Name: Trzy różne protokoły sieciowania kolagenu rogówkowego w stożku rogówki: konwencjonalny, przyspieszony i jonoforeza (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: Poznaj trzy protokoły sieciowania kolagenu rogówki: konwencjonalny, przyspieszony i jonoforezę. Porównaj ich skuteczność w leczeniu stożka rogówki i zatrzymywaniu progresji tej choroby.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Autorzy nie mają żadnych podziękowań.

Niniejsze protokoły są zgodne z wytycznymi komisji etyki badań z udziałem ludzi naszej instytucji.
1. Konwencjonalne sieciowanie kolagenu rogówki (C-CXL)
1. Przygotowanie pacjenta
<ol>
	<li>Na 5 dni przed operacją podawać 1% krople pilokarpiny dwa razy dziennie do oka podlegającego zabiegowi.</li>
	<li>W sali operacyjnej, w warunkach aseptycznych, ułożyć pacjenta na plecach.</li>
	<li>Zastosować znieczulenie miejscowe, np. oksybuprokainę 0,4%.</li>
	<li>Przetrzeć oko oraz skórę wokół oka antyseptykiem jodowym dwa razy.</li>
	<li>Użyć rozwieraka powiek, aby utrzymać oko w pozycji otwartej.</li>
</ol>
2. Usunięcie nabłonka
<ol>
	<li>Zaznacz centralne 9,0 mm rogówki za pomocą okrągłego markera do rogówki.</li>
	<li>Usuń centralne 7,0 do 9,0 mm nabłonka rogówki poprzez mechaniczne oczyszczenie przy użyciu tępym szpatułką.</li>
</ol>
3. Aplikacja ryboflawiny
<ol>
	<li>Nakładaj 0,1% ryboflawinę z 20% dekstranem na rogówkę co minutę przez 20 min.</li>
</ol>
4. Naświetlanie UVA
<ol>
	<li>Naświetlaj rogówkę światłem UVA o długości fali 370 nm z natężeniem promieniowania 3 mW/cm2 (dawka powierzchniowa 5.4 J/cm2) i w odległości roboczej 5 cm przez 30 min.</li>
</ol>
<img alt="Układ lasera okularnego do fotonicznej chirurgii oka, wzbudzenie optyczne, analiza procedury medycznej." src="/files/ftp_upload/53119/53119fig1.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 1">
Rycina 1: Naświetlanie UVA w C-CXL. Rogówkę naświetla się światłem UVA o długości fali 370 nm przy natężeniu promieniowania 3 mW/cm2 (dawka powierzchniowa 5,4 J/cm2) z odległości roboczej 5 cm przez 30 minut. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig1large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<ol start="2">
	<li>Podczas naświetlania należy aplikować krople ryboflawiny na rogówkę co 5 min.</li>
	<li>W razie potrzeby podczas naświetlania należy zastosować miejscowe znieczulenie (oksybukaina 0,4%).</li>
</ol>
5. Zakończenie zabiegu
<ol>
	<li>Podaj krople z antybiotykiem (tobramycyna 0.3%) oraz sztuczne łzy (krople hialuronianu 0.18%) do operowanego oka.</li>
	<li>Na koniec zabiegu załóż miękką soczewkę kontaktową bandażową do czasu pełnej reepitelializacji. Reepitelializacja trwa zazwyczaj 3 dni.</li>
	<li>Zastosuj leki przeciwbólowe, takie jak paracetamol (500 mg) z kodeiną (30 mg), w dawce 6 tabletek na dobę.</li>
	<li>Po reepitelializacji rogówki rozpocznij miejscową terapię sterydami (miejscowo deksametazon 1 mg/ml) i kontynuuj ją przez 3-4 tygodnie. Dodatkowo stosuj sztuczne łzy 4 razy dziennie przez 1 miesiąc.</li>
</ol>
2. Przyspieszone sieciowanie kolagenu rogówki (A-CXL)
1. Przygotowanie pacjenta
<ol>
	<li>Na 5 dni przed operacją podawaj 1% krople pilokarpiny dwa razy dziennie do oka poddawanego zabiegowi.</li>
	<li>W sali operacyjnej, w warunkach aseptycznych, ułóż pacjenta na plecach.</li>
	<li>Zastosuj znieczulenie miejscowe, np. oksybuprokainę 0,4%.</li>
	<li>Oczyść oko oraz skórę wokół oka antyseptykiem jodowym dwa razy.</li>
	<li>Użyj rozwieraka powiek, aby utrzymać oko otwarte.</li>
</ol>
2. Usuwanie nabłonka
<ol>
	<li>Zaznacz środkowe 9,0 mm rogówki za pomocą okrągłego markera do rogówki</li>
	<li>Usuń środkowe 7,0 do 9,0 mm nabłonka rogówki poprzez mechaniczne oczyszczenie za pomocą tępej szpatułki.</li>
</ol>
3. Aplikacja ryboflawiny
<ol>
	<li>Nakładać 0,1% ryboflawiny bez dekstranu na rogówkę co 2 min przez 10 min.</li>
</ol>
4. Naświetlanie UVA
<ol>
	<li>Naświetlaj rogówkę światłem UVA o długości fali 370 nm, przy natężeniu promieniowania 30 mW/cm2 (dawka powierzchniowa 5.4 J/cm2) i odległości roboczej 5 cm przez 3 min.</li>
	<li>W trakcie naświetlania, w razie potrzeby, zastosuj miejscowe znieczulenie (oxybuproca&amp;#239;na 0.4%).</li>
</ol>
5. Zakończenie operacji
<ol>
	<li>Podaj do operowanego oka krople z antybiotykiem (tobramycyna 0,3%) oraz sztuczne łzy (krople z hialuronianem 0,18%).</li>
	<li>Na koniec zabiegu załóż miękką soczewkę kontaktową bandażową do czasu pełnej reepitelializacji. Reepitelializacja trwa zazwyczaj 3 dni.</li>
	<li>Zalec przeciwbólowe, takie jak paracetamol (500 mg) z kodeiną (30 mg), w dawce 6 tabletek na dobę.</li>
	<li>Po reepitelializacji rogówki rozpocznij miejscową terapię sterydami (miejscowy deksametazon 1 mg/ml) i kontynuuj ją przez 3-4 tygodnie. Dodatkowo stosuj sztuczne łzy 4 razy dziennie przez 1 miesiąc.</li>
</ol>
3. Jontoforeza (I-CXL)
1. Przygotowanie pacjenta
<ol>
	<li>Na 5 dni przed operacją podawaj 1% krople pilokarpiny dwa razy dziennie do oka podlegającego zabiegowi.</li>
	<li>W sali operacyjnej, w warunkach aseptycznych, ułóż pacjenta na plecach.</li>
	<li>Zastosuj znieczulenie miejscowe, np. oksybuprokainę 0,4%.</li>
	<li>Dwie razy oczyść oko oraz skórę wokół oka antyseptykiem jodowym.</li>
	<li>Użyj rozwieraka powiek, aby utrzymać oko otwarte.</li>
</ol>
2. Ustaw urządzenie do jontoforezy.
<ol>
	<li>Przyklej pasywną elektrodę do czoła, poniżej pola operacyjnego.</li>
	<li>Przyłóż elektrodę aktywną w postaci pierścienia ssącego do otwartego oka. Przed zwolnieniem ssania wycentruj pierścień ssący na obwodzie rogówki.</li>
</ol>
<img alt="Przygotowanie do zabiegu chirurgicznego z wprowadzeniem cewnika i sprzętem monitorującym drenaż płynów." src="/files/ftp_upload/53119/53119fig2.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 2">
Rysunek 2. Urządzenie do jontoforezy. Elektrodę pasywną umieszcza się na czole poniżej pola operacyjnego, a elektrodę aktywną w postaci pierścienia ssącego przykładamy do otwartego oka. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig2large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
3. Aplikacja ryboflawiny
<ol>
	<li>Napełnić pierścień ssący hipoosmolarnej 0,1% ryboflaviną bez dekstranu.</li>
</ol>
<img alt="Przygotowanie do operacji zaćmy, procedura wszczepienia soczewki wewnątrzgałkowej, technika operacyjna w okulistyce." src="/files/ftp_upload/53119/53119fig3.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rysunek 3">
Rysunek 3. Aplikacja ryboflawiny w I-CXL. Pierścień ssący zostaje wypełniony hipoosmolarną 0,1% ryboflawiną bez dekstranu. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig3large.jpg" target="_blank">Aby wyświetlić większą wersję tego rysunku, kliknij tutaj.</a>
<ol start="2">
	<li>Ustaw natężenie prądu elektrycznego na 0.2 mA i stopniowo zwiększaj je do 1.0 mA, tak aby całkowity czas jontoforezy wynosił 5 min (Rycina 4).</li>
</ol>
<img alt="Urządzenie do jonforezy wyświetlające aktualne ustawienia dla eksperymentu z transdermalnym dostarczaniem leku." src="/files/ftp_upload/53119/53119fig4.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 4">
Rysunek 4. Urządzenie do jontoforezy w celu penetracji ryboflawiny. Prąd elektryczny wynosi początkowo 0,2 mA i jest stopniowo zwiększany do 1,0 mA. Całkowity czas jontoforezy wynosi 5 minut. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig4large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
4. Naświetlanie UVA
<ol>
	<li>Naświetlaj rogówkę światłem UVA o długości fali 370 nm przy natężeniu promieniowania 10 mW/cm2 (dawka powierzchniowa 5,4 J/cm2) i odległości roboczej 5 cm przez 9 min.</li>
	<li>W trakcie naświetlania, w razie potrzeby, zastosuj miejscowe znieczulenie (oksybuproka&amp;#239;na 0,4%).</li>
</ol>
5. Zakończenie zabiegu
<ol>
	<li>Podaj krople z antybiotykiem (tobramycyna 0.3%) oraz sztuczne łzy (krople z hialuronianem 0.18%) do oka operowanego.</li>
	<li>Zaleć leki przeciwbólowe, takie jak paracetamol (500 mg) z kodeiną (30 mg), w dawce 6 tabletek na dobę.</li>
	<li>Po operacji wprowadź miejscową terapię sterydami (miejscowy deksametazon 1mg/ml) i kontynuuj ją przez 3-4 tygodnie. Dodatkowo stosuj sztuczne łzy 4 razy dziennie przez 1 miesiąc.</li>
</ol>

<ol><li>Rabinowitz, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Surv+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Keratoconus.</a> Surv Ophthalmol. 42 (4), 297-319 (1998).</li>
<li>Tuori, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immunohistochemical+composition+of+corneal+basement+membrane+in+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">The immunohistochemical composition of corneal basement membrane in keratoconus.</a> Curr Eye Res. 16 (8), 792-801 (1997).</li>
<li>Wollensak, G., Spoerl, E., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Riboflavin%2Fultraviolet-A-induced+collagen+cross-linking+for+the+treatment+of+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Riboflavin/ultraviolet-A-induced collagen cross-linking for the treatment of keratoconus.</a> Am J Ophthalmol. 135 (5), 620-627 (2003).</li>
<li>Raiskup-Wolf, F., Hoyer, A., Spoerl, E., Pillunat, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagen+cross-linking+with+riboflavin+and+ultraviolet-A+light+in+keratoconus%3A+long-term+results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Collagen cross-linking with riboflavin and ultraviolet-A light in keratoconus: long-term results.</a> J Cataract Refract Surg. 34 (5), 796-801 (2008).</li>
<li>Vinciguerra, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((topographic%2C+tomographic%2C+and+aberrometric+analysis+of+keratoconic+eyes+undergoing+corneal+cross-linking%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">topographic, tomographic, and aberrometric analysis of keratoconic eyes undergoing corneal cross-linking.</a> Ophthalmology. 116 (3), 369-378 (2009).</li>
<li>Caporossi, A., Mazzotta, C., Baiocchi, S., Caporossi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+results+of+riboflavin+ultraviolet-A+corneal+collagen+cross-linking+for+keratoconus+in+Italy%3A+the+Siena+eye+cross+study%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Long-term results of riboflavin ultraviolet-A corneal collagen cross-linking for keratoconus in Italy: the Siena eye cross study.</a> Am J Ophthalmol. 149 (4), 585-593 (2010).</li>
<li>Greenstein, S. A., Fry, K. L., Hersh, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+topography+indices+after+corneal+collagen+cross-linking+for+keratoconus+and+corneal+ectasia%3A+one-year+results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Corneal topography indices after corneal collagen cross-linking for keratoconus and corneal ectasia: one-year results.</a> J Cataract Refract Surg. 37 (7), 1282-1290 (2011).</li>
<li>Ghanem, R. C., Santhiago, M. R., Berti, T., Netto, M. V., Ghanem, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topographic+corneal+wavefront%2C+and+refractive+outcomes+2+years+after+collagen+cross-linking+for+progressive+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Topographic corneal wavefront, and refractive outcomes 2 years after collagen cross-linking for progressive keratoconus.</a> Cornea. 33 (1), 43-48 (2014).</li>
<li>Koller, T., Mrochen, M., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complication+and+failure+rates+after+corneal+cross-linking%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Complication and failure rates after corneal cross-linking.</a> J Cataract Refract Surg. 35 (8), 1358-1362 (2009).</li>
<li>Rocha, K. M., Ramos-Esteban, J. C., Qian, Y., Herekar, S., Krueger, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+riboflavin-UVA+cross-linking+and+%E2%80%9Cflash-linking%E2%80%9D+using+surface+wave+elastometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Comparative study of riboflavin-UVA cross-linking and “flash-linking” using surface wave elastometry.</a> J Refract Surg. 24 (7), 748-751 (2008).</li>
<li>Caporossi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transepithelial+corneal+collagen+crosslinking+for+progressive+keratoconus%3A+24-month+clinical+results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Transepithelial corneal collagen crosslinking for progressive keratoconus: 24-month clinical results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (8), 1157-1163 (2013).</li>
<li>Bikbova, G., Bikbov, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transepithelial+corneal+collagen+cross-linking+by+iontophoresis+of+riboflavin%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Transepithelial corneal collagen cross-linking by iontophoresis of riboflavin.</a> Acta Ophthalmol. 92 (1), 30-34 (2014).</li>
<li>Efron, N., Hollingsworth, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+perspectives+on+keratoconus+as+revealed+by+corneal+confocal+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Optom%22%5BJournal%5D)">New perspectives on keratoconus as revealed by corneal confocal microscopy.</a> Clin Exp Optom. 91 (1), 34-55 (2008).</li>
<li>Patel, D. V., McGhee, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+corneal+sub-basal+nerve+plexus+in+keratoconus+by+in+vivo+laser+scanning+confocal+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Mapping the corneal sub-basal nerve plexus in keratoconus by in vivo laser scanning confocal microscopy.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 47 (4), 1348-1351 (2006).</li>
<li>Ku, J. Y., Niederer, R. L., Patel, D. V., Sherwin, T., McGhee, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+scanning+in+vivo+confocal+analysis+of+keratocyte+density+in+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Laser scanning in vivo confocal analysis of keratocyte density in keratoconus.</a> Ophthalmology. 115 (5), 845-850 (2008).</li>
<li>Mazzotta, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+healing+after+riboflavin+ultraviolet-A+collagen+cross-linking+determined+by+confocal+laser+scanning+microscopy+in+vivo%3A+early+and+late+modifications%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Corneal healing after riboflavin ultraviolet-A collagen cross-linking determined by confocal laser scanning microscopy in vivo: early and late modifications.</a> Am J Ophthalmol. 146 (4), 527-533 (2008).</li>
<li>Seiler, T., Hafezi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+cross-linking-induced+stromal+demarcation+line%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Corneal cross-linking-induced stromal demarcation line.</a> Cornea. 25 (9), 1057-1059 (2006).</li>
<li>Doors, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+anterior+segment+optical+coherence+tomography+to+study+corneal+changes+after+collagen+cross-linking%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Use of anterior segment optical coherence tomography to study corneal changes after collagen cross-linking.</a> Am J Ophthalmol. 148 (6), 844-851 (2009).</li>
<li>Mazzotta, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+progressive+keratoconus+by+riboflavin-UVA-induced+cross-linking+of+corneal+collagen%3A+ultrastructural+analysis+by+Heidelberg+Retinal+Tomograph+II+in+vivo+confocal+microscopy+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Treatment of progressive keratoconus by riboflavin-UVA-induced cross-linking of corneal collagen: ultrastructural analysis by Heidelberg Retinal Tomograph II in vivo confocal microscopy in humans.</a> Cornea. 26 (4), 390-397 (2007).</li>
<li>Kymionis, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+the+corneal+collagen+cross-linking+demarcation+line+using+confocal+microscopy+and+anterior+segment+optical+coherence+tomography+in+keratoconic+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Correlation of the corneal collagen cross-linking demarcation line using confocal microscopy and anterior segment optical coherence tomography in keratoconic patients.</a> Am J Ophthalmol. 157 (1), 110-115 (2014).</li>
<li>Yam, J. C., Chan, C. W., Cheng, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+collagen+cross-linking+demarcation+line+depth+assessed+by+Visante+OCT+After+CXL+for+keratoconus+and+corneal+ectasia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Corneal collagen cross-linking demarcation line depth assessed by Visante OCT After CXL for keratoconus and corneal ectasia.</a> J Refract Surg. 28 (7), 475-481 (2012).</li>
<li>Jordan, C., Patel, D. V., Abeysekera, N., McGhee, C. .N. . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+confocal+microscopy+analyses+of+corneal+microstructural+changes+in+a+prospective+study+of+collagen+cross-linking+in+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">In vivo confocal microscopy analyses of corneal microstructural changes in a prospective study of collagen cross-linking in keratoconus.</a> Ophthalmology. 121 (2), 469-474 (2014).</li>
<li>Touboul, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+confocal+microscopy+following+conventional%2C+transepithelial%2C+and+accelerated+corneal+collagen+cross-linking+procedures+for+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Corneal confocal microscopy following conventional, transepithelial, and accelerated corneal collagen cross-linking procedures for keratoconus.</a> J Refract Surg. 28 (11), 769-776 (2012).</li>
<li>Bouheraoua, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+coherence+tomography+and+confocal+microscopy+following+three+different+protocols+of+corneal+collagen-crosslinking+in+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Optical coherence tomography and confocal microscopy following three different protocols of corneal collagen-crosslinking in keratoconus.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55 (11), 7601-7609 (2014).</li>
<li>Hafezi, F., Mrochen, M., Iseli, H. P., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagen+crosslinking+with+ultraviolet-A+and+hypoosmolar+riboflavin+solution+in+thin+corneas%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Collagen crosslinking with ultraviolet-A and hypoosmolar riboflavin solution in thin corneas.</a> J Cataract Refract Surg. 35 (4), 621-624 (2009).</li>
<li>Cınar, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+accelerated+and+conventional+corneal+collagen+cross-linking+for+progressive+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Cutan+Ocul+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Comparison of accelerated and conventional corneal collagen cross-linking for progressive keratoconus.</a> Cutan Ocul Toxicol. 33 (3), 218-222 (2013).</li>
<li>Cingü, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+corneal+endothelial+changes+following+accelerated+collagen+cross-linking+for+the+treatment+of+progressive+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Cutan+Ocul+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Transient corneal endothelial changes following accelerated collagen cross-linking for the treatment of progressive keratoconus.</a> Cutan Ocul Toxicol. 33 (2), 127-131 (2013).</li>
<li>Spoerl, E., Mrochen, M., Sliney, D., Trokel, S., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+of+UVA-riboflavin+cross-linking+of+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Safety of UVA-riboflavin cross-linking of the cornea.</a> Cornea. 26 (4), 385-389 (2007).</li>
<li>Gokhale, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+endothelial+damage+after+collagen+cross-linking+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Corneal endothelial damage after collagen cross-linking treatment.</a> Cornea. 30 (12), 1495-1498 (2011).</li>
<li>Rootman, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+and+safety+of+transcorneal+iontophoresis+of+tobramycin+in+the+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics and safety of transcorneal iontophoresis of tobramycin in the rabbit.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 29 (9), 1397-1401 (1998).</li>
<li>Vinciguerra, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transepithelial+iontophoresis+corneal+collagen+cross-linking+for+progressive+keratoconus%3A+initial+clinical+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Transepithelial iontophoresis corneal collagen cross-linking for progressive keratoconus: initial clinical outcomes.</a> J Refract Surg. 30 (11), 746-753 (2014).</li>
<li>Caporossi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Riboflavin-UVA-induced+corneal+collagen+cross-linking+in+pediatric+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Riboflavin-UVA-induced corneal collagen cross-linking in pediatric patients.</a> Cornea. 31 (3), 227-231 (2012).</li>
<li>Buzzonetti, L., Petrocelli, G., Valente, P., Larossi, G., Ardia, R., Petroni, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Iontophoretic+transepithelial+corneal+cross-linking+to+halt+keratoconus+in+pediatric+cases%3A+15-month+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Iontophoretic transepithelial corneal cross-linking to halt keratoconus in pediatric cases: 15-month follow-up.</a> Cornea. 34 (5), 512-515 (2015).</li>
<li>Baiocchi, S., Mazzotta, C., Cerretani, D., Caporossi, T., Caporossi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+crosslinking%3A+riboflavin+concentration+in+corneal+stroma+exposed+with+and+without+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Corneal crosslinking: riboflavin concentration in corneal stroma exposed with and without epithelium.</a> J Cataract Refract Surg. 35 (5), 893-899 (2009).</li>
<li>Wollensak, G., Iomdina, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+and+histological+changes+after+corneal+crosslinking+with+and+without+epithelial+debridement%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Biomechanical and histological changes after corneal crosslinking with and without epithelial debridement.</a> J Cataract Refract Surg. 35 (3), 540-546 (2009).</li>
<li>Soeters, N., Wisse, R. P., Godefrooij, D. A., Imhof, S. M., Tahzib, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transepithelial+versus+epithelium-off+corneal+cross-linking+for+the+treatment+of+progressive+keratoconus%3A+a+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Transepithelial versus epithelium-off corneal cross-linking for the treatment of progressive keratoconus: a randomized controlled trial.</a> Am J Ophthalmol. 159 (5), 821-828 (2015).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

CXL z wykorzystaniem promieniowania UVA i ryboflawiny jest standardowym sposobem leczenia w celu zatrzymania postępu stożka rogówki. Ryboflawina jest fotouczulaczem, który po napromieniowaniu UVA3 indukuje chemiczne wiązania kowalencyjne (wiązania krzyżowe). W rogówce zjawisko to tworzy wiązania krzyżowe między włókienkami kolagenowymi, które zwiększają sztywność rogówki. Chociaż zjawisko to jest dobrze opisane, do tej pory nie było bezpośrednich dowodów na sieciowanie krzyżowe wewnątrz rogówki. Niemniej jedna...

Stożek rogówki to obustronna i postępująca ektazja rogówki, zwykle zgłaszana u 1 na 2 000 w populacjiogólnej1, powodująca modyfikację kształtu rogówki, a tym samym pogorszenie widzenia2. Stożek rogówki występuje zwykle we wczesnym okresie dojrzewania i postępuje do trzeciej do czwartej dekady życia, kiedy choroba zazwyczaj ma tendencję do stabilizacji, chociaż postęp może być zmienny przez całe życie pacjenta. Poprzez zatrzymanie postępu stożka rogówki, sieciowanie ma na celu odroczenie lub uniknięcie keratoplastyki.
Do tej pory, jedynym skutecznym i bezpiecznym sposobem leczenia postępującego stożka rogówki, potwierdzonym w badaniach klinicznych, jest konwencjonalny protokół sieciowania kolagenu rogówki (C-CXL), który ma na celu zwiększenie sztywności, a tym samym zatrzymanie postępu stożka rogówki3-8. W celu skrócenia czasu operacji i innych możliwych czynników ryzyka C-CXL, takich jak zakaźne zapalenie rogówki lub zmętnienie zrębu9, opisano kilka ulepszonych protokołów. Po pierwsze, w przyspieszonym CXL (A-CXL) wyższe natężenie promieniowania UVA jest dostarczane do rogówki w krótszym czasie10. Po drugie, aby uniknąć konieczności oczyszczania nabłonka, zastosowano podejścia transnabłonkowe. Niestety, mają one ograniczony sukces w porównaniu z konwencjonalnym protokołem11. Najnowszą metodą transnabłonkową dostarczania ryboflawiny do rogówki podczas CXL jest jonoforeza (I-CXL), ale nie przeprowadzono jeszcze rygorystycznej oceny tego leczenia12. Jonoforeza to nieinwazyjna technika, w której stosuje się niewielki prąd elektryczny w celu poprawy przenikania zjonizowanego leku przez tkankę. W CXL przez jonoforezę ryboflawina jest jonizowana, aby przeniknąć do rogówki przez nabłonek.
Mikroskopia konfokalna in vivo (IVCM) to metoda obrazowania rogówki, która może uwydatnić zmiany komórkowe nieprawidłowej rogówki w chorobach takich jak stożek rogówki13. Rzeczywiście, IVCM wykazał zmiany we wszystkich warstwach rogówki w stożku rogówki ze szczególnym zmniejszeniem gęstości podpodstawnego splotu nerwowego i keratocytów zrębu13-15. Ponadto IVCM okazał się bardzo wygodny do analizy mikrostrukturalnej rogówki po C-CXL16.
Linia demarkacyjna rogówki jest opisana jako linia hiperrefleksyjna widoczna w przedniej części optycznej koherentnej tomografii (AS OCT) 1 miesiąc po C-CXL na głębokości 300 μm17,18. IVCM po C-CXL dostarcza informacji o zmianach strukturalnych rogówki, w tym o braku keratocytów rogówki do głębokości 300 μm. Głębokość tej strefy bezkomórkowej, jak również głębokość linii demarkacyjnej w zrębie rogówki ujawniona na AS OCT, wydaje się być związana z efektywną głębokością leczenia CXL19, a pomiar głębokości linii demarkacyjnej rogówki w AS OCT 1 miesiąc po CXL został zaproponowany jako skuteczna metoda kliniczna oceny skuteczności CXL18.
W niniejszym badaniu badamy skuteczność trzech różnych protokołów sieciowania kolagenu rogówki (konwencjonalnego, przyspieszonego i jonoforezy) za pomocą pomiaru linii demarkacyjnej zrębu rogówki za pomocą AS OCT i mikroskopii konfokalnej. Ponadto wykorzystaliśmy IVCM do ilościowej analizy zmian mikrostruktury rogówki po trzech zabiegach.

<table><tbody><tr><td></td><td></td><td>Ryboflawina&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; Numer</td><td></td>produktu</tr><tr><td>C-CXL</td><td>Sooft SPA, Montegiorgio, Włochy</td><td>Ricrolin&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 468465-6</td><td></td></tr><tr><td>A-CXL</td><td>Avedro Inc, Waltham, Massachusetts</td><td>VibeX&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 520-01863-006</td><td></td></tr><tr><td>CXL</td><td>Sooft SPA, Montegiorgio, Włochy</td><td>Ricrolin+&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 975481-6</td><td>Elektroda pasywna: PROTENS ELITE 4848LE/ Elektroda aktywna: IONTOFOR CXL</td></tr><tr><td></td><td></td><td>UVA Maszyna</td><td></td></tr><tr><td>X-Vega</td><td></td><td></td><td>UVA: 3 mW/cm2 30 min</td></tr><tr><td>KXL System</td><td></td><td></td><td>UVA: 30 mW/cm2 10 min</td></tr><tr><td>X-Vega</td><td></td><td></td><td>UVA: 10 mW/cm2 9 min</td></tr></tbody></table>

trzy różne protokoły sieciowania kolagenu rogówkowego w stożku rogówki: konwencjonalny, przyspieszony i jonoforeza

Three Different Protocols of Corneal Collagen Crosslinking in Keratoconus: Conventional, Accelerated and Iontophoresis

Stożek rogówki to obustronna i postępująca ektazja rogówki. Aby spowolnić jego postęp, niedawno wprowadzono sieciowanie kolagenu rogówkowego (CXL) jako skuteczną opcję leczenia. W naukach biologicznych i chemicznych sieciowanie odnosi się do nowych wiązań chemicznych powstających między cząsteczkami reaktywnymi. Stąd celem kolagenu rogówkowego CXL jest syntetyczne zwiększenie tworzenia wiązań krzyżowych między włókienkami kolagenowymi w zrębie rogówki. Pomimo faktu, że skuteczność konwencjonalnego protokołu CXL (C-CXL) została już wykazana w kilku badaniach klinicznych, może on skorzystać na skróceniu czasu trwania zabiegu i usunięciu nabłonka rogówki. W związku z tym, aby zapewnić spójną ocenę dwóch nowych i zoptymalizowanych protokołów CXL, badaliśmy pacjentów ze stożkiem rogówki, którzy przeszli jedną z trzech metod leczenia CXL: jonoforezę (I-CXL), przyspieszoną CXL (A-CXL) i konwencjonalną CXL (C-CXL). A-CXL to 6-krotnie szybsza procedura CXL wykorzystująca dziesięciokrotnie wyższe natężenie promieniowania UVA, ale nadal obejmująca usunięcie nabłonka. Jonoforeza to nieinwazyjna technika transnabłonkowa, w której stosuje się niewielki prąd elektryczny w celu poprawy penetracji ryboflawiny przez rogówkę. Korzystając z optycznej koherentnej tomografii przedniego odcinka (AS OCT) i mikroskopii konfokalnej in vivo (IVCM), dochodzimy do wniosku, że jeśli chodzi o głębokość penetracji leczenia, konwencjonalny protokół CXL pozostaje standardem w leczeniu postępującego stożka rogówki. Przyspieszona CXL wydaje się być szybką, skuteczną i bezpieczną alternatywą w leczeniu cienkich rogówek. Zastosowanie jonoforezy jest nadal badane i powinno być rozważane z większą ostrożnością.

Linia demarkacyjna rogówki była widoczna w badaniu AS OCT w 92% przypadków na średniej głębokości 301.6 µm (SD, 73.6)
<img alt="Schemat obrazowania rogówki; optyczna koherentna tomografia; pomiary do analizy medycznej." src="/files/ftp_upload/53119/53119fig5.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rysunek 5"> 
Rysunek 5. Linia demarkacyjna po C-CXL. Skan przedniego odcinka rogówki wykonany za pomocą optycznej koherentnej tomogr...

Sieciowanie kolagenu rogówki (CXL) jest obecnie jedynym dostępnym leczeniem zachowawczym, które hamuje postęp stożka rogówki poprzez poprawę sztywności biomechanicznej zrębu rogówki. Celem pracy jest zwrócenie uwagi na metody działania trzech różnych protokołów CXL: konwencjonalnego CXL (C-CXL), przyspieszonego CXL (A-CXL) i jonoforezy CXL (I-CXL).

Trzy różne protokoły sieciowania kolagenu rogówkowego w stożku rogówki: konwencjonalny, przyspieszony i jonoforeza

Keratoconus is a bilateral and progressive corneal ectasia. In order to slow down its progression, corneal collagen cross-linking (CXL) has recently been ...

Ogólnym celem niniejszej procedury jest przedstawienie zalet i głównych wad trzech różnych protokołów sieciowania kolagenu rogówki: sieciowania konwencjonalnego, sieciowania przyspieszonego oraz sieciowania z wykorzystaniem jontoforezy. Metoda ta może pomóc w udzieleniu odpowiedzi na kluczowe pytania z zakresu leczenia keratoconiczności, takie jak to, który protokół sieciowania kolagenu rogówki jest skuteczniejszy w hamowaniu progresji tej ektazji rogówki. Główną zaletą tej techniki jest porównanie przebiegu i wyników tych trzech różnych protokołów sieciowania kolagenu rogówki w celu podkreślenia użyteczności każdego z nich w przeprowadzaniu konwencjonalnego sieciowania kolagenu rogówki (CCXL).Po pięciodniowym leczeniu oka 1% pilokarpiną, zgodnie z protokołem tekstowym w sali operacyjnej, w warunkach aseptycznych, poproś pacjenta o położenie się na plecach, a następnie podaj znieczulenie miejscowe, np. 0,4% oksybutanopropainę. Aby usunąć nabłonek, użyj okrągłego znacznika rogówki do zaznaczenia centralnych dziewięciu milimetrów rogówki za pomocą tępej szpatułki. Usuń centralne siedem do dziewięciu milimetrów nabłonka rogówki poprzez mechaniczne oczyszczenie.Następnie przez kolejne

three-different-protocols-corneal-collagen-crosslinking-keratoconus

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Przeszczep śródbłonkowy rogówki jest techniką chirurgiczną stosowaną w leczeniu chorób tylnej części rogówki. Disekcja za pomocą mechanicznego mikrokeratomu w celu przygotowania tkanki pozwala na uzyskanie cieńszych, bardziej symetrycznych graftów, z mniejszą utratą komórek śródbłonka oraz lepszymi efektami terapeutycznymi. Disekcje mogą być przeprowadzane w banku tkanek oka przed zabiegiem transplantacji rogówki.

