쥐 해마 절편에서 CA3-CA1 시냅스 반응 기록

쥐 해마 절편을 전기생리학 설정에 배치합니다.

CA3 뉴런으로부터 축삭 투영을 받는 해마 CA1 영역의 방사층층에 자극 전극을 배치합니다.

CA1 정점 수상돌기 근처에 기록 전극을 놓습니다.

피라미드 층에 다른 기록 전극을 배치합니다.

자극을 받으면 CA3 축삭 돌출부가 탈분극되고 활동 전위를 생성하여 흥분성 신경 전달 물질을 방출합니다.

이러한 신경 전달 물질은 시냅스 후 CA1 정점 수상돌기에 결합하여 흥분성 시냅스 후 전위 또는 EPSP라고 하는 양이온 유입 및 막 탈분극을 유도합니다.

기록 전극 측정은 정점 수상돌기(필드 EPSP 또는 fEPSP)에서 EPSP를 합산했습니다. 안정적인 fEPSP 신호가 얻어지면 전극을 내리고 잠시 일시 중지합니다.

자극 강도를 적용하여 fEPSP 기울기와의 입출력 관계를 결정한 다음 기울기에 따라 특정 강도를 선택하고 적용합니다.

두 번째 기록 전극은 CA1 신경 세포체의 결합 활동 전위를 측정하여 인구 급증을 생성합니다.

시냅스 태깅 및 캡처 실험에서 현미경으로 CA1 영역의 방사층에 두 개의 자극 전극을 배치하여 Schaffer 측부 섬유를 자극하고 자극 전극 사이의 중간에 CA1의 정점 수지상 영역에 하나의 기록 전극을 배치하여 fEPSP 반응을 기록합니다.

인구 급증을 기록하기 위해 피라미다엘층에 또 다른 기록 전극을 배치합니다. 모든 전극이 슬라이스에 닿으면 테스트 자극을 전달하여 두 입력 모두에서 적절한 필드 EPSP 신호를 얻을 수 있는지 확인합니다.

적절한 fEPSP 신호가 얻어지면 조심스럽게 매니퓰레이터의 미세 이동 손잡이를 사용하여 전극을 약 200미크론 더 낮춘 다음 슬라이스가 회복될 때까지 20분 동안 기다립니다. 그런 다음 20마이크로암페어에서 100마이크로암페어까지의 전류 강도 범위에서 필드 EPSP의 기울기를 측정하여 입력/출력 관계를 결정합니다.

그런 다음 각 입력에 대해 최대 필드 EPSP 기울기의 40%를 유발하는 자극 강도를 실험 전체에서 일정한 자극으로 설정합니다. 15-20분 후에 기준선 기록을 시작합니다.

LTP/LTD 유도 전 최소 30-60분의 안정적인 기준선을 기록합니다.