Name: マウスから一次膵島および一次膵臓細胞を同時に分離するための簡単かつ迅速な方法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T13:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 39 s
Description: 学ぶマウス一次膵島と一次膵臓細胞を同時に分離する簡便な方法。膵管カニュレーション不要で高収率・高生存率の細胞を得られ、糖尿病や急性膵炎の病態研究に有用です。

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<ol><li>Manrai, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+mellitus+as+a+consequence+of+acute+severe+pancreatitis%3A+unraveling+the+mystery%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Diabetes%22%5BJournal%5D)">Diabetes mellitus as a consequence of acute severe pancreatitis: unraveling the mystery.</a> World J Diabetes. 14 (8), 1212-1225 (2023).</li>
<li>García-Compeán, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-acute+pancreatitis+diabetes%3A+a+complication+waiting+for+more+recognition+and+understanding%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Post-acute pancreatitis diabetes: a complication waiting for more recognition and understanding.</a> World J Gastroenterol. 29 (28), 4405-4415 (2023).</li>
<li>Shen, H. N., Yang, C. C., Chang, Y. H., Lu, C. L., Li, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+of+diabetes+mellitus+after+first-attack+acute+pancreatitis%3A+a+national+population-based+study%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Risk of diabetes mellitus after first-attack acute pancreatitis: a national population-based study.</a> Am J Gastroenterol. 110 (12), 1698-1706 (2015).</li>
<li>Hohmeier, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+INS-1-derived+cell+lines+with+robust+ATP-sensitive+K%E2%81%BA+channel-dependent+and+-independent+glucose-stimulated+insulin+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Isolation of INS-1-derived cell lines with robust ATP-sensitive K⁺ channel-dependent and -independent glucose-stimulated insulin secretion.</a> Diabetes. 49 (3), 424-430 (2000).</li>
<li>Hohmeier, H. E., Newgard, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+lines+derived+from+pancreatic+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Cell lines derived from pancreatic islets.</a> Mol Cell Endocrinol. 228 (1-2), 121-128 (2004).</li>
<li>Neuman, J. C., Truchan, N. A., Joseph, J. W., Kimple, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+mouse+pancreatic+islet+isolation+and+intracellular+cAMP+determination%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A method for mouse pancreatic islet isolation and intracellular cAMP determination.</a> J Vis Exp. (88), e50374(2014).</li>
<li>Villarreal, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+high-efficiency+protocol+for+pancreatic+islet+isolation+from+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A simple high-efficiency protocol for pancreatic islet isolation from mice.</a> J Vis Exp. (150), e57048(2019).</li>
<li>Huang, C., Gu, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effective+isolation+of+functional+islets+from+neonatal+mouse+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Effective isolation of functional islets from neonatal mouse pancreas.</a> J Vis Exp. (119), e55160(2017).</li>
