JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 6:25 min. • July 8th, 2025
W celu ilościowego wykrywania określonego białka w lizacie mózgu myszy za pomocą elektrochemiluminescencji, ECL, testu immunologicznego, należy rozpocząć od płytki do testu wielodołkowego.
Studnie składają się z przewodzących elektrod roboczych i przeciwelektrod, które uzupełniają obwód elektryczny. Warstwa dielektryczna oddziela elektrody, poprawiając czułość testu.
Dodaj pierwotne mysie przeciwciała monoklonalne przeciwko białku docelowemu do studzienek. Elektrody robocze, o większej zdolności wiązania, ułatwiają unieruchomienie na nich przeciwciał.
Inkubować z roztworem zawierającym białko, wiążąc się z pozostałymi powierzchniami wiążącymi studzienki, zmniejszając interferencję tła.
Dodaj lizat frakcji jądrowej mózgu myszy. Białko docelowe w lizacie wiąże się specyficznie z przeciwciałami monoklonalnymi.
Dodaj nieznakowane przeciwciała poliklonalne, rozpoznające i wiążące się z epitopami na białku, które jest związane z pierwszorzędowymi przeciwciałami monoklonalnymi na elektrodzie. Dodaj specyficzne przeciwciała drugorzędowe znakowane kompleksem rutenu, wiążące się z nieznakowanymi przeciwciałami. Dodać odpowiedni bufor zawierający środek powierzchniowo czynny — zapewniający od
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych