청소년 쥐에 대한 가벼운 외상성 뇌 손상의 소설 모델

이 절차의 전반적인 목표는 어린 쥐에서 가벼운 외상성 뇌 손상을 생성하는 것입니다. 이것은 먼저 부상 유도 플랫폼을 준비함으로써 달성됩니다. 다음으로, 마취된 쥐를 점수가 매겨진 은박지에 엎드려 놓습니다.

일단 제자리에 놓이면 무게를 떨어뜨려 머리에 일격을 가합니다. 그런 다음 동물을 누운 자세로 놓고 스스로 쓰는 데 걸리는 시간을 기록합니다. 다음 날 성능은 보행 빔 테스트에서 측정됩니다.

따라서 이 기술의 주요 장점은 다른 기술에 비해 동물이 잠깐만 마취된다는 것입니다. 이는 폐쇄성 두부 손상으로, 동일한 동물에서 부상을 여러 번 반복할 수 있으며, 임상적으로 더 관련성이 있는 부상에 대한 회전 구성 요소가 있습니다. 이 기술의 의미는 소아 뇌진탕 및 경미한 외상성 뇌 손상 치료로 확장되는데, 그 이유는 이 모델이 이질적인 방식으로 임상적으로 관련된 증상을 유도하기 때문이며, 그 절차는 우리 실험실의 기술자인 Irene Ma와 Harlene Haha가 될 것임을 보여줍니다.

우리 연구실의 학부생에서. 가벼운 외상성 뇌 손상 장치를 설치하려면 투명 플라스틱으로 만든 U자형 스테이지를 구성합니다. 스테이지 바닥에 스펀지를 놓아 동물이 떨어진 후 동물을 모으세요.

다음으로, 날카로운 면도날로 은박지 조각을 긁습니다. 점수가 매겨진 은박지가 쥐의 체중을 지탱하는지 확인하지만 충격 후 가속을 방해하지 않습니다. 득점된 은박지를 무대 위에 테이프로 붙여서 타우가 되도록 하고 가이드 튜브 아래의 올바른 위치에 놓습니다.

가이드 튜브를 은박지에서 3.5cm 위에 놓으십시오. 다음으로, 무게 상단에 낚싯줄을 부착합니다. 가이드 튜브 내부에 추를 넣고 추가 호일 위로 2.5cm 위에 매달리도록 선을 고정합니다.

이 높이는 쥐가 여러 번 맞는 것을 안전하게 방지합니다. cl에 낚싯줄을 부착하십시오.amp 스탠드. 낚싯줄이 있는 플라스틱 가이드 튜브를 통해 추를 위로 당기고 0.5미터 높이에 위치한 육각 키 핀으로 제자리에 고정합니다.

시작하려면 마취된 쥐의 진정 깊이를 확인하고 머리가 떨어지는 무게의 경로에 직접 머리를 대고 쥐 상자를 호일 위에 빠르게 놓습니다. 시작할 준비가 되면 육각 렌치 핀을 당겨 무게가 플라스틱 가이드 튜브를 통해 수직으로 떨어지도록 합니다. 일단 부딪히면 쥐는 빠르게 180도 회전을 거쳐 누운 자세로 착지합니다.

즉시 채취 스펀지에서 쥐를 꺼내고 면봉 어플리케이터로 쥐의 머리에 국소 리도카인을 바릅니다. 다음으로, 쥐를 깨끗하고 가열 된 케이지에 누운 자세로 놓습니다. 동물이 마취제에서 깨어나 누운 자세에서 엎드린 자세로 뒤집힐 때까지 관찰합니다.

이를 가짜 부상 통제 그룹에 대한 값을 쓰는 시간으로 기록합니다. 동물을 마취시키고 앞에서 설명한 것처럼 무대에 놓습니다. 다음으로, Allen 키 핀을 당기지 않고 은박지에서 쥐를 제거하고 머리에 국소 리도카인을 바릅니다.

쥐를 깨끗하고 가열 된 케이지에 누운 자세로 놓고 값을 쓰는 시간을 기록하십시오. 마지막으로, 정상적인 행동을 회복한 쥐를 집 우리로 되돌리고 다음 대조 동물과 함께 반복합니다. 뇌 손상 유도 후 24시간이 지나면 동물을 시술실로 돌려보냅니다.

쥐를 깨끗한 우리로 옮기고 쥐의 집 우리를 놓습니다. 테이퍼진 빔 면의 좁은 끝에서, 케이지의 열린 끝 부분이 빔의 넓은 끝을 향합니다. 테이퍼 빔에는 안전을 제공하는 작은 선반이 있는 중앙 플랫폼이 있습니다.

빔의 넓은 끝에 비디오 카메라를 놓고 전체 길이가 보일 때까지 초점을 조정합니다. 준비가 되면 쥐를 가늘어진 빔의 넓은 끝에 놓고 빔을 가로질러 집 케이지를 향해 걸어가도록 격려합니다. 쥐가 들보를 건너 집 우리에 들어가면 최소 60초 동안 쉬게 하십시오.

대상 위치를 보강하기 위해 이 방법은 시행 번호 1이며 분석에 포함되지 않습니다. 다음으로, 비디오 카메라를 켜고 쥐가 추가 시간 동안 빔 워킹 작업을 완료하도록 하여 가정용 케이지에서 62번째 강화 기간을 유지합니다. 쥐가 모든 실험을 마치면 집에 있는 우리로 돌려보내고 다음 동물을 실험합니다.

실험 중 동물이 빔에서 떨어지면 즉시 동물을 집어 올려 동물이 떨어진 위치의 빔 위에 다시 놓으십시오. 데이터의 점수를 매깁니다. 테스트 후 뒷다리 발 미끄러짐 횟수와 각 개별 시도에 대해 빔을 건너는 총 시간을 기록합니다.

이 데이터를 사용하여 각 동물 및 실험 그룹의 평균값을 계산합니다. 이 그래프는 단일 뇌 손상을 경험한 어린 쥐 간의 쓰기 점수의 평균 차이를 가짜 대조군과 비교합니다. 부상당한 쥐는 누운 자세에서 스스로 글을 쓰는 데 필요한 시간이 크게 증가한 것으로 나타났습니다.

여기서, 빔 보행 과제에서 뒷다리 발이 미끄러지는 평균 횟수는 한 번의 부상을 입은 어린 쥐에 대해 표시됩니다. 가짜 부상 쥐와 비교했을 때, 부상당한 동물은 이 절차를 따른 대조군에 비해 빔을 가로질러 훨씬 더 많은 발 미끄러짐을 보였습니다. 그런 다음 놀이 치료와 같은 다른 비침습적 개입을 탐색하여 이러한 개입이 실제로 아이들이 경험하는 사회적 결핍의 일부를 개선할 수 있는지 여부를 결정할 수 있습니다. 뇌 진 탕.

이 비디오를 시청한 후에는 어린 설치류에서 가벼운 외상성 뇌 손상을 안전하게 유도하고 감지하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 이는 여러 시점에서 반복될 수 있습니다.