JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:43 min. • June 18th, 2025
Weźmy wielodołkową płytkę zawierającą przylegające nerwowe komórki macierzyste lub NSC wyizolowane z mózgu transgenicznej myszy. Te NSC zawierają fluorescencyjnie znakowane białko, które jest specyficzne dla pierwszej fazy wzrostu lub G1.
Gdy NSC się dzieli, fluoryzuje w fazie G1 cyklu komórkowego, nie emitując fluorescencji w innych fazach.
Umieść płytkę w komorze obrazowania konfokalnego laserowego mikroskopu skaningowego, utrzymywanej w kontrolowanej temperaturze.
Wybierz żądaną soczewkę obiektywu i dostosuj intensywność fluorescencji.
Skonfiguruj parametry obrazowania poklatkowego.
Wybierz opcję dużego obrazu i zaplanuj rejestrowanie obrazu w regularnych odstępach czasu na żądany czas.
Użyj szybkiego skanera rezonansowego, aby uniknąć fotowybielania i utrzymać wysoką rozdzielczość.
Użyj ustawienia jasnego pola, aby zobrazować kształt komórki i użyj odpowiedniego filtra fluorescencyjnego, aby uchwycić fluorescencję.
Rozpocznij obrazowanie poklatkowe NSC, aby uwidocznić różne fazy cyklu komórkowego.
Przygotuj konfokalny laserowy mikroskop skaningowy do obrazowania, podgrzewając dołączoną komorę kontroli temperatury do 37 stopni Celsjusza w atmosferze 5% dwutlenku węgla. Umieść 96-dołkową
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych