Name: Stworzenie dwóch tętniaków trawionych elastazą workowatą o różnej hemodynamice u jednego królika (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-15T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 4 s
Description: Poznaj technikę tworzenia modelu tętniaka u królika z dwoma różnymi warunkami hemodynamicznymi w jednym zwierzęciu. Ta metoda umożliwia testowanie nowych urządzeń endowaskularnych przy niskiej śmiertelności.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy dziękują prof. Hansowi Rudolfowi Widmerowi, dr Luce Remonda i prof. Javierowi Fandino za ich naukowe wsparcie i techniczny wkład w tę pracę. Specjalne podziękowania dla Olgici Beslac za jej rady podczas zabiegów oraz Kay Nettelbeck za pomoc. Ponadto dziękujemy dr Danieli Casoni DVM i lekarzowi weterynarii. Luisana Garcia, dr Alessandra Bergadano i dr Carlotta Detotto za ich oddane wsparcie weterynaryjne.

UWAGA: Eksperyment został zatwierdzony przez Lokalny Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami Kantonu Berno, Szwajcaria (Numer wniosku BE108/16), a wszystkie procedury opieki nad zwierzętami zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi instytucjonalnymi i zasadami 3R15,16. Dane są raportowane zgodnie z wytycznymi ARRIVE. Postępowanie okołooperacyjne było prowadzone przez lekarza weterynarii anestezjologa z certyfikatem. Na potrzeby badania samice białych królików nowozelandzkich, o średniej wadze 4,0 (± 0,3) kg i średnim wieku 25 (±5) tygodni, były trzymane w temperaturze pokojowej 22-24 °C z 12-godzinnym cyklem światła/ciemności ze swobodnym dostępem do wody, granulek i siana.
1. Faza przedoperacyjna i znieczulenie
<ol>
	<li>Wykonaj badanie kliniczne zgodnie z zaleceniami Stowarzyszenia Anestezjologów Weterynaryjnych oraz Europejskiego i Amerykańskiego Kolegium Anestezjologii Weterynaryjnej i Analgezji w celu potwierdzenia, że króliki są zdrowe, ważąc każde zwierzę, oceniając błonę śluzową, dokumentując czas napełniania kapilar i jakość tętna oraz wykonując osłuchiwanie płuc i serca, a także badanie palpacyjne jamy brzusznej.</li>
	<li>Na podstawie wyników klinicznych przypisz klasyfikację Amerykańskiego Towarzystwa Anestezjologów (ASA) do każdego rabbit17. Wykonuj operację tylko na zwierzętach z punktacją ASA I.</li>
	<li>Ogolić oba uszy zewnętrzne i nałożyć krem prylokainowo-lidokainowy na tętnice i żyły uszne. Osiągnij głęboką sedację za pomocą kombinacji ketaminy 20 mg/kg, deksmedetomidyny 0,1 mg/kg i metadonu 0,3 mg/kg wstrzykiwanej podskórnie (SC). Pozostaw zwierzęta w spokoju przez 15 minut. Podać dodatkowe natlenienie (3 l/min) przez poluzowaną maskę na twarz i monitorować za pomocą pulsoksymetru.</li>
	<li>Umieść kaniulę 22 G w lewej tętnicy środkowej małżowiny usznej, a także w żyle usznej. Znieczulenie ogólne propofolem w dawce 1-2 mg/kg dożylnie (IV) do uzyskania efektu (utrata odruchu połykania). Kontynuuj intubację dotchawiczą za pomocą silikonowej rurki (średnica wewnętrzna 3 mm).</li>
	<li>Ogol czoło, aby umieścić pediatryczne czujniki elektroencefalograficzne (EEG). Ogolić pole operacyjne i wstrzyknąć śródskórnie chlorowodorek ropiwakainy 0,75</li>%.
	<li>Umieść królika na stole operacyjnym w pozycji grzbietowej, zainstaluj pełne monitorowanie i podłącz rurkę dotchawiczą do systemu koła pediatrycznego o niskiej oporności. Utrzymać znieczulenie, podając izofluran w tlenie, dążąc do maksymalnego stężenia w oddechu oddechowym (Et) wynoszącego 1,3</li>%.
	<li>Zapewnić ciągły wlew mleczanu pierścienia w dawce 5 ml/kg/h przez dostęp żylny. Zapewnić monitorowanie kliniczne i instrumentalne aż do ekstubacji za pomocą pulsoksymetrii, dopplera i inwazyjnego ciśnienia krwi, elektrokardiogramu 3-odprowadzeniowego, EEG, temperatury w odbycie oraz gazów wdychanych i wydychanych.</li>
	<li>Zdezynfekuj pole operacyjne jodem powidonu od manubrium sterni do kątów żuchwy i nałóż sterylne drapowanie. Podczas zabiegu należy zapewnić znieczulenie lidokainą (wlew o stałej szybkości (CRI) 50 μg/kg/min) i fentanylem (CRI 3-10 μg/kg/h). Wykonaj wentylację spontaniczną lub wspomaganą. Zezwalaj na permisywną hiperkapnię.</li>
	<li>Podczas operacji należy wykonać co najmniej jedną analizę gazometrii krwi tętniczej. W przypadku niedociśnienia (średnie ciśnienie tętnicze poniżej 60 mmHg) należy je leczyć noradrenaliną, miareczkowaną aż do efektu. Użyj poduszki grzewczej lub systemu ogrzewania z wymuszonym obiegiem powietrza, aby zapobiec hipotermii (cel: temperatura w odbycie 37,5-38,5 °C). 
	UWAGA: Ponieważ inwazyjne ciśnienie krwi tętniczej jest mierzone w tętnicy ucha lewego, przecięcie lewego CCA zatrzyma przepływ krwi i stłumi krzywą. Następnie należy zmierzyć ciśnienie krwi techniką dopplerowską do momentu ponownego otwarcia naczynia.</li>
</ol>
2. Chirurgia
<ol>
	<li>podejście
	<ol>
		<li>Wykonaj skalpelem środkowe nacięcie skóry od kości gnykowej do punktu 1,5 cm ogonowego do manubrium mostka. Przygotuj tkankę podskórną i tłuszczową z nacięcia przyśrodkowego, wykonując skrupulatną hemostazę.</li>
		<li>Uwolnij mięsień mostkowy od przylegającej tkanki łącznej i stosuj miejscowo lidokainę (2-4 mg / kg, preferuj lidokainę 1%), aby uniknąć mioklonie. Odsłoń prawe CCA przyśrodkowo mięśnia mostka i utrzymuj go w mokrym waciku.</li>
		<li>Teraz przygotuj boczne i proksymalne części mięśnia mostka i wsuń go przyśrodkowo za pomocą pętli naczynia, aby odsłonić CCA. Zidentyfikuj żyłę szyjną zewnętrzną i zabezpiecz ją wilgotnym mikrowacikiem.</li>
		<li>Ostrożnie wypreparuj tkankę łączną wzdłuż proksymalnego CCA, aż do rozwidlenia pnia ramienno-głowowego, aby odsłonić tętnicę. W obecności małych gałęzi wychodzących z tętnicy, skoaguluj je za pomocą kauteryzatora. 
		UWAGA: Uważaj, aby uniknąć uszkodzenia nerwów.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Tworzenie tętniaka kikuta i pobieranie tkanek do tętniaka bifurkacji
	<ol>
		<li>Przed założeniem prawego CCA zmierz czas przeciwzakrzepowy (ACT) i podaj heparynę sodową (80 EI/kg) ogólnoustrojowo przez żyłę uszną (wykonywane przez zespół anestezjologiczny), aby uniknąć zdarzeń zakrzepowo-zatorowych.</li>
		<li>Teraz zastosuj 2 tymczasowe klipsy: pierwszy na początku CCA, a drugi 2 cm od niego (<silna klasa="xfig">Rysunek 1A). Umieść gumową podkładkę pod naczyniem i spłucz papaweryną HCL (40 mg/ml; 1:1 rozpuszczona w 0,9% soli fizjologicznej) w celu rozszerzenia naczyń krwionośnych.</li>
		<li>Ostrożnie usuń przydankę za pomocą mikronożyczek. Wykonaj arteriotomię poniżej dystalnego klipsa za pomocą cewnika dożylnego 22 G i wprowadź cewnik doogonowo do bliższego klipsa (<silna klasa = "xfig">Rysunek 1A, B).</li>
		<li>Przepłukać segment śródświetlne heparynizowanym NaCl (500 U/100 ml w 0,9% soli fizjologicznej), aż nie będzie widać krwi, a na koniec przymocuj cewnik za pomocą ligatury (4-0). Teraz przez cewnik wstrzyknij 0,1-0,2 ml elastazy (100 IU wcześniej rozpuszczone w 5 ml Tris-Buffer) do segmentu tętnicy i inkubuj przez 20 minut (<silna klasa = "xfig">Figura 1B).</li>
		<li>Rozpocząć od rozwarstwienia po lewej stronie, aby odsłonić lewe CCA (patrz punkt 2.3). Po 20 minutach inkubacji z elastazą, wyczyść roztwór elastazy i zmień strzykawkę, aby przepłukać odcinek tętnicy około 10 razy 0,9% NaCl.</li>
		<li>Zastosuj 2 ligatury (6-0): pierwszą 5 mm dystalnie od bliższego klipsa, a drugą tuż proksymalnej, pod arteriotomią (<silna klasa="xfig">Ryc. 1C). Przeciąć naczynie ~3 mm powyżej pierwszej ligatury i jeszcze raz między drugą ligaturą a dystalnym klipsem. Przechowuj ten autologiczny przeszczep w roztworze heparynowym (500 j./100 ml w 0,9% soli fizjologicznej) do momentu powstania tętniaka bifurkacji (<silna klasa = "xfig" >Ryc. 1D). Na koniec ostrożnie otwórz pierwszy zacisk proksymalny i zmierz tętniaka (długość, szerokość i głębokość).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Tworzenie tętniaka bifurkacji
	<ol>
		<li>Przygotuj lewą stronę, preparując mięsień mostkowy przyśrodkowo, aby odsłonić ~ 2 cm lewego CCA. Stosuj lidokainę miejscowo na mięsień, aby uniknąć mioklonie.</li>
		<li>Podłóż tętnicę szyjną kulką z gazy i małym wacikiem z kawałkiem rękawicy. Zastosuj trochę papaweryny. HCl miejscowo (40 mg/ml; 1:1 rozpuszczony w 0,9% soli fizjologicznej). Kontynuuj pracę pod mikroskopem: przygotuj worek na tętniaka i usuń przydankę. Zmierz worek na tętniaka (długość, szerokość, głębokość).</li>
		<li>Przepłucz otwartą część prawego CCA heparynizowanym NaCl i, jeśli to konieczne, wymień klips tak, aby miał ~1 cm, aby umożliwić swobodne manipulacje szwem. Ostrożnie usuń przydankę i wykonaj podłużne nacięcie ~2 mm bocznie w kikutu prawego CCA.</li>
		<li>Teraz zastosuj dwa tymczasowe klipsy po lewej stronie CCA, aby wyznaczyć segment o długości ~1 cm i usuń przydankę pomiędzy nimi. Wykonaj arteriotomię za pomocą igły 23 G. Przepłukać segment heparynizowanym NaCl (500 U/100 ml w 0,9% soli fizjologicznej). Powiększ arteriotomię za pomocą mikronożyczek do ~4-5 mm, aby umożliwić zszycie prawego CCA i worka tętniaka (<klasa silna = "xfig">Rysunek 1E). Naczynia należy nawadniać podczas całego procesu szycia i chronić je za pomocą mokrych mikroswapów.</li>
		<li>Zespolenie wykonać szwem niewchłanialnym 9-0.
		<ol>
			<li>Zszyj bliższą tylną ścianę prawej tętnicy szyjnej za pomocą 5 szwów, zaczynając od bliższej krawędzi arteriotomii po lewej stronie CCA. Następnie zszyj tylną stronę worka tętniaka za pomocą 4-5 szwów, zaczynając od dystalnej krawędzi arteriotomii po lewej stronie CCA.</li>
			<li>Kontynuuj z dystalną tylną stroną na poziomie nacięcia w jamie ustnej ryby, aby zszyć pionową tylną stroną przeszczepu tętniaka za pomocą 3 szwów. Zszyj przednią stronę nacięcia pyska ryby za pomocą 3 szwów, zaczynając od góry i przesuwając się w dół.</li>
			<li>Zakończ przednim szwem między lewym CCA a przednią stroną przeszczepu tętniaka i prawym CCA za pomocą ~6 szwów. Przed zakończeniem zespolenia należy przepłukać naczynia heparynizowanym 0,9% roztworem soli fizjologicznej śródświetlnej.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Przed zdjęciem zacisku należy jeszcze raz zmierzyć czas przeciwzakrzepowy (ACT) i podać dostosowaną dawkę heparyny ogólnoustrojowo (cel: 2-3 razy więcej niż wynosi wartość wyjściowa).</li>
		<li>Zdejmij klips z prawego CCA, wywierając pewien nacisk na zespolenie za pomocą mikrowacików do hemostazy. Następnie kontynuuj, usuwając dystalny zacisk z lewego CCA. Jeśli nie ma poważnego krwawienia, kontynuuj wyjmowanie bliższego klipsa z lewego CCA, aby umożliwić przepływ krwi. Jeśli występuje krwawienie z zespolenia, należy lekko docisnąć kulką z gazy i wacikiem; Poczekaj kilka minut. Jeśli problem będzie się powtarzał, wymień klipsy i wykonaj ponowne ściegi. 
		UWAGA: Utrata krwi większa niż 20-30 ml może zagrozić fazie rekonwalescencji.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Kontrola i dokumentacja drożności
	<ol>
		<li>Po otwarciu wszystkich naczyń udokumentuj wyniki na zdjęciu i zmierz je (<silna klasa="xfig">Rysunek 1F i <silna klasa="xfig">Rysunek 2A,B).</li>
		<li>Potwierdź przywrócenie przepływu w dystalnym CCA przez inwazyjną krzywą ciśnienia tętniczego krwi (mierzoną w tętnicy usznej, bezpośredniej gałęzi tętnicy szyjnej), która również powinna powrócić do normy.</li>
		<li>Wykonaj angiografię fluorescencyjną, podając 1 ml fluoresceiny dożylnej przy użyciu 2 filtrów pasmowo-przepustowych, kamery wideo i reflektora rowerowego. Zobacz poprzednie publikacje, aby zapoznać się z opisem całej procedury18,19.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>domknięcie
	<ol>
		<li>Ponownie dostosuj poduszeczkę tłuszczową do zespolenia i zszyj ją szwem resorbowalnym 4-0. Na koniec zszyj tkankę podskórną i skórę pojedynczymi szwami za pomocą szwu resorbowalnego 4-0.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Faza pooperacyjna
<ol>
	<li>Pod koniec zabiegu należy odstawić izofluran i analgezję ogólnoustrojową bez cofania się w celu utrzymania efektu przeciwbólowego. Upewnij się, że kontrola nad odruchem połykania została przywrócona przed wykonaniem ekstubacji tchawicy.</li>
	<li>Podawać meloksykam 0,5 mg/kg dożylnie w celu zapewnienia znieczulenia, aspirynę (ASS) 10 mg/kg dożylnie w celu zapobiegania natychmiastowym incydentom zakrzepowym, witaminę B12 100 μg s.�. i clamoksyl 20 mg/kg dożylnie w profilaktyce antybiotykowej.</li>
	<li>Zapewnij dodatkowe natlenienie i rozgrzanie, aż królik spontanicznie odzyska pozycję leżącą mostka. Wykonaj analgezję ratunkową z metadonem, jeśli zaobserwuje się jakiekolwiek oznaki bólu. Wykonuj obserwację pooperacyjną i pielęgnację 4 razy dziennie przez pierwsze 3 dni przedoperacyjne, zgodnie z wytycznymi dotyczącymi oceny i leczenia bólu u gryzoni i królików23,24.</li>
	<li>Zapewnić znieczulenie pooperacyjne za pomocą plastra z fentanylem (12 μg/h) nałożonego na ucho zewnętrzne, meloksykamu 1x/SC na 3 dni i metadonu jako terapii ratunkowej, wraz z arkuszem wyników do oceny bólu (plik uzupełniający).</li>
</ol>

<ol><li>Grasso, G., Alafaci, C., Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage%3A+State+of+the+art+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Neurology+International%22%5BJournal%5D)">Management of aneurysmal subarachnoid hemorrhage: State of the art and future perspectives.</a> Surgical Neurology International. 8, 11(2017).</li>
<li>Raymond, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+angiographic+recurrences+after+selective+endovascular+treatment+of+aneurysms+with+detachable+coils%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Long-term angiographic recurrences after selective endovascular treatment of aneurysms with detachable coils.</a> Stroke. 34 (6), 1398-1403 (2003).</li>
<li>Marbacher, S., Niemela, M., Hernesniemi, J., Frosen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recurrence+of+endovascularly+and+microsurgically+treated+intracranial+aneurysms-review+of+the+putative+role+of+aneurysm+wall+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgical+Review%22%5BJournal%5D)">Recurrence of endovascularly and microsurgically treated intracranial aneurysms-review of the putative role of aneurysm wall biology.</a> Neurosurgical Review. 42 (1), 49-58 (2019).</li>
<li>Thompson, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+cerebral+aneurysm+models%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgical+Focus%22%5BJournal%5D)">In vivo cerebral aneurysm models.</a> Neurosurgical Focus. 47 (1), 20(2019).</li>
<li>Bouzeghrane, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+experimental+intracranial+aneurysm+models%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review.</a> American Journal of Neuroradiology. 31 (3), 418-423 (2010).</li>
