-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

PL

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

pl_PL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
Wpływ białek fluorescencyjnych na partnerów fuzji za pomocą testów toksyczności poliglutaminy w d...
Wpływ białek fluorescencyjnych na partnerów fuzji za pomocą testów toksyczności poliglutaminy w d...
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Effect of Fluorescent Proteins on Fusion Partners Using Polyglutamine Toxicity Assays in Yeast

Wpływ białek fluorescencyjnych na partnerów fuzji za pomocą testów toksyczności poliglutaminy w drożdżach

Full Text
7,277 Views
09:23 min
November 28, 2018

DOI: 10.3791/58748-v

Yuwei Jiang1, Sonja Di Gregorio2, Maram B. Albakri1, Martin L. Duennwald1,2, Patrick Lajoie1

1Department of Anatomy and Cell Biology,University of Western Ontario, 2Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Western Ontario

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study evaluates the impact of fluorescent proteins on the aggregation and toxicity of misfolded polyglutamine expansions using yeast as a model system. The protocols developed allow for the rapid and scalable assessment of fluorescent protein behavior and its effects on fusion partners.

Key Study Components

Research Area

  • Fluorescent proteins
  • Polyglutamine toxicity
  • Yeast expression system

Background

  • Understanding of fluorescent protein interactions is crucial for biological research.
  • Polyglutamine-mediated neurodegenerative diseases are linked to these interactions.
  • Techniques for evaluating these interactions efficiently are needed.

Methods Used

  • Cloning fluorescent proteins into yeast expression vectors
  • Assays conducted in yeast expressing polyglutamine repeats
  • Imaging and spectrophotometry for data collection and analysis

Main Results

  • The study illustrates how fluorescent proteins can influence their fusion partners.
  • Significant growth defects were observed with certain polyglutamine expansions.
  • This method offers insights into protein aggregation dynamics.

Conclusions

  • This research demonstrates a novel protocol for evaluating fluorescent protein interactions.
  • It may enhance understanding of protein behavior related to neurodegenerative conditions.

Frequently Asked Questions

What are fluorescent proteins?
Fluorescent proteins are biomolecules that emit light upon excitation, widely used as markers in molecular biology.
How does this method assess toxicity?
The method evaluates the growth and aggregation tendencies of yeast expressing toxic polyglutamine sequences fused to fluorescent proteins.
What is the significance of polyglutamine expansions?
Polyglutamine expansions are associated with several neurodegenerative diseases, making their study crucial for understanding these conditions.
Can this method be applied to other types of proteins?
Yes, while the study focuses on fluorescent proteins, the technique can extend to other genetically encoded tags.
What are the benefits of using yeast in this research?
Yeast provides a simple and scalable platform for studying gene expression and protein interactions.
What technologies were leveraged in this study?
The study utilized cloning, spectrophotometry, and image processing techniques for data collection and analysis.
Who conducted the experiments outlined in the study?
Sonja Di Gregorio, a graduate student at Western University, demonstrated the protocols.

Ten artykuł opisuje protokoły do oceny wpływu białek fluorescencyjnych na agregację i toksyczność nieprawidłowo sfałdowanej ekspansji poliglutaminy w celu szybkiej oceny nowo niescharakteryzowanego białka fluorescencyjnego w kontekście reporterów fluorescencyjnych.

Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie białek fluorescencyjnych, takie jak to, w jaki sposób białka fluorescencyjne mogą wpływać na swoich partnerów fuzyjnych. Główną zaletą tej techniki jest to, że zapewnia szybką i łatwo skalowalną ocenę wpływu białek fluorescencyjnych i ich partnerów w fuzji. Chociaż ta metoda może zapewnić wgląd w zachowanie białek fluorescencyjnych, może być również zastosowana do innych genetycznie kodowanych znaczników.

Procedurę tę zademonstruje również Sonja Di Gregorio, która jest doktorantką na Uniwersytecie Zachodnim. Każde białko fluorescencyjne, które jest testowane tą metodą, jest najpierw klonowane do wektora ekspresji drożdży, który koduje indukowaną galaktozą wersję eksonu HTT znakowanego FLAG, zawierającego albo nietoksyczne powtórzenie 25Q, albo toksyczne powtórzenie 72Q związane z chorobą Huntingtona. Klony są selekcjonowane i weryfikowane przez sekwencjonowanie, a następnie przekształcane w drożdże.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Białka fluorescencyjne Fusion Partners testy toksyczności poliglutaminy wektor ekspresji drożdży HTT znakowany FLAG choroba Huntingtona glukoza jako źródło węgla indukcja galaktozy hodowle komórkowe syntetyczne kompletne podłoże pomiar gęstości optycznej kontrola pozytywna GFP

Related Videos

Ilościowa analiza pod mikroskopią fluorescencyjną żywych komórek drożdży rozszczepieniowych

06:52

Ilościowa analiza pod mikroskopią fluorescencyjną żywych komórek drożdży rozszczepieniowych

Related Videos

20.8K Views

Testy wzrostu w celu oceny toksyczności poliglutaminy w drożdżach

09:06

Testy wzrostu w celu oceny toksyczności poliglutaminy w drożdżach

Related Videos

14K Views

Fluorescencyjny test paraliżu reporterowego: technika oceny związanego z wiekiem postępującego tworzenia się fluorescencyjnego reportera poliglutaminy i związanego z nim paraliżu w Caenorhabditis elegans

03:03

Fluorescencyjny test paraliżu reporterowego: technika oceny związanego z wiekiem postępującego tworzenia się fluorescencyjnego reportera poliglutaminy i związanego z nim paraliżu w Caenorhabditis elegans

Related Videos

665 Views

Sprzężone testy do monitorowania ponownego fałdowania białek u Saccharomyces cerevisiae

13:52

Sprzężone testy do monitorowania ponownego fałdowania białek u Saccharomyces cerevisiae

Related Videos

10.8K Views

Oznaczanie na podstawie wzrostu i biochemiczne potwierdzenie wymagań genetycznych dotyczących degradacji białek u Saccharomyces cerevisiae

10:57

Oznaczanie na podstawie wzrostu i biochemiczne potwierdzenie wymagań genetycznych dotyczących degradacji białek u Saccharomyces cerevisiae

Related Videos

10.2K Views

Mikroskopia płciowego cyklu życiowego drożdży rozszczepialnych

07:47

Mikroskopia płciowego cyklu życiowego drożdży rozszczepialnych

Related Videos

15.3K Views

Generowanie fuzji białek fluorescencyjnych u gatunków Candida

09:27

Generowanie fuzji białek fluorescencyjnych u gatunków Candida

Related Videos

11.2K Views

Test do pomiaru transportu nukleocytoplazmatycznego w czasie rzeczywistym w komórkach NSC-34 podobnych do neuronów ruchowych

08:53

Test do pomiaru transportu nukleocytoplazmatycznego w czasie rzeczywistym w komórkach NSC-34 podobnych do neuronów ruchowych

Related Videos

9.2K Views

Badania przesiewowe biblioteki nadekspresji opartej na kryciach u drożdży

11:39

Badania przesiewowe biblioteki nadekspresji opartej na kryciach u drożdży

Related Videos

8.2K Views

Metoda badania toksyczności i agregacji α-synukleiny przy użyciu humanizowanego modelu drożdży

08:24

Metoda badania toksyczności i agregacji α-synukleiny przy użyciu humanizowanego modelu drożdży

Related Videos

2.7K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code