0 조회수 • 2:08 분 • April 28th, 2025
색소와 지질의 존재로 인해 불투명한 뇌 조직 샘플로 시작합니다. 이러한 구성 요소는 형광 표지된 뉴런에서 빛 산란을 일으킵니다.
메탄올 농도가 증가하는 용액에서 조직을 순차적으로 배양하여 조직에서 수분을 제거하고 조직을 점차적으로 탈수합니다.
그런 다음 이 조직을 농축 메탄올로 처리하여 잔류 물을 제거하여 완전한 탈수를 보장합니다.
다음으로, 조직을 디클로로메탄과 메탄올이 포함된 초기 투명 용매로 옮깁니다.
용매가 조직 깊숙이 침투할 수 있도록 부드럽게 흔들면서 배양합니다.
디클로로메탄은 조직에서 색소와 지질을 제거하여 빛 산란을 줄이고 투명도를 향상시킵니다.
마지막으로 조직을 소수성 용매인 디벤질 에테르로 옮기고 흔들지 않고 배양합니다.
용매는 조직 투명성을 더욱 향상시키는 최종 투명제 역할을 합니다.
이 과정은 빛 투과를 향상시켜 표지된 뉴런과 뇌 조직의 연결을 보다 명확하게 시각화할 수 있게 해줍니다 견본.
샘플을 실온에서 각각 1시간 동안 20%, 40%, 60%, 80% 및 100% 메탄올에서 연속적으로 배양합니다. 그런 다음 신선한 100% 메탄올에서 밤새 배양합니다. 다음날, 33% 메탄올에 혼합된 66% DCM에서 시료를 실온에서 3시간 동안 흔들면서 배양합니다. 3시간 후, 샘플이 투명해질 때까지 흔들지 않고 디벤질 에테르에서 배양합니다. 그런 다음 이미징이 될 때까지 디벤질 에테르에 보관합니다.