March 5th, 2014
Ogólnym celem tego badania było pokazanie potencjalnego mechanizmu zanieczyszczenia krzyżowego patogenu Listeria monocytogenes przenoszonego przez żywność w sklepie delikatesowym. Metodologia ta może być stosowana w wielu różnych środowiskach do śledzenia zanieczyszczenia patogenami.
Ogólnym celem tej procedury jest wykazanie potencjalnego mechanizmu zanieczyszczenia krzyżowego patogenu przenoszonego przez żywność, Listeria monocytogenes. W delikatesach detalicznych. Osiąga się to poprzez zaprojektowanie najpierw makiety kuchni delikatesowej, która symuluje środowisko handlu detalicznego.
W drugim etapie mięso delikatesowe jest zaszczepiane związkiem fluorescencyjnym, a następnie ochotnicy są proszeni o krojenie, pakowanie i przechowywanie panierowanego mięsa w lodówce. W ostatnim etapie potencjalne zanieczyszczenie krzyżowe będzie śledzone poprzez obserwację związku fluorescencyjnego w czarnym świetle. Ostatecznie spektrometria może być wykorzystana do ilościowego określenia związku fluorescencyjnego, ilustrując, w jaki sposób dochodzi do zanieczyszczenia krzyżowego w środowisku delikatesów detalicznych.
Główną przewagą tej techniki nad metodami wykorzystującymi mikroorganizmy jest to, że dzięki niej związek fluorescencyjny można szybko określić ilościowo za pomocą fotometrii spektralnej. Chociaż ta metoda może zapewnić wgląd w handel detaliczny, bezpieczeństwo żywności można również zastosować w innych systemach, takich jak małe gospodarstwa, zakłady przetwórstwa spożywczego i inne operacje gastronomiczne. Zacznij od umieszczenia czystych rękawiczek i 70% etanolu na blacie do użycia podczas zabiegu.
Następnie za pomocą czystego noża i deski do krojenia pokrój mięso delikatesowe na trzy próbki o grubości około 100 milimetrów. Następnie za pomocą lekko wilgotnej, czystej gąbki równomiernie pokryj jedną próbkę świeżo przygotowanym proszkiem fluorescencyjnym. Następnie owiń wszystkie próbki folią foliową i za pomocą taśmy oznacz próbkę pomalowaną proszkowo jako a, a pozostałe dwie próbki jako b i c.
Następnie umieść próbki w temperaturze czterech stopni Celsjusza i zamontuj czarne kompaktowe lampy fluorescencyjne z 13-watowymi żarówkami wokół obszaru krajalnicy. Wytnij folię aluminiową o wymiarach pięć na pięć centymetrów, aby posłużyła jako szablon do pobierania wymazów i napełnij w tym czasie probówki o pojemności 1315 mililitrów sześcioma mililitrami 95% etanolu. Następnie zamontuj trzy kamery wideo w strategicznych miejscach, aby obserwować wszystkie obszary makiety delikatesów w tym samym czasie.
Aby śledzić zanieczyszczenie mięsa delikatesowego proszkiem fluorescencyjnym, włącz kamery, aby nagrywać uczestników podczas zabiegu i zrób zdjęcie przed pozorowanymi delikatesami w czarnym świetle fluorescencyjnym. Następnie poproś każdego uczestnika, aby wykonał następujące czynności. Najpierw wyjmij z lodówki próbkę mięsa oznaczoną etykietą A.
Następnie rozpakuj mięso, zachowując plastikową folię, i umieść próbkę na tacy wózka krajalnicy. Zabezpiecz próbkę uchwytem do mięsa, a następnie włącz krajalnicę i ustaw pokrętło indeksu krajalnicy na dwa. Następnie pokrój i dozuj pięć kawałków mięsa na papier delikatesowy, a następnie wyłącz zasilanie i zwolnij uchwyt do mięsa.
Umieść plastry mięsa w plastikowej torbie oznaczonej A, a następnie ponownie zawiń próbkę mięsa i włóż ją z powrotem do lodówki po pokrojeniu próbek B i C, jak pokazano na zdjęciu pozorowanej kuchni. Aby określić ilościowo zanieczyszczenie proszkiem fluorescencyjnym, umieść sterylny szablon z folii aluminiowej na każdym obszarze wskazanym na obrazie. Następnie przetrzyj każdy obszar sterylnym wacikiem bawełnianym z alginianu wapnia, nasączonym 95% etanolem i umieść jeden bawełniany wacik w każdej z tubek z 95% etanolem.
Dokładnie wymieszaj każdą probówkę, a następnie przenieś zawartość do poszczególnych szklanych kuwet. Odczytaj absorbancję każdej próbki wacika przy 370 nanometrach, a następnie użyj wzoru, aby obliczyć ilość proszku fluorescencyjnego pobranego z każdego obszaru. Na koniec obejrzyj film, aby określić ilościowo, ile razy różne powierzchnie makiety de zostały dotknięte.
W tym reprezentatywnym eksperymencie ochotnicy zostali nagrani na wideo, aby przeanalizować średnią częstotliwość kontaktu dłoni z różnymi powierzchniami krajalnicy do mięsa podczas przygotowywania plastrów delikatesowych. Dla różnych widzów przeanalizowano następnie wideo i uśredniono częstotliwość kontaktów dłoni. Dane wskazują, że zgodnie z oczekiwaniami, delikatesy z uchwytem do mięsa, opakowanie mięsa, wędliny delikatesowe i papier delikatesowy miały najwyższe wskaźniki kontaktu z rękami ze średnią od ośmiu do 14 kontaktów na uczestnika.
Powierzchnie, takie jak lodówka, stół uchwytowy, uchwyt do mięsa, ostrze krajalnicy i różne elementy tacy wózka, zostały następnie wymazane, a ilość proszku fluorescencyjnego na różnych elementach krajalnicy i pozorowanej kuchni została określona ilościowo. Jak właśnie pokazano, zgodnie z oczekiwaniami. Wyniki wykazały, że najwyższy poziom zanieczyszczenia stwierdzono na lodówce, uchwycie, uchwycie mięsa i tylnych płytach.
Podczas wykonywania tej procedury należy pamiętać o jednoczesnym włączeniu kamer wideo, aby zapewnić synchronizację obrazów. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie bezpieczeństwa żywności, takie jak to, w jaki sposób dochodzi do zanieczyszczenia krzyżowego, a na podstawie naszych wyników można opracować skuteczne praktyki szkoleniowe.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
To badanie demonstruje potencjalny mechanizm krzyżowego skażenia patogenem Listeria monocytogenes w środowisku detalicznym sklepu mięsnego. Zaprojektowana makieta kuchni sklepu mięsnego symuluje środowisko detaliczne, umożliwiając śledzenie skażenia patogenem.