Test kodów kreskowych do charakterystyki fenotypowej i funkcjonalnej komórek odpornościowych

Zacznij od próbek testowych zawierających stymulowane i utrwalone komórki odpornościowe.

Stymulacja indukuje ekspresję określonych markerów w komórkach, podczas gdy fiksacja zachowuje markery fenotypowe, w tym antygeny powierzchniowe komórki i markery stanu funkcjonalnego, w tym cytokiny.

Do każdej próbki dodać unikalną kombinację przeciwciał sprzężonych z izotopami metali ciężkich.

Technika ta pozwala na unikalne kodowanie kreskowe wielu próbek, wyróżniając każdą próbkę kombinacją izotopów metali ciężkich.

Przeciwciała wiążą się ze wspólnym epitopem, kodując kreskowo wszystkie komórki w próbkach.

Połącz wszystkie próbki oznaczone kodami kreskowymi w jednej probówce w celu dalszego przetwarzania.

Dodaj koktajl przeciwciał sprzężonych z metalem, aby zabarwić antygeny powierzchniowe.

Dodaj bufor przepuszczalności, aby zwiększyć przepuszczalność błony komórkowej dla barwienia wewnątrzkomórkowego.

Dodaj kolejny zestaw przeciwciał sprzężonych z metalami, aby wybarwić cytokiny wewnątrzkomórkowe.

Kody kreskowe umożliwiają jednoczesne barwienie i pobieranie próbek zbiorczych za pomocą cytometrii masowej. Technika ta maksymalizuje wydajność testu, poprawiając ocenę markerów stanu fenotypowe