-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

PL

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

pl_PL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
Badania przesiewowe wielu enzymów przy użyciu wysokoprzepustowego systemu badań przesiewowych enz...
Badania przesiewowe wielu enzymów przy użyciu wysokoprzepustowego systemu badań przesiewowych enz...
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Multi-enzyme Screening Using a High-throughput Genetic Enzyme Screening System

Badania przesiewowe wielu enzymów przy użyciu wysokoprzepustowego systemu badań przesiewowych enzymów genetycznych

Full Text
9,350 Views
08:10 min
August 8, 2016

DOI: 10.3791/54059-v

Haseong Kim1, Kil Koang Kwon1, Wonjae Seong1, Seung-Goo Lee1,2

1Synthetic Biology & Bioengineering Research Center,Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, 2Biosystems and Bioengineering Program,University of Science and Technology, Daejeon, South Korea

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study introduces a high-throughput screening method utilizing a universal genetic enzyme screening system capable of assessing over 200 enzymes. The system identifies various enzymes, including lipase, cellulase, and alkaline phosphatase, by altering the substrate used.

Key Study Components

Area of Science

  • Enzyme engineering
  • Microbial biotechnology
  • Metagenomic screening

Background

  • High-throughput screening is essential for evaluating enzyme activity.
  • Traditional methods often require separate systems for different enzymes.
  • This study aims to streamline the screening process.
  • Utilizing a single system can enhance efficiency in enzyme research.

Purpose of Study

  • To develop a method for screening multiple enzymes simultaneously.
  • To facilitate research in enzyme engineering and metagenomics.
  • To provide a more efficient alternative to conventional screening techniques.

Methods Used

  • Development of a genetic enzyme screening system.
  • Utilization of a phenylene compound and GFP reporter for detection.
  • Screening of enzymes by changing the substrate provided.
  • Measurement of fluorescence to assess enzyme activity.

Main Results

  • Successful identification of lipase, cellulase, and alkaline phosphatase.
  • Demonstrated the versatility of the screening system.
  • Showed that the method can be applied to various enzymes.
  • Validated the effectiveness of using a single system for multiple enzymes.

Conclusions

  • The developed method significantly improves enzyme screening efficiency.
  • This approach can advance research in enzyme engineering.
  • Future applications may include broader metagenomic studies.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of this screening method?
The main advantage is the ability to screen multiple enzymes using a single system, enhancing efficiency.
How does the genetic enzyme screening system work?
It uses a phenylene compound that activates a GFP reporter upon enzyme activity, allowing for easy detection.
Which enzymes were identified in this study?
The study identified lipase, cellulase, and alkaline phosphatase.
What substrates were used in the screening?
The substrates included p-nitrophenyl acetate, p-nitrophenyl-β-D-cellobioside, and phenyl phosphate.
Who demonstrated the procedure?
Kil Koang Kwon, a graduate student in the laboratory, demonstrated the procedure.

Ta praca przedstawia metodę wysokoprzepustowych badań przesiewowych przy użyciu uniwersalnego systemu badań przesiewowych enzymów genetycznych, który teoretycznie można zastosować do ponad 200 enzymów. W tym przypadku pojedynczy system przesiewowy identyfikuje trzy różne enzymy (lipazę, celulazę i fosfatazę alkaliczną), po prostu zmieniając zastosowany substrat (octan p-nitrofenylu, p-nitrofenylo-β-D-celobiozyd i fosforan fenylu).

Ogólnym celem tej metodologii jest ocena wielu enzymów przy użyciu jednego systemu badań przesiewowych o wysokiej przepustowości. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie mikroorganizmów i bioinżynierii dotyczące metagenomicznych badań przesiewowych i inżynierii enzymatycznej. Opracowaliśmy system badań przesiewowych enzymów genetycznych, który składa się z mutanta MPL reagującego na związek fenylenu i jego dalszego reportera GFP.

Gdy dowolny gen metagenomiczny wykaże aktywność enzymatyczną, która nas interesuje, reagując z dostarczonym substratem, związek fenylenu produktu reakcji aktywuje mutanta Dmp i wyzwala ekspresję reporterową GFP, którą można łatwo wychwycić za pomocą miernika fluorescencji. Główną zaletą tej techniki jest to, że w przeciwieństwie do konwencjonalnych technik przesiewowych, ta pojedyncza metoda ma zastosowanie do badań przesiewowych wielu rodzajów różnych enzymów przy użyciu odpowiedniego substratu. Tę procedurę zademonstruje Kil Koang Kwon, doktorant w naszym laboratorium.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Słowa kluczowe: Wieloenzymatyczne badania przesiewowe Wysokoprzepustowy genetyczny system przesiewowych enzymów Badania metagenomiczne Inżynieria enzymatyczna Mutant MPL Związek fenylenu GFP Reporter Aktywność enzymu Miernik fluorescencji Biblioteka metagenomiczna Wektor Fosmid Zestaw produkcyjny biblioteki Fosmid DNA PGESS(E135K) Wyniki fałszywie dodatnie Rosół lizogenianowy Ampicylina Chloramfenikol Maszyna FACS PBS Obszar rozproszenia w skali logarytmicznej do przodu Obszar rozproszony po stronie w skali logarytmicznej Liczba komórek Histogram obszaru FITC w skali logarytmicznej

Related Videos

Wysokoprzepustowe badanie przesiewowe aktywności celulazy biogórniczej z bibliotek metagenomicznych

10:21

Wysokoprzepustowe badanie przesiewowe aktywności celulazy biogórniczej z bibliotek metagenomicznych

Related Videos

16.5K Views

Wysokoprzepustowe badanie przesiewowe nadekspresji plazmidu drożdży

08:57

Wysokoprzepustowe badanie przesiewowe nadekspresji plazmidu drożdży

Related Videos

16.9K Views

Wysokoprzepustowe badania przesiewowe aktywności endoglukanazy grzybowej w Escherichia coli

06:16

Wysokoprzepustowe badania przesiewowe aktywności endoglukanazy grzybowej w Escherichia coli

Related Videos

21.2K Views

Wykrywanie ekspresji docelowych enzymów w genetycznie modyfikowanych komórkach bakteryjnych

03:01

Wykrywanie ekspresji docelowych enzymów w genetycznie modyfikowanych komórkach bakteryjnych

Related Videos

225 Views

Test przesiewowy enzymów na bazie hydrożelu polimerowego chromogenicznego: wysokoprzepustowa metoda badania przesiewowego enzymów aktywnych węglowodanami przy użyciu substratów syntetycznych

03:49

Test przesiewowy enzymów na bazie hydrożelu polimerowego chromogenicznego: wysokoprzepustowa metoda badania przesiewowego enzymów aktywnych węglowodanami przy użyciu substratów syntetycznych

Related Videos

714 Views

Wysokoprzepustowe funkcjonalne badania przesiewowe przy użyciu domowego testu lucyferazy o podwójnym blasku

12:55

Wysokoprzepustowe funkcjonalne badania przesiewowe przy użyciu domowego testu lucyferazy o podwójnym blasku

Related Videos

24.6K Views

Multipleksowana platforma przesiewowa oparta na lucyferazie do badania transdukcji sygnału związanego z rakiem w hodowanych komórkach

10:13

Multipleksowana platforma przesiewowa oparta na lucyferazie do badania transdukcji sygnału związanego z rakiem w hodowanych komórkach

Related Videos

11.7K Views

Wysokoprzepustowe badania przesiewowe pod kątem chemicznych modulatorów genów regulowanych potranskrypcyjnie

09:44

Wysokoprzepustowe badania przesiewowe pod kątem chemicznych modulatorów genów regulowanych potranskrypcyjnie

Related Videos

10K Views

Identyfikacja par kinaza-substrat za pomocą wysokoprzepustowych badań przesiewowych

11:13

Identyfikacja par kinaza-substrat za pomocą wysokoprzepustowych badań przesiewowych

Related Videos

8.6K Views

Wysokoprzepustowe badania przesiewowe enzymów rozkładających węglowodany przy użyciu nowatorskich zestawów do oznaczania nierozpuszczalnych substratów chromogennych

06:51

Wysokoprzepustowe badania przesiewowe enzymów rozkładających węglowodany przy użyciu nowatorskich zestawów do oznaczania nierozpuszczalnych substratów chromogennych

Related Videos

13.8K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code