세포 생물학을위한 그라디언트 생성 Microfluidic 장치

제 이름은 장쩌민입니다. 저는 하버드와 MIT Health, Science and Technology의 포스터 펠로우입니다. 제 이름은 아미르 만치(Amir Manchi)이고 MIT 하버드 대학의 보건 과학 및 기술 학부의 학부생 교수입니다.

이 슬라이드는 장치를 만드는 방법의 구성 과정을 보여주므로 실리콘 증기 위에 SUA 50 스핀 코팅을 한 다음 실리콘 증기 위에 마스크를 더 놓고 uuv 노출을 하고 현상합니다. 우리는 마침내 얻을 수 있습니다,이 패드를 실리콘 증기에 올려 놓으십시오. 그 후 PDMS를 캐스팅한 다음 크롤링하고 베이킹하고 약간의 펀치를 낸 다음 산소 플라즈마를 사용하여 PDMS 장치와 스트레이트 글레이스 사이의 본딩을 과도하게 결합할 수 있습니다.

자, 우리는 지금 실험실 내부의 미세 가공실에 있으며 PDMS 레이어를 만드는 것으로 시작할 것입니다. PDMS가 의미하는 바는 실제 과학 용어는 폴리메틸 수복산이며 유기 고분자입니다. 가장 널리 사용되는 실리콘 기반 유기 고분자입니다.

그것은 실제로 두 가지 다른 것의 혼합물입니다 : 실리콘 엘라스토머 베이스와 실리콘 엘라스토머 경화제의 혼합물입니다. 따라서 비율은 염기의 10과 경화제 중 하나입니다. 우리는 약 10g의 염기가 필요하므로 약 1g의 엘라스토머 경화제가 필요하며 이 염기와 서로 착용할 수 있는 경화제를 혼합하려고 노력할 것입니다.

피펫을 사용하겠습니다. 이제 혼합물이 준비되었으므로 실제로 실리콘 웨이퍼 위에 혼합물을 부을 것입니다. 따라서 아이디어는 이러한 실리콘 웨이퍼 위에 몇 가지 패턴이 있다는 것입니다.

그들은 실제로 이 PDMS 폴리머가 패턴을 얻는 데 도움이 되며 우리는 채널과 홈 및 또는 이러한 폴리머에 필요한 다른 패턴을 갖기 위해 이러한 패턴을 사용합니다. 다음 단계는 이 혼합물 내부에 많은 기포가 있기 때문에 폴리머 내부의 기포를 피하기 위해 진공 내부에 넣는 것입니다. PDMS 젤을 진공 챔버 내부의 실리콘 웨이퍼에 놓을 것입니다.

저는 챔버를 닫고 진공을 열 것입니다. 거품이 사라진 후, 아마도 몇 분 정도 후에 섭씨 약 70도의 오븐에 밤새 넣고 굳게 만들 것입니다. 제가 주목하셨으면 하는 패턴은 이 세 가지 다른 예비 전쟁을 통해 그라디언트를 만들어 한쪽은 0의 농도를 유지하고 이쪽은 특정 양의 농도를 가지며 그쪽으로 균일하게 이동하고 다른 쪽 끝은 작은 펀치를 날리는 것입니다. 이 경우 우리의 콘센트가 될 것입니다.

다음 단계는 이러한 패턴 중 하나를 잘라 패턴 표면이 위를 향하도록 하여 애국자 접시로 옮기는 것입니다. 그래서 이 패턴에 대해 제가 설명한 3개의 입구와 1개의 출구를 볼 수 있기를 바랍니다. 우리는 폴리에틸렌 튜브를 사용할 수 있도록 입구에 작은 펀치를 사용할 것이고 예비 전쟁을 하기 위해 콘센트에 큰 펀치를 사용할 것입니다.

첫 번째 입구부터 시작하겠습니다. 나는 두 번째 펀치와 같은 펀치를 만들고 세 번째 펀치를 위해 또 다른 작은 펀치를 만들 것입니다. 마지막 마지막 단계는 콘센트에서 큰 펀치를 날리는 것입니다.

그래서 일단 우리가 끝나면 맨 위 레이어인 A-P-D-M-S 레이어가 있고 맨 아래에 다른 유리 레이어를 사용할 것입니다. 그리고 이 마이크로 슬라이드는 마이크로 엽 장치에서 저의 맨 아래 층이 될 것입니다. 이제 우리는 미세 가공실에 있고 저는 하나의 유리와 하나의 PDMS 층을 가지고 있으며 그것들을 서로 부착하고 싶습니다.

지금 사용할 것은 플라즈마 클리너라는 기계입니다. 챔버 내부에서 무슨 일이 일어날지 모르니까요, 플라즈마는 약한 표면 균형을 무너뜨리고 반응성이 높은 화학 그룹으로 대체하는 데 도움이 되며, 표면은 실제로 친수성으로 판명될 것입니다. 지금 당장 일어날 일은 최상층이고 내부에 채널이 있는 PDMS 몰드를 가져와서 몰드에 먼지가 붙는 것을 방지하기 위해 이전에 붙인 테이프를 제거하는 것입니다.

방 안에 넣겠습니다. 다음으로 할 일은 현미경 슬라이드인 유리 층을 가지고 있고 이것이 장치 내부의 맨 아래 층이 될 것입니다. 그래서 이것도 챔버 안에 놓을 것입니다.

그리고 챔버가 닫히면 챔버를 완전히 닫고 먼저 전원을 공급한 다음 펌프를 밟은 다음 지금부터 약 5분 후에 이 기계로 돌아와야 합니다. 내가 할 일은 기계를 끄고 싶다는 것입니다. 그래서 먼저 펌프를 끄고 다음으로 전원을 끄고 챔버를 열 것입니다.

이 소리는 실제로 챔버 내부의 과정에서 가해진 음압 때문입니다. 그래서 다른 레이어를 제거하고 함께 부착하고 싶습니다. 유리가 맨 아래 레이어이기 때문에 왼손으로 유리를 잡고 고정하고 PDMS 레이어를 가져와서 유리 레이어 위에 놓겠습니다.

하지만 실제로 패턴이 지금 직면하고 있기 때문에 PDMS 계층을 반전시킬 것입니다. 두 가지를 함께 누른 후 유리잔 위에 올려 놓겠습니다. 그들은 매우 쉽게 부착되며 이 플라즈마 처리 공정의 장점 중 일부는 접착 강도와 영속성입니다.

마지막에는 그런 모습입니다. 다시 말씀드리지만, 이것들은 우리의 입구이고 이것은 제 배출구에 있으며 우리는 다음 단계로 넘어갈 준비가 되었습니다. 섬유 요리는 장치 내부에서 한 시간 동안 인큐베이터에서 한 다음 1 시간 후에 인큐베이터에서 SIM 샘플을 꺼내고 물고기 배양 식품을 넣은 다음 용액을 만듭니다.

EGF 솔루션을 만들기 위해 EGF당 15나노그램을 입력하고 10마이크로몰 50D를 실행하여 채널 전체에서 EGF 구배를 시각화하기 위해 두 개의 밀 배양 배지를 Azure로 배치하기만 하면 됩니다. 그런 다음 두 개의 밀 미디어, 가상 미디어를 가져 와서 여기에 또 다른 두 개의 밀 미디어를 넣습니다. 이 두 앉아있는 것은 장치에서 정상적인 배양, 정상, 정상적인 배양 주입 만 가능합니다.

그래서 버블을 제거하고 다시 연결하면 이것도 M 모바일 버블이 다시 내려오는 것입니다. 그런 다음 15 나노그램 er EGF와 10 마이크로몰 fi dextra, 그리고 테이크아웃에서 나온 2 mil 매체를 사용하여 샘플을 주사기에 넣으면 거품이 생깁니다. 그런 다음 솔루션 스위치, 다시 전환하십시오.

용액은 가스 유형 주사기에 들어와서 SH를 몇 시간 동안 밀어 거품을 제거하고, 모든 스위치 주사기 용액이 먼저 여기에 도착한 다음 바를 통해 바와 솔루션을 3 방향 바를 통해 전환하고 튜빙과 솔루션이 튜브에서 나오지 않습니다. 그런 다음 혼합물 후에 용액이 나오면 튜브를 My Predict 장치에 삽입하기만 하면 세 가지 솔루션이 모두 동일합니다. 당신은 다만 온화하게 연결하고, 주입 수로의 그물에 연결할 수 있습니다.

마지막으로 두 번째는 정상적인 문화 미디어입니다. 하나는 EGF를 이용한 배양 배지와 EGF의 기울기 프로파일을 확인하는 것입니다. 이것은 그물 안의 셀, 그물 안의 세포입니다.

이것은 셀 배출구이므로 3 개의 허브 채널을 사용하여 그라디언트를 생성 한 다음 셀 영역 내부에 grad를 생성합니다. 그래서 일반적으로 나가 원하는 무슨은 다만 우리가 다만 세포 착석, 출구에 착석하는 세포 중단을 하고, 그 후에 우리는 다만 온화하게 그물에 있는 흡입 할 수 있고 그 후에 세포는 세포 지역을 통해서 교류이고 자동적으로 앉고 그 후에 당신을 확인하는 코팅을 아래로 침전하고 그 후에 당신을 확인하는 세포는 완전하게 퍼지는 세포입니다. 그리고 만든 후, 세포가 완전히 퍼지는 것을 확인한 후, 우리는 그냥, 주입을 시작한 다음 무선 생성 장치를 사용하여 세포 이동을 연구할 수 있습니다.