JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:14 min. • July 8th, 2025
Weźmy unieruchomiony, genetycznie zmodyfikowany wycinek koronalny myszy w komorze nagraniowej wypełnionej natlenizowanym buforem.
Wycinek zawiera obszar prążkowia, w którym znajdują się interneurony przeprogramowane z komórek prekursorowych oligodendrocytów oznaczonych markerem interneuronowym i ekspresją białka fluorescencyjnego.
Zmontuj pipetę rejestrującą składającą się z elektrody zanurzonej w roztworze wewnątrzkomórkowym.
Mikroskopowo zidentyfikuj fluorescencyjny interneuron.
Utrzymuj dodatnie ciśnienie w pipecie i przesuwaj ją w kierunku docelowego interneuronu, stykając się z błoną.
Zastosuj podciśnienie, aby utworzyć uszczelnienie o wysokiej wytrzymałości.
Zastosuj impulsy podciśnienia, aby przebić membranę, ustanawiając konfigurację całego ogniwa.
Utrzymuj potencjał błonowy interneuronu na stałej wartości ujemnej.
Zastosuj krótkie prądy przyrostowe, otwierając kanały jonowe i zmieniając potencjał błony, wyzwalając potencjał czynnościowy.
W końcu membrana wraca do potencjału spoczynkowego.
Obserwuj te zmiany w potencjale błony w odpowiedzi na bieżące wstrzyknięcie, wskazując na dojrzewanie neuronów i pomyślne przeprogramowanie.
Po przeniesieniu jednego wycinka tkanki do kom
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych