Borreliella (Borrelia) burgdorferi의 필수 성분 In Vitro Transcription Assays

Borreliella burgdorferi의 시험관 내 전사 분석 시스템은 연구자가 RNA 중합효소의 효소 활성을 제어하는 유전자 조절 메커니즘 및 인자를 연구할 수 있는 생화학적 도구를 제공합니다. 이 시스템을 통해 전사 인자, 보조 인자, 염 농도 및 pH가 Borreliella burgdorferi RNA 중합효소 기능에 어떤 영향을 미치는지 테스트할 수 있으며, 이는 유전자 조절 메커니즘에 대한 전반적인 이해에 기여합니다. 이 강력한 기술을 통해 RNA 중합효소를 선택적으로 억제하는 약물을 스크리닝할 수 있어 라임 보렐리아증을 치료하기 위한 새로운 약물 개발의 문을 열 수 있습니다.

시작하기 위해, 미세 호기성 환경에서 BSKII 배지에서 배양 된 Borreliella burgdorferi RpoC-His10X의 2-4 리터에서 밀리 리터당 10 일정의 밀도로 2-4 리터의 세포 펠릿을 수집합니다. 500 밀리리터 원심 병에서 섭씨 4도에서 30 분 동안 10, 000 배 G에서 세포를 펠렛으로 만들고 상청액을 버린다. 이어서, 세포를 30 밀리리터의 빙냉 HN 완충액에 재현탁시키고, 원심분리 단계를 반복하고, 상청액을 경사 조절한다.