Trójwymiarowe ilościowe obrazowanie fazowe w celu scharakteryzowania podtypów limfocytów
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:37 min. • July 8th, 2025
Załaduj zawiesinę podtypu limfocytów do komory obrazowania.
Umieść komorę na stoliku mikroskopu do ilościowego obrazowania fazowego 3D.
Dostosuj parametry mikroskopu i płaszczyznę ogniskowej, aby uzyskać optymalne obrazowanie.
Podczas obrazowania limfocytów wiązka lasera rozdziela się na wiązki referencyjne i próbki.
Cyfrowe urządzenie do mikrozwierciadła, wyposażone w układ mikroluster na ścieżce wiązki próbki, umożliwia obracanie wiązki o 360 stopni wokół osi optycznej.
Każda wiązka przechodząca przez limfocyty ulega przesunięciu fazowemu w oparciu o zmiany współczynnika załamania światła w komórce.
Otrzymana próbka i wiązki referencyjne łączą się, tworząc hologram 2D.
Sekwencja hologramów zawierających informacje o fazie i amplitudzie pod różnymi kątami jest rejestrowana poprzez rotację wiązki wokół limfocytów.
Uzyskaj wiele hologramów tła o różnych kątach oświetlenia, z wyłączeniem limfocytów.
Korzystając z algorytmu tomografii dyfrakcyjnej, zrekonstruuj hologramy do tomogramu 3D z indeksem załamania światła, dostarczając informacji morfologicznych i biochemicznych limfocytów bez konieczności znakowania.
Aby uzyskać optymalne obrazowanie, rozcieńczyć każdą próbkę komórek do stę
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych