JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:10 min • November 28th, 2025
Weźmy urządzenie mikrofluidyczne składające się z rurki wlotowej połączonej z komorą mikrofluidyczną wykonaną z porowatych kanałów umożliwiających ruch bakterii.
Komora jest połączona z komorą obserwacyjną, która jest podłączona do pompy strzykawkowej przez rurkę wylotową.
Nasyć komory buforem, aby usunąć wszelkie pęcherzyki powietrza.
Umieść urządzenie na stole mikroskopu i ustawij soczewkę obiektywu nad komorą obserwacyjną.
Dostosuj ustawienia mikroskopu, aby wyraźnie wizualizować poszczególne komórki bakteryjne.
Umieść rurkę wlotową w zawiesinie bakterii oznaczonych fluorescencją.
Rozpocznij przepływ, aby wciągnąć bakterie do komory mikrofluidycznej, gdzie przechodzą przez porowate kanały, by dotrzeć do komory obserwacyjnej.
Zrób zdjęcia komory obserwacyjnej w regularnych odstępach.
Generuj krzywą przełomową, która reprezentuje ułamek bakterii przechodzących przez porowatą macierz w czasie.
Wyjmij mikrofluidykę z próżni i umieść ją na stole mikroskopu. Użyj pompki strzykawkowej, aby nasycić ją buforem ruchliwości.
Za pomocą mikroskopii Brightfield lub kontrastu fazowego dostosuj powiększenie, aby zobaczyć poszczególne komórki bakteryjne i skupić się na środku kanału obserwacyjnego. Zmień ustawienia ścieżki światła na mikroskopię fluorescencyjną. Dostosuj ostrość poprzez przesunięcie i czas naświetlania aparatu, aby rozróżnić pojedyncze komórki bakteryjne, w tym przypadku 100 milisekund.
Następnie włóż rurkę wlotową do rurki dwumililitrowej zawierającej zawiesinę bakteryjną. Odwróć kierunek pompy i zacznij wycofywać zawieszenie z przepływem jednego mikrolitra na minutę.
Skanuj przekrój całego kanału obserwacyjnego, rejestrując obraz co minutę.
Niniejszy artykuł opisuje metodę wizualizacji ruchu bakterii w urządzeniu mikroprzepływowym. Układ ten umożliwia obserwację pojedynczych komórek bakteryjnych podczas przemieszczania się przez kanały porowate.
Kwantyfikacja ruchliwości bakterii w mikrofluidycznych macierzach porowatych umożliwia precyzyjną ocenę transportu drobnoustrojów istotną dla modeli infekcji, badań nad mikrobiomem oraz przesiewu przeciwbakteryjnego. Wynik w postaci krzywej przełamania stanowi ilościowy, powtarzalny odczyt pozwalający na porównanie ruchu bakterii w kontrolowanych warunkach. Możliwość ta wspiera wczesne etapy odkrywania leków oraz ograniczanie ryzyka mechanistycznego w procesach badawczo-rozwojowych sektora biofarmaceutycznego.
Ten mikrofluidyczny test motoryczności wpisuje się w kontinuum od wczesnego etapu odkrywania do identyfikacji wiodących związków, stanowiąc pomost między podstawową charakterystyką drobnoustrojów a przedklinicznym modelowaniem infekcji.
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ostatnia aktualizacja: 29 sierpnia 2026