Przygotowanie segmentowanych mikrotubul do badania ruchów napędzanych przez demontujące się końce mikrotubul

Ogólnym celem poniższego eksperymentu jest zbadanie ruchów cząsteczek białka i kulek pokrytych białkiem z końcami mikrotubul depolimeryzujących. Osiąga się to poprzez zmontowanie komory przepływowej wielokrotnego użytku z czystym szkiełkiem nakrywkowym. Następnie przygotowywane są nasiona mikrotubul przymocowane do szkiełka nakrywkowego i wykorzystywane do nukleacji mikrotubul, które następnie są tymczasowo stabilizowane za pomocą fotozniszczalnych czapek.

Następnie białka znakowane GFP lub kulki pokryte białkiem są wprowadzane do komory przepływowej i wiążą się z segmentowanymi mikrotubulami. Depolimeryzacja w mikrowannie jest następnie wyzwalana przez usunięcie nakrętek za pomocą fotoablacji. Obrazy są analizowane za pomocą CH w celu określenia, czy znakowane białka wykazują zachowanie śledzenia końcówki, czyli ruch wraz z końcami depolimeryzujących mikrotubul.