<li>Strange, F., Gruter, B. E., Fandino, J., Marbacher, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+intracranial+aneurysm+models%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Sciences%22%5BJournal%5D)">Preclinical intracranial aneurysm models: a systematic review.</a> Brain Sciences. 10 (3), 134(2020).</li>
<li>Marbacher, S., Strange, F., Frosen, J., Fandino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+extracranial+aneurysm+models+for+the+study+and+treatment+of+brain+aneurysms%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Preclinical extracranial aneurysm models for the study and treatment of brain aneurysms: A systematic review.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 40 (5), 922-938 (2020).</li>
<li>Fahed, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testing+flow+diversion+in+animal+models%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Testing flow diversion in animal models: a systematic review.</a> Neuroradiology. 58 (4), 375-382 (2016).</li>
<li>Zeng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamics+and+anatomy+of+elastase-induced+rabbit+aneurysm+models%3A+similarity+to+human+cerebral+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Hemodynamics and anatomy of elastase-induced rabbit aneurysm models: similarity to human cerebral aneurysms.</a> American Journal of Neuroradiology. 32 (3), 595-601 (2011).</li>
<li>Ding, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+patency+of+elastase-induced+aneurysm+model+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Long-term patency of elastase-induced aneurysm model in rabbits.</a> American Journal of Neuroradiology. 27 (1), 139-141 (2006).</li>
<li>Short, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastase-induced+saccular+aneurysms+in+rabbits%3A+comparison+of+geometric+features+with+those+of+human+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Elastase-induced saccular aneurysms in rabbits: comparison of geometric features with those of human aneurysms.</a> American Journal of Neuroradiology. 22 (10), 1833-1837 (2001).</li>
<li>Andereggen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+visualization+of+aneurysm+wall+calcification+by+cerebral+angiography%3A+Technical+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional visualization of aneurysm wall calcification by cerebral angiography: Technical case report.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 73, 290-293 (2020).</li>
<li>Hoh, B. L., Rabinov, J. D., Pryor, J. C., Ogilvy, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+technique+for+using+elastase+to+create+saccular+aneurysms+in+animals+that+histologically+and+hemodynamically+resemble+aneurysms+in+human%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochirurgica%22%5BJournal%5D)">A modified technique for using elastase to create saccular aneurysms in animals that histologically and hemodynamically resemble aneurysms in human.</a> Acta Neurochirurgica. 146 (7), 705-711 (2004).</li>
<li>Wanderer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterial+pouch+microsurgical+bifurcation+aneurysm+model+in+the+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Arterial pouch microsurgical bifurcation aneurysm model in the rabbit.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (159), e61157(2020).</li>
<li>Percie du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reporting+animal+research%3A+Explanation+and+elaboration+for+the+ARRIVE+guidelines+2.0%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biology%22%5BJournal%5D)">Reporting animal research: Explanation and elaboration for the ARRIVE guidelines 2.0.</a> PLoS Biology. 18 (7), 3000411(2020).</li>
<li>Prescott, M. J., Lidster, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+quality+of+science+through+better+animal+welfare%3A+the+NC3Rs+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Improving quality of science through better animal welfare: the NC3Rs strategy.</a> Lab Animal. 46 (4), 152-156 (2017).</li>
<li>Portier, K., Ida, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ASA+Physical+Status+Classification%3A+What+is+the+evidence+for+recommending+its+use+in+veterinary+anesthesia%3F-A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Veterinary+Science%22%5BJournal%5D)">The ASA Physical Status Classification: What is the evidence for recommending its use in veterinary anesthesia?-A systematic review.</a> Frontiers in Veterinary Science. 5, 204(2018).</li>
<li>Gruter, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+video+angiography+for+evaluation+of+dynamic+perfusion+status+in+an+aneurysm+preclinical+experimental+setting%5BTitle%5D)+AND+%22Operative+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Fluorescence video angiography for evaluation of dynamic perfusion status in an aneurysm preclinical experimental setting.</a> Operative Neurosurgery. 17 (4), 432-438 (2019).</li>
<li>Strange, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+angiography+for+evaluation+of+aneurysm+perfusion+and+parent+artery+patency+in+rat+and+rabbit+aneurysm+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Fluorescence angiography for evaluation of aneurysm perfusion and parent artery patency in rat and rabbit aneurysm models.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (149), e59782(2019).</li>
<li>Altes, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1999+ARRS+Executive+Council+Award.+Creation+of+saccular+aneurysms+in+the+rabbit%3A+a+model+suitable+for+testing+endovascular+devices%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Roentgenology%22%5BJournal%5D)">1999 ARRS Executive Council Award. Creation of saccular aneurysms in the rabbit: a model suitable for testing endovascular devices.</a> American Journal of Roentgenology. 174 (2), 349-354 (2000).</li>
<li>Brinjikji, W., Ding, Y. H., Kallmes, D. F., Kadirvel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+bench+to+bedside%3A+utility+of+the+rabbit+elastase+aneurysm+model+in+preclinical+studies+of+intracranial+aneurysm+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+NeuroInterventional+Surgery%22%5BJournal%5D)">From bench to bedside: utility of the rabbit elastase aneurysm model in preclinical studies of intracranial aneurysm treatment.</a> Journal of NeuroInterventional Surgery. 8 (5), 521-525 (2016).</li>
<li>Sherif, C., Marbacher, S., Erhardt, S., Fandino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+microsurgical+creation+of+venous+pouch+arterial+bifurcation+aneurysms+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Improved microsurgical creation of venous pouch arterial bifurcation aneurysms in rabbits.</a> American Journal of Neuroradiology. 32 (1), 165-169 (2011).</li>
<li>Bavinzski, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+bifurcation+aneurysm%3A+a+model+for+in+vivo+evaluation+of+endovascular+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Minimally+Invasive+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Experimental bifurcation aneurysm: a model for in vivo evaluation of endovascular techniques.</a> Minimally Invasive Neurosurgery. 41 (3), 129-132 (1998).</li>
<li>Lewis, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morbidity+and+mortality+associated+with+creation+of+elastase-induced+saccular+aneurysms+in+a+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Morbidity and mortality associated with creation of elastase-induced saccular aneurysms in a rabbit model.</a> American Journal of Neuroradiology. 30 (1), 91-94 (2009).</li>
<li>Wang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neck+injury+is+critical+to+elastase-induced+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Neck injury is critical to elastase-induced aneurysm model.</a> American Journal of Neuroradiology. 30 (9), 1685-1687 (2009).</li>
<li>Cesar, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurological+deficits+associated+with+the+elastase-induced+aneurysm+model+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Neurological deficits associated with the elastase-induced aneurysm model in rabbits.</a> Neurological Research. 31 (4), 414-419 (2009).</li>
<li>Aoki, T., Nishimura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+and+the+use+of+experimental+animal+models+to+study+the+underlying+mechanisms+of+CA+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedicine+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">The development and the use of experimental animal models to study the underlying mechanisms of CA formation.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 535921(2011).</li>
<li>Frosen, J., Cebral, J., Robertson, A. M., Aoki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow-induced%2C+inflammation-mediated+arterial+wall+remodeling+in+the+formation+and+progression+of+intracranial+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgical+Focus%22%5BJournal%5D)">Flow-induced, inflammation-mediated arterial wall remodeling in the formation and progression of intracranial aneurysms.</a> Neurosurgical Focus. 47 (1), 21(2019).</li>
<li>Gruter, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+aneurysm+patency+and+mural+inflammation+in+an+arterial+rabbit+sidewall+and+bifurcation+aneurysm+model+under+consideration+of+different+wall+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Sciences%22%5BJournal%5D)">Comparison of aneurysm patency and mural inflammation in an arterial rabbit sidewall and bifurcation aneurysm model under consideration of different wall conditions.</a> Brain Sciences. 10 (4), 197(2020).</li>
<li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Helsinki+rat+microsurgical+sidewall+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">The Helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (92), e51071(2014).</li>
<li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+bilobular%2C+bisaccular%2C+and+broad-neck+microsurgical+aneurysm+formation+in+the+rabbit+bifurcation+model+for+the+study+of+upcoming+endovascular+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques.</a> American Journal of Neuroradiology. 32 (4), 772-777 (2011).</li>
<li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+mural+cells+leads+to+wall+degeneration%2C+aneurysm+growth%2C+and+eventual+rupture+in+a+rat+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model.</a> Stroke. 45 (1), 248-254 (2014).</li>
<li>Gruter, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testing+bioresorbable+stent+feasibility+in+a+rat+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurointerventional+Surgery%22%5BJournal%5D)">Testing bioresorbable stent feasibility in a rat aneurysm model.</a> Journal of Neurointerventional Surgery. 11 (10), 1050-1054 (2019).</li>
<li>Nevzati, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biodegradable+magnesium+stent+treatment+of+saccular+aneurysms+in+a+rat+model+-+Introduction+of+the+surgical+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Biodegradable magnesium stent treatment of saccular aneurysms in a rat model - Introduction of the surgical technique.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e56359(2017).</li>
<li>Gruter, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+neointima+formation+after+coil+or+stent+treatment+in+a+rat+saccular+sidewall+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Patterns of neointima formation after coil or stent treatment in a rat saccular sidewall aneurysm model.</a> Stroke. 52 (3), 1043-1052 (2021).</li>
<li>Wanderer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aspirin+treatment+prevents+inflammation+in+experimental+bifurcation+aneurysms+in+New+Zealand+White+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+NeuroInterventional+Surgery%22%5BJournal%5D)">Aspirin treatment prevents inflammation in experimental bifurcation aneurysms in New Zealand White rabbits.</a> Journal of NeuroInterventional Surgery. , (2021).</li>
<li>Lyu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+effective+and+simple+way+to+establish+eastase-induced+middle+carotid+artery+fusiform+aneurysms+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Research+International%22%5BJournal%5D)">An effective and simple way to establish eastase-induced middle carotid artery fusiform aneurysms in rabbits.</a> Biomed Research International. 2020 (10), 1-12 (2020).</li>
<li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rabbit+aneurysm+models+mimic+histologic+wall+types+identified+in+human+intracranial+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+NeuroInterventional+Surgery%22%5BJournal%5D)">Rabbit aneurysm models mimic histologic wall types identified in human intracranial aneurysms.</a> Journal of NeuroInterventional Surgery. 10 (4), 411-415 (2018).</li>
<li>Kang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+technique+improved+histology+similarity+to+human+intracranial+aneurysm+in+rabbit+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroradiology+Journal%22%5BJournal%5D)">A modified technique improved histology similarity to human intracranial aneurysm in rabbit aneurysm model.</a> Neuroradiology Journal. 23 (5), 616-621 (2010).</li>
<li>Frosen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remodeling+of+saccular+cerebral+artery+aneurysm+wall+is+associated+with+rupture%3A+histological+analysis+of+24+unruptured+and+42+ruptured+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases.</a> Stroke. 35 (10), 2287-2293 (2004).</li>
<li>Frosen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+factor+receptor+expression+and+remodeling+of+saccular+cerebral+artery+aneurysm+walls%3A+implications+for+biological+therapy+preventing+rupture%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Growth factor receptor expression and remodeling of saccular cerebral artery aneurysm walls: implications for biological therapy preventing rupture.</a> Neurosurgery. 58 (3), 534-541 (2006).</li>
</ol>

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

Najczęstszą techniką tworzenia tętniaka jest utworzenie tętniaka kikuta u początku prawego CCA, metodą otwartą lub wewnątrznaczyniową. Model został zwalidowany jako stabilny, nierosnący tętniak, który pozostaje otwarty w czasie20,21. Druga możliwa technika polega na mikrochirurgicznym wytworzeniu tętniaka bifurkacji tętnic poprzez zespolenie prawego CCA na lewym i zszycie worka tętniaka na rozwidleniu 14,22,23....

Tętniak wewnątrzczaszkowy jest ciężkim stanem, w którym śmiertelność po pęknięciu sięga 50%, a długotrwała niepełnosprawność u 10-20% pacjentów1. W ostatniej dekadzie nastąpił szybki rozwój możliwości leczenia wewnątrznaczyniowego, ale jednocześnie rosnący wskaźnik nawrotów z nawet 33% rekanalizacją tętniaka po zwijaniu2,3. Aby lepiej zrozumieć patofizjologię leżącą u podstaw niedrożności i rekanalizacji tętniaka, a także opracować i przetestować nowe urządzenia wewnątrznaczyniowe, obecnie istnieje zapotrzebowanie na wiarygodne modele przedkliniczne, których cechy hemodynamiczne, morfologiczne i histologiczne naśladują cechy ludzkich tętniaków wewnątrzczaszkowych4,5,6. Na dzień dzisiejszy nie ma zdefiniowanego modelu jako standardu dla badań przedklinicznych, a badacze mają do dyspozycji szeroki zakres gatunków i technik7,8.
Jednak królik jest gatunkiem szczególnie interesującym ze względu na rozmiar i hemodynamiczne podobieństwa między jego tętnicami szyjnymi a ludzkimi naczyniami mózgowymi, a także podobne profile krzepnięcia i trombolizy. Kilka modeli z tętniakami workowymi trawionymi elastazą na tętnicach szyjnych wspólnych (CCA) wykazało jakościowe i ilościowe podobieństwa do ludzkich tętniaków wewnątrzczaszkowych pod względem warunków przepływu, cech geometrycznych i charakterystyki ścian9,10,11,12. Niniejsze badanie ma na celu opisanie techniki tworzenia nowego modelu tętniaka królika z tętniakami trawionymi elastazą zarówno przez kikut, jak i bifurkację u tego samego zwierzęcia. Techniki chirurgiczne są inspirowane technikami Hoh et al.13 oraz Wanderer et al.14 z niewielkimi modyfikacjami, aby zapewnić dobrą standaryzację i odtwarzalność oraz zapewnić niską śmiertelność i zachorowalność.

<table><tbody><tr><td>Szew resorbowalny 4-0</td><td>Ethicon Inc., USA</td><td>VCP292ZH</td><td></td></tr><tr><td>Szew resorbowalny 4-0</td><td>Ethicon Inc., USA</td><td>VCP304H</td><td></td></tr><tr><td>6-0 szew niewchłanialny</td><td>B. Braun, Niemcy</td><td>C0766070</td><td></td></tr><tr><td>9-0 szew niewchłanialny</td><td>B. Braun, Niemcy</td><td>G1111140</td><td></td></tr><tr><td>Adrenaline</td><td>Amino AG</td><td>1445419</td><td>dowolny ogólny</td></tr><tr><td>Amiodarone</td><td>Helvepharm AG</td><td>5078567</td><td>dowolnym generycznym</td></tr><tr><td>aparatem do znieczulenia</td><td>Dr&auml; Nie</td><td></td><td></td></tr> jest to jednak regułą, którą można napić się <tr><td>622693</td> dowolnym innym produktem<td>Aspiryna</td><td>Sanofi-Aventis (Suisse) SA</td><td>dowolnym generycznym</td></tr><tr><td>Atropine</td><td>Labatec Pharma SA</td><td>6577083</td><td>dowolnym innym</td></tr><tr><td>filtrem pasmowo-przepustowym niebieskim</td><td>Thorlabs</td><td>FD1B</td><td>każdy inny</td></tr><tr><td>filtr pasmowo-przepustowy zielony</td><td>Thorlabs</td><td>FGV9</td><td>każdy inny</td></tr><tr><td>zacisk do naczyń Biemera (2x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Szwajcaria</td><td>FD560R</td><td>wszelkie inne</td></tr><tr><td>kleszcze</td><td></td><td></td> dwubiegunowe <td>każdy inny</td></tr><tr><td>Indeks dwuspektralny (noworodkowy)</td><td></td><td></td><td>każdy inny</td></tr><tr><td>Mankiet do pomiaru ciśnienia krwi (noworodkowy)</td><td></td><td>każdy inny</td><td></td></tr><tr><td>Bycilces reflektor</td><td></td><td></td><td>każdy inny</td></tr><tr><td>Clamoxyl</td><td>GlaxoSmithKline AG</td><td>758808</td><td>dowolny ogólny</td></tr><tr><td>Deksmedetomidyna</td><td>Ever Pharma</td><td>136740-1</td><td>dowolny ogólny</td></tr><tr><td>Elastaza</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E7885</td><td></td></tr><tr><td>Elektrody</td><td></td><td></td><td></td>do elektrokardiogramu</tr><tr><td>Efedryna</td><td>Amino AG</td><td>1435734</td><td></td></tr><tr><td>Esmolol</td><td>OrPha Swiss GmbH</td><td>3284044</td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl (do stosowania dożylnego)</td><td>Janssen-Cilag AG</td><td>98683</td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl (transdermalny)</td><td>Mepha Pharma AG</td><td>4008286</td><td></td></tr><tr><td>Fluoresceine</td><td>Curatis AG</td><td>5030376</td><td></td></tr><tr><td>Fragmin</td><td>Pfizer PFE Switzerland GmbH</td><td>1906725</td><td></td></tr><tr><td>Poduszka grzewcza lub system</td><td></td><td></td><td></td>ogrzewania z wymuszonym obiegiem powietrza</tr><tr><td>Izotoniczny roztwór chlorku sodu (0,9%)</td><td>Fresenius KABI</td><td>336769</td><td></td></tr><tr><td>Ketamina</td><td>Pfizer PFE Switzerland GmbH</td><td>342261</td><td></td></tr><tr><td>zwijacz</td><td></td><td></td> pokrywy <td>Approach</td></tr><tr><td>Lidocaine</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>747466</td><td></td></tr><tr><td>Longuettes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metacam</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>P7626406</td><td>Medication</td></tr><tr><td>Metadon</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>1084546</td><td>Sedaton</td></tr><tr><td>Mikrokleszcze&nbsp; zakrzywiony</td><td>Ulrich Swiss, Szwajcaria</td><td>U52-015-15</td><td></td></tr><tr><td>Mikrokleszcze&nbsp; proste 2x</td><td>Ulrich Swiss, Szwajcaria</td><td>U52-010-15</td><td></td></tr><tr><td>Mikronożyczki</td><td>Ulrich Swiss , Szwajcaria</td><td>U52-327-15</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Accord Healthcare AG</td><td>7752484</td><td></td></tr><tr><td>Igła 23 G</td><td></td><td></td><td>Uchwyt</td></tr><tr><td>na igłę</td> do arterytomii<td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>O2-Maska</td><td></td><td></td><td></td>na twarz</tr><tr><td>Mikroskop operacyjny</td><td>Wild Heerbrugg</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Papaverin</td><td>Bichsel</td><td></td><td>zastosowanie miejscowe</td></tr><tr><td>Povidone jod</td><td>Mundipharma Medical Company</td><td></td><td>dowolny ogólny</td></tr><tr><td>Prilocaine-lidokaina crème</td><td>Emla</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Propofol</td><td>B. Braun Medical AG, Szwajcaria</td><td></td><td>Znieczulenie ogólne</td></tr><tr><td>Pulsoksymetr</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sonda temperatury doodbytniczej (noworodka)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mleczan Ringera</td><td>Bioren Sintetica SA</td><td></td><td>Napar</td></tr><tr><td>Ropivacain</td><td>Aspen Pharma Schweiz GmbH</td><td>1882249</td><td>Znieczulenie miejscowe</td></tr><tr><td>Skalpel</td><td>Swann-Morton</td><td>210</td><td></td></tr><tr><td>Golarka</td><td></td><td></td><td></td>dla małych zwierząt</tr><tr><td>Kleszczyki</td><td></td><td></td><td></td>do tkanek</tr><tr><td>miękkich Rozsiewacz</td><td></td><td></td><td></td>tkanek miękkich</tr><tr><td>Miski</td><td></td><td></td><td></td>z gąbką ze stali nierdzewnej</tr><tr><td>Sterylne mikrowaciki Stetoskop</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Serweta</td><td></td><td></td> <td>chirurgiczna</td></tr><tr><td>Nożyczki</td><td></td><td></td><td></td>chirurgiczne</tr><tr><td>Strzykawki 1 ml, 2 ml i 5 ml</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tris-Buffer</td><td>Sigma Aldrich</td><td>93302</td><td>Roztwór elastazy</td></tr><tr><td>Aplikator klipsów naczyniowych</td><td>B. Braun, Niemcy</td><td>FT495T</td><td></td></tr><tr><td>Cewnik do żył i tętnic 22 G</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pętla</td><td></td><td></td> <td>naczyń</td> Podejście</tr><tr><td>kamera wideo lub smartfon</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vitarubin</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>6847559</td><td></td></tr><tr><td>Yasargil titan standardowy klips (2x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Szwajcaria</td><td>FT242T</td><td></td></tr></tbody></table>

stworzenie dwóch tętniaków trawionych elastazą workowatą o różnej hemodynamice u jednego królika

Creation of Two Saccular Elastase-Digested Aneurysms with Different Hemodynamics in One Rabbit

Przedkliniczne modele zwierzęce o cechach hemodynamicznych, morfologicznych i histologicznych zbliżonych do ludzkich tętniaków wewnątrzczaszkowych odgrywają kluczową rolę w zrozumieniu procesów patofizjologicznych oraz rozwoju i testowaniu nowych strategii terapeutycznych. Badanie to ma na celu opisanie nowego modelu tętniaka królika, który umożliwia stworzenie dwóch tętniaków workowatych trawionych elastazą z różnymi warunkami hemodynamicznymi u tego samego zwierzęcia.
