-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

PL

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

pl_PL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
Specyficzne znakowanie nukleoidów mitochondrialnych dla poklatkowej mikroskopii oświetlenia struk...
Specyficzne znakowanie nukleoidów mitochondrialnych dla poklatkowej mikroskopii oświetlenia struk...
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Specific Labeling of Mitochondrial Nucleoids for Time-lapse Structured Illumination Microscopy

Specyficzne znakowanie nukleoidów mitochondrialnych dla poklatkowej mikroskopii oświetlenia strukturalnego

Full Text
7,802 Views
07:53 min
June 4, 2020

DOI: 10.3791/60003-v

Visnja Jevtic1, Petra Kindle1, Sergiy V. Avilov1

1Imaging Facility,Max Planck Institute of Immunobiology and Epigenetics

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol enables the specific labeling of mitochondrial nucleoids in live cells, facilitating the quantitative study of their motion at high resolution. By utilizing a commercially available DNA gel stain, the method circumvents the need for fluorescent protein overexpression, thus avoiding artifacts and broadening applicability to non-transfectable cell types.

Key Study Components

Research Area

  • Cell biology
  • Microscopy
  • Molecular biology

Background

  • Mitochondrial nucleoids play a crucial role in cellular function.
  • Conventional staining methods can introduce artifacts.
  • The study focuses on optimizing conditions for selective nucleoid labeling.

Methods Used

  • Super-resolution structured illumination microscopy (SR-SIM)
  • HeLa cells
  • SYBR Gold staining

Main Results

  • The protocol allows effective visualization of mitochondrial nucleoids as bright spots.
  • Time-lapse imaging provides tracking of nucleoid motion in real time.
  • High-resolution imaging reveals dynamics that surpass the diffraction limit.

Conclusions

  • This study demonstrates a novel method for labeling mitochondrial nucleoids, yielding valuable insights into their motion.
  • The findings enhance the understanding of mitochondrial dynamics and their significance in cell biology research.

Frequently Asked Questions

What is the purpose of labeling mitochondrial nucleoids?
Labeling allows for the visualization and tracking of nucleoid dynamics in live cells, providing insights into mitochondrial function.
Why use SYBR Gold instead of fluorescent proteins?
SYBR Gold avoids the artifacts associated with protein overexpression and can be used in non-transfectable cell types.
What imaging technology is used in this protocol?
The protocol utilizes super-resolution structured illumination microscopy (SR-SIM) for high-resolution imaging.
Can this method be applied to other cell types?
Yes, the protocol is designed to work with non-transfectable cells, expanding its utility across different cell types.
How does the time-lapse imaging enhance understanding of mitochondrial dynamics?
Time-lapse imaging allows researchers to observe live motion and behavior of nucleoid structures over time, providing dynamic insights.
What are the potential applications of this research?
This research can be applied to studies involving mitochondrial biology, genetics, and cellular metabolism research.
What concentration of SYBR Gold is recommended?
Lower concentrations are recommended to avoid extensive nuclear staining and enhance specificity for mitochondrial labeling.

Protokół opisuje specyficzne znakowanie nukleoidów mitochondrialnych za pomocą komercyjnie dostępnego barwnika żelowego DNA, akwizycję serii poklatkowych żywych znakowanych komórek za pomocą super-rozdzielczej mikroskopii oświetlenia strukturalnego (SR-SIM) oraz automatyczne śledzenie ruchu nukleoidów.

Protokół pozwala na specyficzne znakowanie nukleoidów mitochondrialnych w żywych komórkach i ilościowe badanie ich ruchu w wysokiej rozdzielczości. Inkubacja z barwnikiem fluorescencyjnym jedynie omija potrzebę nadmiernej ekspresji białka fluorescencyjnego, unikając powiązanych artefaktów i ograniczeń oraz umożliwiając zastosowanie naszego protokołu do komórek nietransfekulowalnych. Aby uzyskać preferencyjne barwienie nukleoidów, należy użyć SYBR Gold i niczego innego w warunkach, które zoptymalizowaliśmy.

W przeciwnym razie całkowite DNA komórkowe może zostać wybarwione. Na dzień przed procedurą znakowania należy wyhodować cztery razy 10 do piątej komórki HeLa w dwóch mililitrach pożywki na 35-milimetrowej szalce Petriego. Następnego ranka umyj komórki w dwóch mililitrach PBS przed dodaniem jednego mililitra pożywki hodowlanej wolnej czerwieni fenolowej i jednego mililitra odpowiedniego roztworu do znakowania 2X.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Nukleoidy mitochondrialne mikroskopia poklatkowa mikroskopia oświetlenia strukturalnego barwnik fluorescencyjny złoto SYBR obrazowanie żywych komórek komórki HeLa hodowla komórkowa mikroskopia super rozdzielczości śledzenie nukleoidów protokół obrazowania kamera do mnożenia elektronów przygotowanie próbki

Related Videos

Neuromodulacja i transport mitochondrialny: obrazowanie na żywo w neuronach hipokampa przez długi czas

04:50

Neuromodulacja i transport mitochondrialny: obrazowanie na żywo w neuronach hipokampa przez długi czas

Related Videos

17.3K Views

Obrazowanie konfokalne ruchu mitochondriów w oligodendrocytach w organotypowych kulturach wycinków mózgu

04:11

Obrazowanie konfokalne ruchu mitochondriów w oligodendrocytach w organotypowych kulturach wycinków mózgu

Related Videos

591 Views

Trójwymiarowe obrazowanie i analiza mitochondriów w obrębie śródnaskórkowych włókien nerwowych człowieka

10:31

Trójwymiarowe obrazowanie i analiza mitochondriów w obrębie śródnaskórkowych włókien nerwowych człowieka

Related Videos

10.7K Views

Wielobarwna mikroskopia lokalizacyjna białek jednobłonowych w organellach żywych komórek ssaków

11:06

Wielobarwna mikroskopia lokalizacyjna białek jednobłonowych w organellach żywych komórek ssaków

Related Videos

9.1K Views

Obrazowanie mitochondriów i retikulum endoplazmatycznego za pomocą korelacyjnej mikroskopii świetlnej i objętościowej

09:21

Obrazowanie mitochondriów i retikulum endoplazmatycznego za pomocą korelacyjnej mikroskopii świetlnej i objętościowej

Related Videos

14K Views

Znakowanie i wizualizacja produktów ekspresji genomu mitochondrialnego w drożdżach piekarskich Saccharomyces cerevisiae

08:33

Znakowanie i wizualizacja produktów ekspresji genomu mitochondrialnego w drożdżach piekarskich Saccharomyces cerevisiae

Related Videos

4.9K Views

Wysokoprzepustowa, obrazowa kwantyfikacja syntezy i dystrybucji mitochondrialnego DNA

10:47

Wysokoprzepustowa, obrazowa kwantyfikacja syntezy i dystrybucji mitochondrialnego DNA

Related Videos

4.5K Views

Zoptymalizowana zautomatyzowana analiza modulacji homeostazy mitochondriów neuronalnych w żywych organizmach neuronalnych przez specyficzne dla izoform receptory kwasu retinowego

08:33

Zoptymalizowana zautomatyzowana analiza modulacji homeostazy mitochondriów neuronalnych w żywych organizmach neuronalnych przez specyficzne dla izoform receptory kwasu retinowego

Related Videos

1K Views

Wykorzystanie obrazowania STED na żywych komórkach do wizualizacji ultrastruktury wewnętrznej błony mitochondrialnej w modelach komórek neuronalnych

08:48

Wykorzystanie obrazowania STED na żywych komórkach do wizualizacji ultrastruktury wewnętrznej błony mitochondrialnej w modelach komórek neuronalnych

Related Videos

4.9K Views

Oznaczanie morfologii mitochondriów w żywych komórkach za pomocą mikroskopii konfokalnej

06:57

Oznaczanie morfologii mitochondriów w żywych komórkach za pomocą mikroskopii konfokalnej

Related Videos

1.5K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code