JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:04 min. • July 8th, 2025
Weźmy komórki wyizolowane z móżdżku nowonarodzonej myszy, zawierające komórki macierzyste, neurony i komórki glejowe.
Dodaj mikrokulki magnetyczne pokryte przeciwciałem, które wiążą się z glikoproteiną powierzchniową specyficzną dla komórek macierzystych.
Odwirować, usunąć niezwiązane kulki i ponownie zawiesić komórki w buforze.
Załaduj komórki do kolumny separacyjnej umieszczonej w separatorze magnetycznym, który zatrzymuje komórki macierzyste związane z mikrokulkami, podczas gdy inne komórki przepływają.
Dodaj pożywkę neurosferyczną, aby wymyć komórki i przenieś je do mikropłytki. Inkubacja w celu wywołania tworzenia pierwotnych neurosfer, samoodnawiających się kolonii komórek macierzystych.
Odwirować i wyrzucić pożywkę. Ponownie zawiesić neurosfery w pożywce zawierającej enzymy, aby strawić białka adhezyjne komórkowe.
Odwirować i usunąć enzymy. Dodaj pożywkę neurosfery i mechanicznie dysocjuj komórki.
Inkubuj, aby umożliwić proliferację komórek macierzystych i wtórne tworzenie neurosfery, podczas gdy zróżnicowane komórki pozbawione cech komórek macierzystych nie proliferują.
Przenieś neurosfery do pożywki różnicującej i inkubuj, promując różnicowanie w neurony i glej.
Umieść pro
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych