Produkcja, krystalizacja i oznaczanie struktury C. difficile PPEP-1 metodą mikrosiewu i-SAD

Ogólnym celem tej procedury jest wydajny wzrost pojedynczych kryształów o jakości dyfrakcji sieciowej rekombinowanego białka endopeptydazy proliny proliny lub rPPEP-1. Bez tej metody rPPEP-1 natychmiast wytwarza silnie przerośnięte kryształy, które nie nadają się do analizy dyfrakcji rentgenowskiej. Główną zaletą tej techniki jest to, że duża liczba dobrze uporządkowanych i dobrze dyfrakcjonujących kryształów do oznaczania strukturalnego rPPEP-1 może być wyprodukowana w krótkim czasie i przy ograniczonym wkładzie materiałowym.

Procedura ta wykorzystuje metodę mikromiasta i może być dostosowana do każdego udanego warunku początkowej krystalizacji rPPEP-1, a także jego substratowych kompleksów peptydowych. Metodę tę można dostosować do produkcji dobrze uporządkowanych kryształów praktycznie każdego białka, które daje przerośnięte kryształy. Może być również stosowany w eksperymentach z siewem krzyżowym, wariancji białek lub w eksperymentach kokrystalizacji małych cząsteczek.