RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
pl_PL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/63819-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a method for reconstituting microtubule bundles in vitro to directly measure the forces exerted within these structures. Utilizing simultaneous optical trapping and total internal reflection fluorescence microscopy, the research enables nanoscale-level insights into the mechanical components of cells under various physiological conditions.
Tutaj prezentujemy protokół odtwarzania wiązek mikrotubul in vitro i bezpośredniego ilościowego określania sił wywieranych w ich obrębie za pomocą jednoczesnego pułapkowania optycznego i mikroskopii fluorescencyjnej z całkowitym wewnętrznym odbiciem. Test ten pozwala na pomiar sił i przemieszczeń generowanych przez zespoły białek w aktywnych sieciach mikrotubul na poziomie nanoskali.
Nasz protokół pozwala naukowcom budować motywy cytoszkieletu z oczyszczonych składników i bezpośrednio mierzyć siły generowane przez te sieci, aby zrozumieć, jak te mechaniczne składniki komórki funkcjonują zarówno w stanie zdrowym, jak i chorobowym. Ta metoda pozwala nam określić ilościowo siły i bezpośrednio skorelować te liczby, aby zachować parametry zaangażowanych białek, w tym stężenie i gęstość białka. Parametry, które są na ogół niemożliwe do uzyskania w komórce.
Ta metoda może zapewnić wgląd w każdy rodzaj sieci cytoszkieletu, taki jak te zaangażowane w mitozę lub rozwój neuronalny. Można go łatwo dostosować do badania sieci zaangażowanych w skurcz mięśni lub migrację komórek, po prostu wymieniając te konkretne białka, które są używane. Najtrudniejszym aspektem tej metody jest koordynacja różnych technologii, w tym pułapki optycznej z pojedynczą wiązką i mikroskopu TIRF.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
10:08
Related Videos
12.1K Views
07:27
Related Videos
2K Views
12:20
Related Videos
15K Views
08:28
Related Videos
8.8K Views
09:56
Related Videos
5.7K Views
07:53
Related Videos
4K Views
07:20
Related Videos
3.1K Views
06:53
Related Videos
2.7K Views
08:02
Related Videos
3.2K Views
08:44
Related Videos
4.1K Views