cardiotoxins+interact+with+the+outer+mitochondrial+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanism by which cobra venom cardiotoxins interact with the outer mitochondrial membrane.</a> Toxins. 12 (7), 425(2020).</li>
<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Naja+mosambica+mossambica+cobra+cardiotoxin+targets+mitochondria+to+disrupt+mitochondrial+membrane+structure+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Naja mosambica mossambica cobra cardiotoxin targets mitochondria to disrupt mitochondrial membrane structure and function.</a> Toxins. 11, 152(2019).</li>
<li>Gasanov, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Naja+naja+oxiana+cobra+venom+cytotoxins+CTI+and+CTII+disrupt+mitochondrial+membrane+integrity%3A+implications+for+basic+three-fingered+cytotoxins%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Naja naja oxiana cobra venom cytotoxins CTI and CTII disrupt mitochondrial membrane integrity: implications for basic three-fingered cytotoxins.</a> PLoS One. 10 (6), 1-28 (2015).</li>
<li>Akosah, Y., Yang, J., Pavlov, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inorganic+polyphosphate+and+ion+transport+across+biological+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Soc+Trans%22%5BJournal%5D)">Inorganic polyphosphate and ion transport across biological membranes.</a> Biochem Soc Trans. 52 (2), 671-679 (2024).</li>
<li>Weast, R. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWeast%2C+RC+%22CRC+Handbook+of+Chemistry+and+Physics%22">CRC Handbook of Chemistry and Physics</a>. , 62nd ed, CRC Press. (1982).</li>
<li>Lemmon, M. A., Ferguson, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Signal-dependent+membrane+targeting+by+pleckstrin+homology+%28PH%29+domains%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Signal-dependent membrane targeting by pleckstrin homology (PH) domains.</a> Biochem J. 350 (Pt 1), 1-18 (2000).</li>
<li>Ford, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Curvature+of+clathrin-coated+pits+driven+by+epsin%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Curvature of clathrin-coated pits driven by epsin.</a> Nature. 419 (6905), 361-366 (2002).</li>
<li>Khan, S. A., Ilies, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+phospholipase+A2+superfamily%3A+structure%2C+isozymes%2C+catalysis%2C+physiologic+and+pathologic+roles%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">The phospholipase A2 superfamily: structure, isozymes, catalysis, physiologic and pathologic roles.</a> Int J Mol Sci. 24 (2), 1353(2023).</li>
<li>De Oliveira, A. L. N., Lacerda, M. T., Ramos, M. J., Pedro, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viper+venom+phospholipase+A2+database%3A+the+structural+and+functional+anatomy+of+a+primary+toxin+in+envenomation%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Viper venom phospholipase A2 database: the structural and functional anatomy of a primary toxin in envenomation.</a> Toxins. 16 (2), 71(2024).</li>
<li>Hayashi, D., Dennis, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiating+human+phospholipase+A2%27s+activity+toward+phosphatidylinositol%2C+phosphatidylinositol+phosphate+and+phosphatidylinositol+bisphosphate%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Mol+Cell+Biol+Lipids%22%5BJournal%5D)">Differentiating human phospholipase A2's activity toward phosphatidylinositol, phosphatidylinositol phosphate and phosphatidylinositol bisphosphate.</a> Biochim Biophys Acta Mol Cell Biol Lipids. 1869, 159527(2024).</li>
<li>Alekseeva, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterodimeric+V.+nikolskii+phospholipases+A2+induce+aggregation+of+the+lipid+bilayer%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicon%22%5BJournal%5D)">Heterodimeric V. nikolskii phospholipases A2 induce aggregation of the lipid bilayer.</a> Toxicon. 133, 169-179 (2017).</li>
<li>Burke, J. E., Dennis, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phospholipase+A2+structure%2Ffunction%2C+mechanism%2C+and+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Phospholipase A2 structure/function, mechanism, and signaling.</a> J Lipid Res. 50, S237-S242 (2009).</li>
<li>Dennis, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phospholipase+A2+enzymes%3A+physical+structure%2C+biological+function%2C+disease+implication%2C+chemical+inhibition%2C+and+therapeutic+intervention%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Rev%22%5BJournal%5D)">Phospholipase A2 enzymes: physical structure, biological function, disease implication, chemical inhibition, and therapeutic intervention.</a> Chem Rev. 111 (10), 6130-6185 (2011).</li>
<li>Gasanov, S. E., Kim, A. A., Yaguzhinski, L. S., Dagda, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-bilayer+structures+in+mitochondrial+membranes+regulate+ATP+synthase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Biomembr%22%5BJournal%5D)">Non-bilayer structures in mitochondrial membranes regulate ATP synthase activity.</a> Biochim Biophys Acta Biomembr. 1860, 586-599 (2018).</li>
<li>Aripov, T. F., Gasanov, S. E., Salakhutdinov, B. A., Rozenshtein, I. A., Kamaev, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+Asian+cobra+venom+cytotoxins-induced+aggregation%2C+permeability+and+fusion+of+liposomes%5BTitle%5D)+AND+%22Gen+Physiol+Biophys%22%5BJournal%5D)">Central Asian cobra venom cytotoxins-induced aggregation, permeability and fusion of liposomes.</a> Gen Physiol Biophys. 8, 459-474 (1989).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>V. nikolskiiバイパーの毒PLA2の基本サブユニットHDP-2P、HDP-2、純度98.5%およびnbsp;</td><td>モスクワ生物有機化学研究所</td><td></td><td>PMID:18083205のポトコールによるHDP-2の単離。HDP-2PはDEAE Sephadex A-50&nbspによってHDP-2から精製されました。&nbsp;</td></tr><tr><td>カルジオリピン(心臓、牛)(ナトリウム塩)、>99%</td><td>マックリン</td><td>C916138</td><td></td></tr><tr><td>コエンザイムA、フジフィルム和光s NEFAキット&nbsp;</td><td>アメリカ合衆国マサチューセッツ州レキシントン</td><td></td><td></td></tr><tr><td>透析チューブセルロース膜分子量カットオフ1.0 kDa</td><td>シグマ・オルドリッチ・トレーディング株式会社(中国・上海)および</td><td></td><td></td></tr><tr><td>デジタル制御の水タンクサーモスタット&nbsp;</td><td>楊光明医療機器有限公司(北京、中国)およびnbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>電子高精度分析天秤 FA2004&nbsp;</td><td>上海邁夷有限公司、中国</td><td></td><td></td></tr><tr><td>景華752 紫外線可視光レンジ分光光度計</td><td>上海景華インスツルメンツ有限公司、上海、中国</td><td></td><td></td></tr><tr><td>L-&α;-ホスファチジルコリン(卵、鶏肉)&ge;95%</td><td>マックリン</td><td>L799415</td><td></td></tr><tr><td>L-&α;-ホスファチジルノシトール(肝臓、牛)(ナトリウム塩)&ge;99%</td><td>マックリン</td><td>L780292</td><td></td></tr><tr><td>L-&α;-ホスファジジルノシトール-4,5-ビスリン酸(脳、豚)(アンモニウム塩)、&ge;99%</td><td>マックリン</td><td>L996223</td><td></td></tr><tr><td>L-&α;-ホスファチジルノシトール-4-リン酸(脳、豚)(アンモニウム塩)、99%</td><td>マックリン</td><td>L970250</td><td></td></tr><tr><td>L-&アルファ;-ホスファチジルセリン(脳、豚)(ナトリウム塩)、>99%</td><td>マックリン</td><td>L864755</td><td></td></tr><tr><td>磁気攪拌器 JB-3&nbsp;</td><td>上海レイチ JB-3</td><td></td><td></td></tr><tr><td>pHメーター PHS-3C&nbsp;</td><td>上海INESA科学機器有限公司、中国</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TGL-16Bマイクロ遠心分離機&nbsp;</td><td>上海3安亭社、上海、中国</td><td></td><td></td></tr><tr><td>超音波ディスペンサー Yt-JY96-IIN&nbsp;</td><td>上海イェトゥオ技術有限公司、中国</td><td></td><td></td></tr><tr><td>真空ポンプ TW-1M</td><td>廷威有限公司、中国・文嶺</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

