Izolacja i charakterystyka mysich oocytów antralnych na podstawie organizacji chromatyny jąderkowej

Ogólnym celem tej procedury jest wyszczególnienie wszystkich kroków niezbędnych do scharakteryzowania oocytów antralnych myszy na podstawie ich organizacji chromatyny, zgodnie z ich zdolnością do pełnego podtrzymania przyszłego rozwoju embrionalnego. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania z dziedziny biologii rozwoju, takie jak sposób rozróżnienia i wyizolowania dwóch różnych rodzajów ooyctes antralnych, SN, jąderka otoczonego i NSN, jąderka nieotoczonego, znajdującego się w przedziale antralnym jajnika ssaków. Aby pobrać jajniki, zacznij od wstrzyknięcia trzy- do sześciotygodniowych samic myszy IP 2,5 jednostki międzynarodowej gonadotropiny surowicy ciężarnej klaczy.

Dwa dni później, około godziny przed zbiorami, napełnij jedną sterylną szalkę Petriego pożywką M2 i dodaj kilka 20 kropli pożywki M2 do drugiej szalki Petriego, pokrywając każdą kroplę 1,5 mililitra oleju mineralnego. Następnie przenieś wszystkie szalki Petriego do inkubatora z 5% dwutlenkiem węgla o temperaturze 37 stopni Celsjusza, aby umożliwić zrównoważenie pożywki. Następnie za pomocą sterylnych nożyczek preparacyjnych wykonaj nacięcie w skórze pokrywającej ścianę brzucha, a następnie nacięcie w otrzewnej pierwszej myszy, której wstrzyknięto hormon