JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:42 min. • June 17th, 2025
Weźmy znieczuloną transgeniczną mysz wykazującą ekspresję białek fluorescencyjnych w mikrogleju. Zamocuj go na stereotaktycznej ramie z zmotoryzowanym stolikiem pod mikroskopem dwufotonowym.
Czaszka jest wyposażona w metalową rurkę ze szklanym dnem, która delikatnie spłaszcza zębodoł powyżej obszaru hipokampa cornu amonisa 1 lub CA1, zapewniając wyraźny interfejs optyczny bez
nadmiernego nacisku na leżącą pod spodem tkankę.
Napełnij metalową rurkę wodą, aby zoptymalizować transmisję optyczną.
Aktywuj laser impulsowy na długości fali wzbudzenia.
Wykorzystując fluorescencję z miąższu mózgu i światło odbite od metalowej rurki, dostosuj ostrość do obszaru CA1.
Zmień położenie głowicy myszy, aby wyrównać szklane dno równolegle do płaszczyzny obrazowania, zapewniając jednolitą ostrość w całym polu widzenia.
Dostosuj obiektyw, aby uzyskać optymalną rozdzielczość i obserwuj dynamikę mikrogleju in vivo w regionie CA1.
Następnie zobrazuj zakręt zębaty, w którym fluorescencyjny mikroglej potwierdza integralność CA1.
Umieść mysz w urządzeniu przytrzymującym głowę pod soczewką obiektywu mikroskopu dwufotonowego i na zmotoryzowanym stoliku skanującym XY. Następnie wypełnij przestrzeń między szklanym dne
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych