JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 5:00 min. • July 8th, 2025
Rozpocznij barwienie hematoksyliną i eozyną, biorąc szklane szkiełko zawierające wycinek tkanki zatopionej w parafinie. Zanurz szkiełko w roztworze deparafinowającym zawierającym ksylen - rozpuszczalnik organiczny, który rozpuszcza warstwę parafiny wokół tkanki, udostępniając ją plamom w kolejnych etapach.
Potraktuj wycinek tkanki alkoholem absolutnym, aby usunąć ksylen. Zanurz tkankę w zmniejszających się stężeniach alkoholu. Ten etap nawadnia tkankę, zastępując alkohol wodą w celu uzyskania lepszej kompatybilności z barwnikami rozpuszczalnymi w wodzie.
Zabarwić tkankę zasadową hematoksyliną, która w postaci utlenionej wiąże się z zaprawą - kationem metalu. Kompleks ten wiąże się elektrostatycznie z kwasami nukleinowymi w genomie, barwiąc jądro na fioletowo.
Zanurz wybarwiony fragment w kwaśnym roztworze różnicującym, aby usunąć nadmiar hematoksyliny z cytoplazmy, sprawiając, że jądro zatrzymujące barwnik wydaje się wyraźne. Potraktuj tkankę alkalicznym środkiem niebieszczącym, aby zneutralizować wolne kwasy. Powoduje to regresję koloru fioletowego barwnika do niebieskiego, uwydatniając szczegóły jądrowe.
Zanurz szkiełko w kwaśnym roztworze eozyny, aby wybarwić podstawowe składnik
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych