Name: 미세 입자상 물질에 노출된 제브라피시 배아에서 다환 방향족 탄화수소를 검출하기 위한 변형된 QuEChERS-HPLC 방법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T12:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 39 s
Description: 배우세요 미세 입자상 물질에 노출된 제브라피시 배아에서 다환 방향족 탄화수소를 검출하기 위한 변형된 QuEChERS-HPLC 방법을. 이 기법은 환경 독성학 연구에서 내부 PAH 수준 측정의 민감도를 향상시킵니다.

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<ol><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+maternal+exposure+to+ambient+particulate+pollution+with+incident+spontaneous+pregnancy+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicol+Environ+Saf%22%5BJournal%5D)">Association of maternal exposure to ambient particulate pollution with incident spontaneous pregnancy loss.</a> Ecotoxicol Environ Saf. 224, 112653(2021).</li>
<li>Grippo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Air+pollution+exposure+during+pregnancy+and+spontaneous+abortion+and+stillbirth%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Environ+Health%22%5BJournal%5D)">Air pollution exposure during pregnancy and spontaneous abortion and stillbirth.</a> Rev Environ Health. 33 (3), 247-264 (2018).</li>
<li>Tanner, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associations+between+exposure+to+ambient+benzene+and+pm2.+5+during+pregnancy+and+the+risk+of+selected+birth+defects+in+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Res%22%5BJournal%5D)">Associations between exposure to ambient benzene and pm2. 5 during pregnancy and the risk of selected birth defects in offspring.</a> Environ Res. 142, 345-353 (2015).</li>
<li>Feng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+air+pollution+exposure+and+congenital+anomalies%3A+An+updated+systematic+review+and+meta-analysis+of+epidemiological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Environ+Health+Res%22%5BJournal%5D)">Global air pollution exposure and congenital anomalies: An updated systematic review and meta-analysis of epidemiological studies.</a> Int J Environ Health Res. 34 (5), 2333-2352 (2024).</li>
<li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sources%2C+transformation%2C+and+health+implications+of+pahs+and+their+nitrated%2C+hydroxylated%2C+and+oxygenated+derivatives+in+PM2.5+in+Beijing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Geophys+Res-Atmos%22%5BJournal%5D)">Sources, transformation, and health implications of pahs and their nitrated, hydroxylated, and oxygenated derivatives in PM2.5 in Beijing.</a> J Geophys Res-Atmos. 120 (14), 7219-7228 (2015).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+priority+sources+of+PM2.5-bound+polycyclic+aromatic+hydrocarbons+by+their+contribution+to+disability+adjusted+life+years%5BTitle%5D)+AND+%22Atmos+Environ%22%5BJournal%5D)">Determining priority sources of PM2.5-bound polycyclic aromatic hydrocarbons by their contribution to disability adjusted life years.</a> Atmos Environ. 248, 118202(2021).</li>
<li>Carls, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fish+embryos+are+damaged+by+dissolved+pahs%2C+not+oil+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Aquat+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Fish embryos are damaged by dissolved pahs, not oil particles.</a> Aquat Toxicol. 88 (2), 121-127 (2008).</li>
<li>He, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+toxicity+of+the+organic+fraction+from+hydraulic+fracturing+flowback+and+produced+waters+to+early+life+stages+of+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Developmental toxicity of the organic fraction from hydraulic fracturing flowback and produced waters to early life stages of zebrafish (Danio rerio).</a> Environ Sci Technol. 52 (6), 3820-3830 (2018).</li>
<li>Ren, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AHR-mediated+ROS+production+contributes+to+the+cardiac+developmental+toxicity+of+PM2.5+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">AHR-mediated ROS production contributes to the cardiac developmental toxicity of PM2.5 in zebrafish embryos.</a> Sci Total Environ. 719, 135097(2020).</li>
<li>Manjunatha, B., Deekshitha, B., Seo, E., Kim, J., Lee, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+toxicity+induced+by+particulate+matter+%28PM2.5%29+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22Aquat+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Developmental toxicity induced by particulate matter (PM2.5) in zebrafish (Danio rerio) model.</a> Aquat Toxicol. 238, 105928(2021).</li>
<li>Chen, J., Zhang, M., Aniagu, S., Jiang, Y., Chen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PM2.5+induces+cardiac+defects+via+AHR-SIRT1-PGC-1%CE%B1+mediated+mitochondrial+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Toxicol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">PM2.5 induces cardiac defects via AHR-SIRT1-PGC-1α mediated mitochondrial damage.</a> Environ Toxicol Pharmacol. 106, 104393(2024).</li>
<li>Zhang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crosstalk+between+AHR+and+Wnt%2F%CE%B2-catenin+signal+pathways+in+the+cardiac+developmental+toxicity+of+PM2.5+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology%22%5BJournal%5D)">Crosstalk between AHR and Wnt/β-catenin signal pathways in the cardiac developmental toxicity of PM2.5 in zebrafish embryos.</a> Toxicology. 355, 31-38 (2016).</li>
<li>González-Curbelo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+and+applications+of+the+QuECHERS+method%5BTitle%5D)+AND+%22TrAC+Trends+Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Evolution and applications of the QuECHERS method.</a> TrAC Trends Anal Chem. 71, 169-185 (2015).</li>
<li>Wilkowska, A., Biziuk, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+pesticide+residues+in+food+matrices+using+the+qQuECHERS+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Determination of pesticide residues in food matrices using the qQuECHERS methodology.</a> Food Chem. 125 (3), 803-812 (2011).</li>
<li>Zhao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+toxicity+and+bioconcentration+of+pyrimorph+in+zebrafish%2C+Brachydanio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">Acute toxicity and bioconcentration of pyrimorph in zebrafish, Brachydanio rerio.</a> Pest Manag Sci. 67 (9), 1178-1183 (2011).</li>
<li>Aleström, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish%3A+Housing+and+husbandry+recommendations%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Zebrafish: Housing and husbandry recommendations.</a> Lab Anim. 54 (3), 213-224 (2019).</li>
<li>Matthews, M., Varga, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+and+euthanasia+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Anesthesia and euthanasia in zebrafish.</a> ILAR J. 53 (2), 192-204 (2012).</li>
<li>Ji, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AHR-mediated+m6A+RNA+methylation+contributes+to+PM2.5-induced+cardiac+malformations+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hazard+Mater%22%5BJournal%5D)">AHR-mediated m6A RNA methylation contributes to PM2.5-induced cardiac malformations in zebrafish larvae.</a> J Hazard Mater. 457, 131749(2023).</li>
<li>Alegbeleye, O. O., Opeolu, B. O., Jackson, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polycyclic+aromatic+hydrocarbons%3A+A+critical+review+of+environmental+occurrence+and+bioremediation%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Manage%22%5BJournal%5D)">Polycyclic aromatic hydrocarbons: A critical review of environmental occurrence and bioremediation.</a> Environ Manage. 60 (4), 758-783 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16 PAH 혼합 표준 용액&nbsp;</td><td>o2si Smart Solutions (South Carolina, USA)</td><td>110124-06</td><td>16 PAH 혼합 표준 용액&nbsp; 나프탈렌(Nap), 아세나프틸렌(Acy), 아에이스-나프텐(Ace), 플루오렌(Flo), 페난트렌(Phe), 안트라센(Ant), 플루오란텐(Flu), 피렌(Pyr), 벤조[a] 안트라센(BaA), 크리센(Chr), 벤조[b]플루오란텐(BbF), 벤조[k] 플루오란텐(BkF), 벤조[a] 피렌(BaP), 인데노[1,2,3-cd] 피렌(IcdP), 디벤츠[a, h]안트라센(DahA), 벤조[g,h,i]페릴렌(BghiP).</td></tr><tr><td>1260 Infinity II LC 시스템</td><td>애질런트 테크놀로지스(미국</td><td></td> 산타클라라)<td>FLD(G1321A); DAD SL (G1315C)</td></tr> <tr><td>아세토니트릴</td><td>Scharlab (바르셀로나, 스페인)</td><td>AC03661000</td><td>용매</td></tr><tr><td>CNWBOND HC-C18 SPE &nbsp;</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.(Shanghai, CHINA)</td><td>SBEQ-CA0801</td><td>C18 패킹은 친수성과 소수성 사이의 균형이 좋은 역상 패킹으로 극성 및 비극성 유기 화합물을 잘 흡착하고 분리할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>규조토</td><td>Agilent Technologies, Inc(미국 산타클라라)</td><td>12214013</td><td>유기 불순물의 분리, 정제 및 제거용&zwnj;</td></tr><tr><td>분산형 SPE 15 mL, EN</td><td>Agilent Technologies, Inc (Santa Clara, USA)</td><td>5982-5056</td><td>샘플 정제</td></tr><tr><td>필터</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc. (Shanghai, CHINA)</td> <td>SCAA-104</td><td>유기상 니들 필터 (나일론), 0.22&micro; m</td></tr><tr><td>Hexane</td><td>Scharlab(스페인 바르셀로나)</td><td>HE02481000</td><td>용매</td></tr><tr><td>Millipore</td><td>Merck(미국 뉴저지)</td><td></td><td>초순수 제조</td></tr><tr><td>유기 - N-EVAP 질소 증발기</td><td>유기 (미국 매사추세츠)</td><td></td><td>용매 증발</td></tr><tr><td>Sorvall ST4 Plus</td><td>Thermo Fisher Scientific(미국 월섬)</td><td></td>원<td>심분리</td></tr><tr><td>&nbsp; Vortex- Genie 2 (G560E)</td><td>Scientific Industries (New York, USA)</td><td></td><td>Vortex</td></tr><tr><td>ZORBAX Eclipse PAH</td><td>Agilent Technologies, Inc (Santa Clara, USA)</td><td>959990-918</td><td>이 컬럼은 일반적으로 HPLC 시스템에서 PAH를 정확하고 신뢰할 수 있게 분석하는 데 사용됩니다.</td></tr></tbody></table>

미세 입자상 물질에 노출된 제브라피시 배아에서 다환 방향족 탄화수소를 검출하기 위한 변형된 quechers-hplc 방법

A Modified QuEChERS-HPLC Method for Detection of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Zebrafish Embryos Exposed to Fine Particulate Matter

EOM 노출, 시료 전처리 및 PAH 검출에 대한 전체 절차는 그림 1에 설명되어 있습니다. HPLC-FLU/DAD의 경우 0.3 - 5.0ng/mL의 검출 범위에서 3:1의 신호 대 잡음비가 허용 가능한 것으로 간주되었습니다. 검출 방법의 한계는 3.0 × 10-4 에서 5.0 × 10-3 ng/organism 사이였습니다. 모든 검량선은 높은 선형성(r2 &gt; 0.999)을 나타냈습니다. 매트릭스 샘플에서 얻은 추출물을 사용하여 측정된 정밀도 값은 5% 미만이었습니다. 급증한 회복률은 82.0%에서 96.3% 사이였습니다(표 1).
표 2 및 보충 그림 S2에서 볼 수 있듯이, 6개의 PAH, 즉 페난트렌(Phenanthrene, Phe), 안트라센(Anthracene, ...

미세 입자상 물질에 노출된 제브라피시 배아에서 다환 방향족 탄화수소를 검출하기 위한 변형된 QuEChERS-HPLC 방법

Maternal exposure to fine particulate matter (PM2.5), with an aerodynamic diameter of 2.5 &#181;m or less, has been linked to spontaneous abortion and ...

a-modified-quechers-hplc-method-for-detection-polycyclic-aromatic

Research

연구

JoVE Journal

Developmental Biology

발생생물학

이 동영상은 헤드스페이스 가스 크로마토그래피를 사용하여 제브라피시 배아의 에탄올 농도를 측정하는 방법을 보여줍니다. 이 방법은 휘발성 유기 화합물의 정성 및 정량 분석에 유용한 도구를 제공합니다.

헤드스페이스 가스 크로마토그래피: 제브라피시 배아의 에탄올 농도를 평가하는 기법

이 동영상은 DNA 손상과 이중 가닥 DNA 절단을 각각 나타내는 8-OHdG 및 γH2AX의 수치를 측정하여 제브라피시 배아의 심장에서 PM2.5로 인한 산화 손상을 감지하는 고감도 면역형광 기반 분석을 보여줍니다.

어류 배아에서 PM2.5 매개 DNA 손상을 검출하기 위한 면역형광 분석

제브라 피쉬 배아 조직 특정 형광의 반 자동화 이미징을위한 프로토콜은 여기에 설명한다.

Zebrafish의 태아의 조직 특이 형광의 반 자동화 이미징

기형에 노출되면 기형아 출산의 원인이 될 수 있습니다. 제브라 피쉬는 화학 물질의 기형 가능성을 결정하는 데 유용합니다. 우리는 노출의 서로 다른 시간에 또한 아질산염의 다양한 수준에 배아를 노출에 의해 제브라 피쉬의 유틸리티를 보여줍니다. 우리는 아질산염은 독성이 심한 발달 결함을 야기 할 수 있음을 보여준다.

모델로 제브라 피쉬는 아질산염의 기형 가능성을 평가하는

Zebrafish 배아는 화학 화합물의 독성을 평가하는 데 사용됩니다. 그들은 외부에서 개발하고 미묘한 자형기능 변화의 검출을 허용, 화학 물질에 민감하다. 실험은 배아를 함유하는 플레이트에 직접 첨가되는 소량의 화합물만을 필요로 하므로 테스트 시스템이 효율적이고 비용 효율적입니다.

Zebrafish 배아를 이용한 화학 화합물의 독성에 대한 신속한 평가

이 논문에서는 제브라피쉬 유충 모델을 이용한 환경 오염물질의 신경행동 독성 평가를 위한 상세한 실험 프로토콜이 제시되며, 여기에는 노출 과정과 신경행동 지표에 대한 테스트가 포함된다.

제브라피시 유충에 대한 환경 오염물질의 신경행동 효과 연구

이 프로토콜은 면역 형광 분석기를 사용하여 제브라피시 배아의 해부 된 심장에서 PM2.5-유도 된 DNA 손상을 감지합니다.

면역 형광을 사용하여 제브라피시 배아 심장에서 PM2.5-유도 된 DNA 손상을 감지합니다.

제브라피쉬 배아/애벌레는 외부적으로 발달하며 광학적으로 투명합니다. 초기 생활 단계에서 물고기에 있는 미세 플라스틱의 bio축적은 형광으로 표지된 microbeads로 쉽게 평가됩니다.

제브라피쉬의 초기 수명 단계에서 형광 미세 플라스틱의 축적 및 분포

제브라피쉬에서 금속 및 금속 기반 화합물의 약리학 및 독성 분석의 증가된 속도는 환경 및 임상 번역 연구에 유리할 수 있다. 알려지지 않은 수인성 노출 흡수의 한계는 유도 결합 플라즈마 질량 분광법을 사용하여 소화 된 제브라 피쉬 조직에 대한 미량 금속 분석을 수행함으로써 극복되었습니다.

제브라피쉬에서 백금 및 루테늄 기반 화합물 노출의 선량 흡수는 유도적으로 결합된 플라즈마 질량 분광법과 광범위한 응용 분야에 의한 것입니다.

이 논문은 온전한 제브라피쉬 배아 내에서 정상 및 비정상적인 시토신 메틸화의 신속하고 효율적인 시공간적 모니터링을 위한 프로토콜을 설명합니다.

온전한 Zebrafish 배아 내에서 정상 및 비정상적인 시토신 메틸화에 대한 신속하고 효율적인 시공간 모니터링

이 프로토콜은 수정 후 3-7일 후에 제브라피시 유충에 대한 약물 스크리닝 절차와 형태학적 평가를 설명합니다.

초기 단계 제브라피시 유충의 소분자 스크리닝 및 독성 테스트

배우세요 미세 입자상 물질에 노출된 제브라피시 배아에서 다환 방향족 탄화수소를 검출하기 위한 변형된 QuEChERS-HPLC 방법을. 이 기법은 환경 독성학 연구에서 내부 PAH 수준 측정의 민감도를 향상시킵니다.

미세 입자상 물질에 노출된 제브라피시 배아에서 다환 방향족 탄화수소를 검출하기 위한 변형된 QuEChERS-HPLC 방법

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