Tytuł: Hermetyzacja komórek za pomocą kropelek

Nazywam się Hang Moon. Współpracuję z profesorem od prezerwatyw. On i ja pracujemy ze sceną XYJ, aby stworzyć strukturę 3D komórki.

Cześć, jestem PE i Lynn i pracuję nad projektem drukowania komórek z enkapsulacją komórek oraz mediami i żelami. Jest to elektromagnes do wyrzucania komórki i mieszaniny komórek aros na pożywkę komórkową. Zawór so jest aktywowany przez dwie linie sygnałowe.

Linia sygnałowa pochodzi tutaj z suchej płyty. Stąd dochodził sygnał. Ta linia przechodząca przez tamtą linię, ta jest pierwszym generatorem funkcji.

Tak więc pierwszy jest generowany w nasz zaprogramowany sposób. Więc jeśli chcesz, chcesz zmienić torebkę, możesz zmienić program za pomocą linii przełączników lub możesz sterować generatorem procesów na komputer. Zawór komórkowy jest otwierany i zamykany przez sygnał elektryczny, ale ogniwo jest zasilane przez tę linię.

Komórka i pożywka lub agrożel są dostarczane przez strzykawki-strzykawki. Strzykawki wewnątrz wody, wewnątrz strzykawki jest światło dociskające powietrze. Powietrze pod ciśnieniem dostarczane jest ze zbiornika, takiego jak tutaj linia.

Tak więc mała linia i powietrze przelatują przez filtr powietrza. Filtr powietrza rozróżnia kurz i inne rodzaje brudu. To jest generator ciśnienia, który nazywamy tym, generuje sygnał używany do otwarcia słonecznego dzwonu powietrznego lub zamknięcia komputera słonecznego zaworu powietrza jest podłączony przez złącze P-I-B-U-S-V.

Możemy więc korzystać z portu USB bezpośrednio przez nasz komputer, laptop. Więc ten jest połączony z tą stroną tutaj. A potem możemy sterować za pomocą laptopa sterującego tutaj.

Jeśli więc chcemy zsynchronizować ruch sceny i otwieranie dzwonka, to może być sterowany za pomocą tego samego kontrolera co laptop. Możemy więc kontrolować czas, kiedy się otwiera, kiedy się zamyka, kiedy się porusza i kiedy się zatrzymuje. I możemy zsynchronizować ruch i dzwonek otwierający.

Ten etap to etap zmotoryzowany. Jest automatycznie przenoszony przez linię sygnalizacji śmierci i silnik. Czyli motoryzacja wynosi 0,1 mikrometra.

Więc może idealnie może narysować linię do 100 milimetrów linii. Tak więc oś odrzutowca porusza się, porusza się w górę i w dół w ten sposób. W ten sposób kontroluje nasadkę między podłożem a pasem słonecznym.

Dzięki temu może kontrolować wysokość wyrzutu. Ten substrat jest połączony ze stopniami XY tutaj, X tutaj i Y tam. Porusza się więc wokół planu XY.

Więc rysuje pewne cechy demonstracyjne prawe etapy to trzy Xs, X, Y i G.So oś jet con jet lub oś XY jest tutaj kontrolowana przez sygnał. Tak więc linia sygnałowa jest tutaj podłączona do kontrolera ruchu. Ten kontroler ruchu w ogóle nie ma żadnego ręcznego przełącznika, ponieważ nie można nim sterować ręcznie.

Jest sterowany za pomocą laptopa. Więc laptop jest podłączony. Z tyłu kontrolera mamy trzy x dla komórki drukującej XY jet.

Tak więc niezależnie od siebie wytwarza trzy różne rodzaje sygnału. A następnie kontroler ruchu jest komunikowany przez złącza RF 2, 3, 2 jest bezpośrednio podłączony do USV. A następnie USV jest podłączony do laptopa.

Tak więc pożyczkobiorca kontrolowany przez laptopa. Korzystamy z programu AutoCAD, tworzymy ścieżkę generacji A w ten sposób bam. A potem zmienia się na język maszynowy w ten sposób.

Tak więc język maszynowy jest przenoszony na podobny do prostego znaku i cyfr w ten sposób. Jest każda pozycja związana z etapami X, Y, Z, tutaj wybieram plik, zawieram ten rodzaj programu, a następnie otwieram program do pobierania w ten sposób. A potem wybieram z pliku, który robi dokładnie to samo, plik tekstowy.

Pobierany jest tylko plik tekstowy, wybierz plik tekstowy i automatycznie pobierz z laptopa do kontrolera ruchu com, a następnie przechodzi w postać BAM, jak wspomniałem wcześniej, BAM. W tej kolbie znajdują się trzy mysie komórki fiberblast N IH 3G. Najpierw zajmę się starymi mediami.

Proces ten polega na przejściu komórek, a komórki są przyklejane do dna kolby. Więc po odessaniu pożywki, zamierzam wprowadzić sześć RY, w których znajduje się enzym. Porządku? Tak więc po umieszczeniu trypsyny w kolbie musimy odczekać od trzech do pięciu minut, aż komórki oderwą się od dna kolby.

Teraz jesteśmy gotowi do włożenia pożywki i przejścia komórek do probówki wirówkowej. Jest to rozcieńczenie jeden do jednego. Wkładam więc tutaj sześć milionów tych mediów i zamierzam trochę umyć piły, aby upewnić się, że wszystkie są przejść.

A teraz komórki są gotowe do odwirowania w tej probówce. Teraz odwirujemy te komórki z prędkością tysiąca obrotów na minutę przez trzy do pięciu minut. Teraz, gdy komórki zostały rozdrobnione w granulkę, zamierzam odessać supernatant.

Teraz zamierzam wypłukać komórki za pomocą PBS. A to jest to, to jest do barwienia komórek. Bejce, których używamy, to podłoża esterazy.

Dobra, teraz znowu odwirujemy i odwirujemy komórki do podniebienia. Zamierzam odessać PBS i zaognić żywicą komórki. Jestem w mediach, żeby mnie policzono.

Mieszam komórki tak, że kiedy pobierzemy próbkę, stężenie będzie równomierne w całej probówce. Teraz wezmę sto mikrolitrów komórek, aby zmierzyć gęstość komórek. Teraz wkładam sto mikrolitrów typu i niebieskiego, który jest plamą.

Będziemy czekać od trzech do pięciu minut, aby plama przeniknęła przez martwe błony komórkowe. Kiedy liczymy komórki, niebieskich nie liczymy. Komórki są gotowe do policzenia za pomocą hemocytometru, zamierzam przenieść 50 mikrolitrów mieszaniny komórek na każdą stronę hemocytometru.

Dobra, przykryję to szklaną stroną zjeżdżalni. Cytometr hemocytometryczny ma dwie strony. Zamierzam policzyć pierwszą stronę i po policzeniu obu stron wezmę średnią, a następnie pomnożę przez dwa, ponieważ mieliśmy rozcieńczenie jeden do jednego z typem w kolorze niebieskim.

Zasadniczo gęstość naszych komórek będzie 135 razy 10 do czterech komórek na promil. W naszym eksperymencie użyjemy roztworu komórkowego o stężeniu pół miliona komórek na promil. A ponieważ mamy 13,5 miliona komórek, będę reanimował zawieszanie komórek w 27 milionach nośników.

Używamy dwóch różnych rodzajów bejc. Jest to test żywych żywych zmarłych z sond molekularnych. Nasza pierwsza plama nazywa się calcium am.

Nasze drugie barwienie nazywa się homodimerem AUM. Barwiąc martwe komórki. Używamy niebieskiego wzbudzenia, aby uzyskać zieloną fluorescencję i zielonego wzbudzenia, aby uzyskać czerwoną fluorescencję W przypadku tych dwóch barwień, kiedy obrazujemy, nasze rozwiązanie do gry w kości zostanie przygotowane w PBS.

Więc najpierw zamierzam przenieść pięć milionów PBS do probówki z solą fizjologiczną buforowaną fosforanami. To jest roztwór soli fizjologicznej. Teraz zamierzam dodać pół mikrolitra wapnia na promil.

Teraz dodaję 2,5 mikrolitra wapnia do probówki i dwa mikrolitry homodimeru na promil PBS. Oto maszyna btex. Sprawia, że komórka i pożywka są dobrze rozprowadzone w całej objętości.

Teraz ładujemy ogniwo o pojemności 200 mikrolitrów na siódemkę tutaj. A potem zakładamy nakrętkę, która jest szczelnie zamknięta w ten sposób, tutaj otwieram zawór, a potem jest ciśnienie, dostaje się lekkie powietrze, a następnie reguluję pasek w ten sposób. A potem zmienia ciśnienie.

Więc się dostosowuję. Ciśnienie wynosi pięć PSI. Ciśnienie wewnątrz rurki wynosi pięć PSI.

Stąd do tego miejsca łączyło się to z otworem. Więc po prostu otwieramy dzwon tutaj, a następnie komórkę wstrzykujemy pod ciśnieniem pięciu PSI, a następnie zaczynamy się otwierać. A potem zaczyna działać zawór Sona.

A następnie zwijamy podłoże. Jego podłożem jest po prostu zwykłe szkło ślizgowe. A potem ładujemy odpowiednią porcję, a ja nakładam trochę taśmy do szkicowania, aby tak przymocować podłoże, prawda?

I po prostu to naprawiam. Ustawiamy więc całość ogniwa i zaworu armaturalnego oraz podłoże podczas przesuwania pracy ar, zaczynamy pracę. Więc ustawiamy całość, a następnie otwieramy zawór.

A potem przesuwamy scenę w ten sposób, prawda? A potem robimy jakiś wzór na podłożu, wzór na podłożu i charakter bam. Zamierzam zanurzyć te kropelki, które wydrukowaliśmy, w tym roztworze barwnika, który zrobiliśmy wcześniej.

A teraz kropelki będą inkubowane przez 10 minut, a następnie obrazowane. Najpierw zamierzam wyregulować obraz przez okular. Nasz pierwszy obraz to po prostu obraz w jasnym polu.

Zamierzam wyłączyć światło i zmienić filtr tak, abyśmy mieli niebieskie wzbudzenie, które pokaże zieloną fluorescencję. Trzecie zdjęcie, które zrobimy, to martwe komórki, które są barwnikiem Thm Homodimer. A przy zielonym świetle uzyskamy czerwoną fluorescencję.