JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:59 min. • June 17th, 2025
Zacznij od wycinka móżdżku uzyskanego z mózgu młodego szczura po urodzeniu w wielodołkowej płytce zawierającej pożywkę.
Usuń pożywkę i inkubuj plasterek w cytoplazmatycznym roztworze barwnika fluorescencyjnego, aby oznaczyć komórki ziarniste (GC).
Przenieś plasterek na membranę z wkładką transwell i usuń nadmiar barwnika.
Wyjmij wkładkę i napełnij studzienkę mediami. Następnie załóż wkładkę i dodaj pożywkę, aby zakryć chusteczkę.
Inkubować, aby tkanka mogła przyczepić się do błony wprowadzonej.
Przenieść płytkę do inkubatora podłączonego do makroskopu konfokalnego i nałożyć na nią szklaną osłonę.
Ustaw warunki hodowli, kontynuuj inkubację tkanki, a następnie rozpocznij obrazowanie.
Po oświetleniu laserowym oznaczone GC fluoryzują.
Przechwytuj obrazy poklatkowe, aby zobrazować radialną migrację GC przez warstwę molekularną móżdżku.
Korzystając z oprogramowania do obrazowania, przeanalizuj odległość migracji GC.
Po pokrojeniu próbki użyj pipety ze ściętą białą bańką, aby przenieść je z odrobiną HBSS na płytkę sześciodołkową. Załaduj do trzech plasterków do każdej studzienki. Następnie, po opróżnieniu pożywki w każdej załadowanej studzince, dodaj pięć mililitrów roztworu ładującego zawierające
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych