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DOI: 10.3791/3823-v
Mariko Kobayashi1, Ju-Youn Kim1, Vladimir Camarena2, Pamela C. Roehm3, Moses V. Chao2,4,5,6,7, Angus C. Wilson1, Ian Mohr1
1Department of Microbiology,New York University School of Medicine, 2Molecular Neurobiology Program, Skirball Institute for Biomolecular Medicine,New York University School of Medicine, 3Department of Otolaryngology,New York University School of Medicine, 4Department of Cell Biology,New York University School of Medicine, 5Department of Physiology and Neuroscience,New York University School of Medicine, 6Department of Psychiatry,New York University School of Medicine, 7Center for Neural Science,New York University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
프로토콜은 헤르페스 바이러스 1 형 (HSV-1) 대기 시간과 재활 성화를 단순 공부하는 효율적이고 재현성 모델 시스템을 설명합니다. 분석은 동질적인 교감 신경 세포 배양을 고용하고 RNA 간섭 및 재조합 단백질의 표현을 포함한 다양한 도구를 사용하여 바이러스 신경 세포 상호 작용의 분자 해부을 허용합니다.
이 실험의 목적은 1차 뉴런 세포 배양 시스템을 활용하여 단순 포진 바이러스 잠복기 및 재활성화를 연구하는 방법을 보여주는 것입니다. 이는 먼저 RA 배아에서 상경추 신경절 뉴런을 분리하고 비신경 세포를 제거한 후 해리된 신경절에서 분리된 뉴런을 배양함으로써 달성됩니다. 잠복 HSV 감염은 EGFP 바이러스를 사용하여 용해성 복제 억제제가 있는 뉴런을 감염시킵니다.
다음 단계는 잠복 감염 배양액의 재활성화를 유도하는 것입니다. 마지막으로, 재활성화의 효율성은 시간 경과에 따른 EGFP 발현을 모니터링하여 평가합니다. 궁극적으로, 다양한 신경 신호 경로가 화학 억제제, RNA 간섭 및 유전자 전달의 사용을 통해 단순 헤르페스 바이러스 잠복 및 재활성화를 조절하는 방법을 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.
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