Przygotowanie tkanki rogówki od dawcy do keratoplastyki śródbłonowej

Przedstawiamy technikę wytwarzania mikrokieszeni w membranach elektroprzędzonych, w których można badać zachowanie komórek. W szczególności opisujemy połączenie mikrostereolitografii i elektroprzędzenia w celu produkcji urządzeń z biomateriału rogówki PLGA (poli(laktyd-ko-glikolid)) wyposażonych w mikrocechy.

Połączenie mikrostereolitografii i elektroprzędzenia w celu wytworzenia membran wyposażonych we wnęki do regeneracji rogówki

W przeszczepie śródbłonka proponuje się całkowicie laserową procedurę. Technika chirurgiczna opiera się na wykorzystaniu lasera femtosekundowego do przygotowania tkanki dawcy. Następnie stosuje się technikę spawania laserowego, aby zabezpieczyć śródbłonek dawcy we właściwej pozycji.

"Całkowicie laserowy" przeszczep śródbłonka

Pokazujemy wpływ sieciowania twardówki z ryboflawiną i UVA na osiowo wydłużone oko królika. Wydłużenie osiowe wywołano u 13-dniowych królików nowozelandzkich (samca i samicy) poprzez zszycie ich prawych powiek (tarsorrhaphy).

Sieciowanie twardówki za pomocą ryboflawiny i promieniowania ultrafioletowego-A w celu zapobiegania krótkowzroczności osiowej w modelu królika

Pierwotna hodowla bydlęcych komórek śródbłonka rogówki została wykorzystana do zbadania mechanizmu przejścia śródbłonka rogówki na mezenchym. Ponadto wykorzystano model kriouszkodzenia śródbłonka rogówki szczura, aby zademonstrować przejście śródbłonka rogówki i mezenchymów in vivo.

Modele in vitro i in vivo do badania przejścia śródbłonka rogówki i mezenchymów

Ten protokół opisuje nowatorski trójwymiarowy model in vitro, w którym komórki zrębu rogówki i zróżnicowane komórki neuronalne są hodowane razem, aby pomóc w badaniu i zrozumieniu interakcji dwóch typów komórek.

Inżynieria tkanki rogówki: model in vitro interakcji zrębu-nerw ludzkiej rogówki

Ten protokół opisuje techniki oceny chemicznego sieciowania twardówki królika za pomocą obrazowania drugiej generacji harmonicznej i różnicowa kalorymetria skaningowa.

Sygnały generacji drugiej harmonicznej w twardówce królika jako narzędzie do oceny terapeutycznego sieciowania tkanek (TXL) w przypadku krótkowzroczności

Opisujemy użycie pełnej koherentnej mikroskopii optycznej jako metody wysokiej jakości oceny zrębu dawcy rogówki. Protokół ten może być stosowany do identyfikacji cech wskazujących na zdrowie lub chorobę i ma na celu poprawę badań przesiewowych i selekcji tkanek dawcy, a tym samym wyników keratoplastyki.

Pełnopolowa optyczna mikroskopia koherentna do histologicznej analizy cech zrębu w przeszczepach rogówki

Opisano protokół dla modelu hodowli narządów rogówki ex vivo, przydatnego do badań nad gojeniem się ran. Ten system modelowy może być używany do oceny działania środków wspomagających regeneracyjne gojenie lub toksyczność leków w zorganizowanym środowisku wielokomórkowym 3D.

Model hodowli narządów rogówki ex vivo do badań nad gojeniem się ran

Tutaj proponujemy trzy różne metody uszkadzania włókien czuciowych unerwiających rogówkę. Metody te ułatwiają badanie regeneracji aksonów u myszy. Te trzy metody, które można dostosować do innych modeli zwierzęcych, są idealne do badania fizjologii i regeneracji unerwienia rogówki.

Trzy strategie wywoływania neurotroficznego zapalenia rogówki i regeneracji nerwów w rogówce myszy

Przedstawiono protokół powtarzalny do przygotowania, wzbogacania i zastosowania in situ żelu żelatynowo-ryboflawinowego krzyżowalnego światłem niebieskim do naprawy ran stromalnych rogówki u królików, w tym kroki proceduralne dotyczące postępowania chirurgicznego, częściowej tarzoraphii i opieki pooperacyjnej.

Produkcja i chirurgiczne zastosowanie wzbogaconych żeli żelatynowych przekształconych światłem i riboflawiny do naprawy ran rogówki u królików

Poznaj trzy protokoły sieciowania kolagenu rogówki: konwencjonalny, przyspieszony i jonoforezę. Porównaj ich skuteczność w leczeniu stożka rogówki i zatrzymywaniu progresji tej choroby.

Trzy różne protokoły sieciowania kolagenu rogówkowego w stożku rogówki: konwencjonalny, przyspieszony i jonoforeza

Przeglądaj więcej filmów