<li>Petrov, M. S., Yadav, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+epidemiology+and+holistic+prevention+of+pancreatitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Global epidemiology and holistic prevention of pancreatitis.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 16 (3), 175-184 (2019).</li>
<li>Xiao, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+incidence+and+mortality+of+pancreatic+diseases%3A+a+systematic+review%2C+meta-analysis%2C+and+meta-regression+of+population-based+cohort+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Global incidence and mortality of pancreatic diseases: a systematic review, meta-analysis, and meta-regression of population-based cohort studies.</a> Lancet Gastroenterol Hepatol. 1 (1), 45-55 (2016).</li>
<li>Sendler, M., Weiss, F. U., Golchert, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cathepsin+B-mediated+activation+of+trypsinogen+in+endocytosing+macrophages+increases+severity+of+pancreatitis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Cathepsin B-mediated activation of trypsinogen in endocytosing macrophages increases severity of pancreatitis in mice.</a> Gastroenterology. 154 (3), 704-718.e10 (2018).</li>
<li>Modenbach, J. M., Möller, C., Asgarbeik, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochemical+analyses+of+cystatin-C+dimers+and+cathepsin-B+reveals+a+trypsin-driven+feedback+mechanism+in+acute+pancreatitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Biochemical analyses of cystatin-C dimers and cathepsin-B reveals a trypsin-driven feedback mechanism in acute pancreatitis.</a> Nat Commun. 16 (1), 1702(2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.22 & μ;Mフィルター</td><td>ミレックス</td><td>SLGPR33RB</td><td>調製済みのコラーゲン酵素P溶液をろ過します</td></tr><tr><td>0.25 M 塩化カルシウム(無菌)</td><td>ビヨタイム</td><td>ST365</td><td>インスリン分泌活性化のためのカルシウム依存性シグナル伝達経路</td></tr><tr><td>1mlシリンジ</td><td>ジェルイ</td><td>10084692516405</td><td>コラーゲナーゼPの膵臓組織への灌流に使用されます。</td></tr><tr><td>1.25%トリブロモエタノール溶液</td><td>北京ヨシダ・バイオテクノロジー株式会社</td><td>JT0781</td><td>麻酔</td></tr><tr><td>1.5 mL遠心分離機チューブ</td><td>エッペンドルフ</td><td>30121589</td><td>細胞上清液を遠心分離と保存のために採取します。</td></tr><tr><td>1xハンクバランス塩溶液</td><td>バイオシャープ</td><td>BL561A</td><td>コラーゲナーゼP溶液を準備し、膵臓組織を洗い流します</td></tr><tr><td>12ウェル細胞培養プレート</td><td>サーステット</td><td>83.3921</td><td>膵臓組織と培養から抽出したアシナールを保持してください</td></tr><tr><td>15 mL遠心分離機チューブ</td><td>北京・ラブギック科技有限公司</td><td>CT-002-15A</td><td>実験中の溶液を保持する方法</td></tr><tr><td>24ウェル細胞培養プレート</td><td>サーステット</td><td>83.3922</td><td>採取した小島の養殖</td></tr><tr><td>40-mesh&nbsp;ふるい</td><td>魏丹楽器</td><td>該当なし</td><td>膵臓組織をろ過する</td></tr><tr><td>5 mL パスツールピペット</td><td>バイオシャープ</td><td>BS-XG-03L</td><td>液体のピペット投与や膵臓組織の物理的な破壊</td></tr><tr><td>50 mL遠心分離機チューブ</td><td>北京・ラブギック科技有限公司</td><td>CT-002-50A</td><td>実験中の溶液保持、組織の封存、遠心分離</td></tr><tr><td>60mm細胞培養皿</td><td>北京・ラブギック科技有限公司</td><td>12211</td><td>摘みやすいアイレットを含む培養培地を保持する容器</td></tr><tr><td>75%エタノール溶液</td><td>ハイノート</td><td>該当なし</td><td>ネズミを消毒のために浸けてください。</td></tr><tr><td>Adobe Photoshop 2023</td><td>アドビ社</td><td>該当なし</td><td>画像を生成しましょう。</td></tr><tr><td>ベックマン・アレグラ X-12/X-12R 遠心分離機</td><td>ベックマン</td><td>アレグラX-12/X-12R</td><td>遠心分離機</td></tr><tr><td>牛血清アルブミン(BSA)-V</td><td>ソーラービオ</td><td>A8020</td><td>島の正常な生理機能を維持し、異なる濃度のグルコース溶液を調製するために(これ)を使いましょう。