毒pla2の膜栄養作用に及ぼすホスファチジルイノシトールリン酸基の影響を調べるためのリポソーム膜透過性アッセイ

A Liposome Membrane Permeability Assay for Investigating the Effects of Phosphatidylinositol Phosphate Groups on Membranotropic Action of Venom PLA2

毒PLA2の膜栄養作用に及ぼすホスファチジルイノシトールリン酸基の影響を調べるためのリポソーム膜透過性アッセイ

We developed a novel, cost-effective, and highly sensitive assay for assessing liposomal membrane permeability based on ligand substitution reactions ...

a-liposome-membrane-permeability-assay-for-investigating-effects

Research

JoVE Journal

Biochemistry

生物化学

そのターゲットの脂質とタンパク質の相互作用をテストするために我々は、MACSとターゲットの脂質とアネキシンV結合ホスファチジルセリンから合成されたアネキシンV...

磁気活性化細胞選別（LIMACS）を使用して、脂質小胞を介したアフィニティクロマトグラフィー：タンパク質脂質相互作用を解析する新手法

このプロトコルの詳細、大きな一枚膜脂質小胞へのペプチド移行の定量的測定のための方法。また、このメソッドは、膜の転座の割合に関する情報を提供し、効率的かつ自発的に脂質二重層を横切るペプチドを同定するために使用することができます。...

大型単層小胞へのペプチドの転座の測定

このビデオでは、海洋イソギンチャクであるAnthopleura...

ホスホリパーゼ活性アッセイ:Anthopleura dowii由来の粗毒抽出物中のホスホリパーゼ活性を測定するためのゲル拡散アッセイ

このビデオでは、細胞膜模倣物(蛍光色素とクエンチャーでカプセル化された大きな単層小胞、またはLUV)を使用して、細胞透過性ペプチドと細胞膜との相互作用を研究する蛍光漏出アッセイについて説明します。...

細胞透過性ペプチドとメンブレンとの相互作用を研究するための蛍光リークアッセイ

このビデオでは、マイクロ流体プラットフォームと呼ばれる担持脂質二重膜のホスファチジルエタノールアミン脂質にタグ付けされたpH感受性蛍光色素を使用して、pH調節アッセイを使用して、マイクロ流体パターンでのタンパク質-ホスホイノシチド相互作用を示しています。タンパク質がリン脂質に結合した後のpHの調節は、蛍光消光を引き起こします。...

タンパク質-ホスホイノシチド相互作用を検出するための担持脂質二重膜のpH調節アッセイ

PI（4,5）P 2は、様々な細胞機能を調節するが、細胞の原形質膜でのナノスケール組織はあまり理解されています。標識PI（4,5）プレクストリン相同ドメインに融合された二重色蛍光プローブとP 2によって、我々はナノメートルスケールでの原形質膜中のP 2空間分布（4,5）PIを研究するための新規な方法を記載します。...

新規蛍光プローブと形質膜におけるホスファチジルイノシトール4,5-ビスリン酸の単分子超解像イメージング

私たちは、オプシンで再構成された大きな単層リポソームにおけるリン脂質のスクランブルを測定するための蛍光ベースのアッセイについて説明します。...

リン脂質スクランブラーゼ活性の蛍光ベースのアッセイ

ここでは、pH調節に基づく無標識法を用いてタンパク質 - ホスホイノシチド相互作用を研究するためのマイクロ流体プラットフォームの文脈で、支持された脂質二重層を提示する。...

PIP-on-a-chip：タンパク質 - ホスホイノシチド相互作用のラベルフリー研究

ここでは、蛍光脂質センサーおよびリポソームを用いて、タンパク質抽出物を用いてホスファチジルセリンまたはホスファチジルイノシトール4-リン酸...

ホスファチジルセリン/ホスファチジルイノシトール4-膜間のリン酸交換の蛍光ベースの測定

このプロトコルは、ユニ脂質および多脂質小胞、支持脂質二重層、および懸濁された脂質二重層を模倣する細胞の形成を記述する。これらの in vitro モデルは、様々な脂質タイプを組み込むために適応することができ、様々な分子および高分子相互作用を調査するために使用することができる。...

分子相互作用研究のための細胞模倣支援及び懸濁脂質二重層モデルの組み立て

ここでは、イソギンチャクから粗毒抽出物を取得し、その溶血作用およびホスホリパーゼ活性を検出するためのプロトコールについて記載する。...

簡単なバイオアッセイによる海アネモンからの粗抽出物中の溶血性およびホスホリパーゼ活性の同定

学ぶ リポソーム膜透過性アッセイを用いて、ホスファチジルイノシトールリン酸基が毒PLA₂の膜栄養作用に与える影響を評価する方法です。高感度でコスト効率の良い膜バイオ物理学研究に適しています。

毒_PLA2の膜栄養作用に及ぼすホスファチジルイノシトールリン酸基の影響を調べるためのリポソーム膜透過性アッセイ

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