</td></tr><tr><td>C57BL/6Jマウス、SPFグレード、6&ndash;生後8週間、体重18歳と18歳;25 g</td><td>海軍医科大学実験動物センター&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>カルセイン/PI細胞の生存率および細胞毒性アッセイキット</td><td>ビヨタイム</td><td>C2015L</td><td>カルセインAM(カルセインAM)およびプロピジウムヨウ化物(PI)による生存細胞と死死細胞の二重蛍光染色を同時に行い、動物細胞の細胞生存率と細胞毒性を検出します。</td></tr><tr><td>塩化カルシウム(無水)</td><td>サンゴン・バイオテック</td><td>10043-52-4</td><td>コラーゲン酵素P溶液を準備します</td></tr><tr><td>セルストレーナー(100 & mu;m)</td><td>バイオシャープ</td><td>BS-100-XBS</td><td>ろ過する腺皮細胞</td></tr><tr><td>コラーゲンP</td><td>シグマ</td><td>11213857001</td><td>膵臓組織の消化</td></tr><tr><td>D-(+)-グルコース溶液(20%、無菌)</td><td>ビヨタイム</td><td>ST491</td><td>アイレットからのインスリン分泌を刺激します。</td></tr><tr><td>DMEMベーシック(1x)(Dulbecco'S改良型イーグル中介)</td><td>ギブコ</td><td>C11995500BT</td><td>培養アシナー細胞</td></tr><tr><td>胎児用牛血清(FBS)</td><td>バイオウエスト</td><td>S140B-500</td><td>培地を準備してください</td></tr><tr><td>Ficoll-Paque PREMIUM滅菌液</td><td>シチバ</td><td>17544203</td><td>密度勾配層化のための密度勾配媒体</td></tr><tr><td>GraphPad プリズム 8.0.1</td><td>グラフパッド・ソフトウェア有限責任会社</td><td>該当なし</td><td>画像を作成し、統計解析を行うこと。</td></tr><tr><td>HEPES溶液(1 M)</td><td>バイオシャープ</td><td>BL1061A</td><td>コラーゲン酵素P溶液を準備します</td></tr><tr><td>高速/冷蔵遠心分離機</td><td>シグマ</td><td>3K15</td><td>遠心分離機</td></tr><tr><td>イメージJ</td><td>国立衛生研究所光学・計算機器研究所(LOCI)</td><td>該当なし</td><td>細胞蛍光画像を解析し、細胞の生存率を計算します。</td></tr><tr><td>逆形生物顕微鏡</td><td>ライカ</td><td>該当なし</td><td>細胞の形態を観察し、島を選びます。</td></tr><tr><td>逆転蛍光顕微鏡</td><td>オリンポス</td><td>IX73</td><td>細胞の蛍光信号を観察し、蛍光画像を撮影します。</td></tr><tr><td>クレブス・リンガー重炭酸HEPESバッファー</td><td>リージェン</td><td>CZ0103</td><td>島の正常な生理機能を維持し、異なる濃度のグルコース溶液を調製するために(これ)を使いましょう。</td></tr><tr><td>マウスINS(インスリン)ELISAキット</td><td>武漢ファインバイオテック有限公司</td><td>EM0260</td><td>島のインスリン分泌量を検出してください。</td></tr><tr><td>眼用鉗子(10cm、フック付き湾曲)</td><td>清怡医療機器</td><td>該当なし</td><td>解剖の補助</td></tr><tr><td>眼用鉗子(10cm、歯付き直線)</td><td>清怡医療機器</td><td>該当なし</td><td>膵組織の解離と急激な分離、膵組織の摘出を支援する</td></tr><tr><td>ペニシリン・ストレプトマイシン溶液</td><td>ギブコ</td><td>15140-122</td><td>汚染を防ぐために培地を準備してください</td></tr><tr><td>RPMI-1640中型、</td><td>KeyGEN バイオテック</td><td>KGL1501-500</td><td>コラーゲナーゼP消化液を終了し、膵島を培養します</td></tr><tr><td>グリシンマックス(大豆)からのトリプシン阻害剤</td><td>シグマ</td><td>T6522</td><td>コラーゲン酵素P溶液を準備します</td></tr><tr><td>急迫性ハサミ(10cm、直線先端)</td><td>清怡医療機器</td><td>該当なし</td><td>解剖学の補助と膵臓組織の切断</td></tr><tr><td>ウォーターバス</td><td>OAIICLAB</td><td>OW-HF</td><td>消化温度を維持してください。</td></tr><tr><td>&α;-アミラーゼおよびβα;-アミラーゼ活性アッセイキット</td><td>エラブサイエンス</td><td>E-BC-K006-M</td><td>さまざまな条件下でアクシナー細胞が分泌するアミラーゼのレベルを検出します</td></tr></tbody></table>

マウスから一次膵島および一次膵臓細胞を同時に分離するための簡単かつ迅速な方法

A Simple and Rapid Method for Simultaneous Isolation of Primary Islets and Primary Pancreatic Acinar Cells from Mice

In the research on the pathogenesis of post-acute pancreatitis diabetes mellitus (PPDM-A), abnormal bidirectional communication between pancreatic acinar ...

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新生児マウスの膵臓からの機能性膵島の効果的な分離

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マウスからの膵島分離のための簡単な高効率プロトコル

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マウスの膵島細胞ベースの糖尿病誘発環境化学物質のスクリーニング

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酵素による消化および密度-勾配分離を用いたルイスラットからの膵島の分離と精製

学ぶマウス一次膵島と一次膵臓細胞を同時に分離する簡便な方法。膵管カニュレーション不要で高収率・高生存率の細胞を得られ、糖尿病や急性膵炎の病態研究に有用です。

マウスから一次膵島および一次膵臓細胞を同時に分離するための簡単かつ迅速な方法

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