Pięć samic białych królików z Nowej Zelandii o średniej wadze 4,0 (± 0,3) kg i średnim wieku 25 (±5) tygodni przeszło mikrochirurgiczne stworzenie tętniaka kikuta i bifurkacji. Jeden tętniak (kikut) powstał w wyniku odsłonięcia prawej tętnicy szyjnej wspólnej (CCA) u jej początku w pniu ramienno-głowowym. Tymczasowy klips został nałożony na początek CCA i drugi, 2 cm powyżej. Odcinek ten leczono miejscowym wstrzyknięciem 100 j. elastazy przez 20 minut. Drugi tętniak (rozwidlenie) powstał przez zszycie worka tętniczego potraktowanego elastazą do zespolenia końca do boku prawego CCA do lewego CCA. Drożność kontrolowano za pomocą angiografii fluorescencyjnej bezpośrednio po stworzeniu.
Średni czas trwania operacji wynosił 221 min. Stworzenie dwóch tętniaków u tego samego zwierzęcia powiodło się u wszystkich królików bez komplikacji. Wszystkie tętniaki zostały wykryte bezpośrednio po operacji, z wyjątkiem jednego tętniaka bifurkacji, który wykazał ekstremalną reakcję tkankową spowodowaną inkubacją elastazy i natychmiastową zakrzepicą śródświatełkową. Nie zaobserwowano śmiertelności podczas operacji i do miesięcznej obserwacji. Zachorowalność ograniczała się do przemijającego zespołu przedsionkowego (jeden królik), który ustępował samoistnie w ciągu jednego dnia.
Tutaj po raz pierwszy zademonstrowano możliwość stworzenia modelu królika z dwoma tętniakami o cechach hemodynamicznych kikuta i bifurkacji oraz wysoce zdegenerowanych warunkach ścian. Model ten pozwala na badanie naturalnego przebiegu i potencjalnych strategii leczenia na podstawie biologii tętniaka w różnych warunkach przepływu.

Utworzenie kikuta oraz tętniaka bifurkacyjnego przebiegło pomyślnie u wszystkich 5 królików białych nowozelandzkich, bez powikłań śródoperacyjnych. Nie odnotowano żadnych zgonów podczas operacji ani w okresie obserwacji trwającym 24 ± 2 dni. U jednego królika wystąpiły powikłania pooperacyjne w postaci zespołu przedsionkowego oraz ślepoty prawostronnej. Zwierzę powróciło do pełnej sprawności spontanicznie po 24 h. Powikłanie to nie zakłóciło jego normalnej aktywności ( swobodnego poruszania się, pobierania wody i pokarmu...

Ten protokół opisuje etapy tworzenia modelu królika z dwoma tętniakami trawionymi elastazą o różnej hemodynamice (konstelacja kikuta i bifurkacji). Pozwala to na testowanie nowatorskich urządzeń wewnątrznaczyniowych w tętniakach o różnej angioarchitekturze i warunkach hemodynamicznych w obrębie jednego zwierzęcia.

Stworzenie dwóch tętniaków trawionych elastazą workowatą o różnej hemodynamice u jednego królika

Preclinical animal models with hemodynamic, morphologic, and histologic characteristics close to human intracranial aneurysms play a key role in the ...

Nasz protokół opisuje powtarzalną technikę tworzenia modelu tętniaków królika z hemodynamiką zarówno kikuta, jak i bifurkacji oraz stanem zdegenerowanej ściany u jednego zwierzęcia i podczas jednego dostępu chirurgicznego z niskimi wskaźnikami zachorowalności i śmiertelności oraz wysokimi wskaźnikami drożności. Model pozwala na bezpośrednie porównanie naturalnego przebiegu tętniaków worka workowego pod kątem roli hemodynamiki, a także na badanie urządzeń wewnątrznaczyniowych w dwóch różnych konfiguracjach tętniaków i warunkach przepływu. Główna wada tej metody pozostaje taka sama, jak w przypadku stworzenia klasycznego modelu bifurkacji i tętniaków kikuta, potrzeba wyrafinowanego sprzętu laboratoryjnego i specyficznych umiejętności mikrochirurgicznych.Użyj skalpela, aby wykonać środkowe nacięcie skóry od kości gnykowej do 1,5 centymetra ogonowego do manubrium sterni. Przygotuj tkankę podskórną i tłuszczową z nacięcia przyśrodkowego, wykonując skrupulatną hemostazę. Uwolnij mięsień mostkowy od przylegającej tkanki łącznej i stosuj miejscowo lidokainę, aby uniknąć mioklonie.Odsłoń prawą tętnicę szyjną wspólną lub CCA przyśrodkowo mięśnia mostka i utrzymuj ją wilgotną za pomocą mokrych wacików. Przygotuj boczne i proksymalne części mięśnia mostka i wsuń go przyśrodkowo za pomocą pętli naczynia, aby odsłonić CCA. Zidentyfikuj żyłę szyjną zewnętrzną i zabezpiecz ją wilgotnym mikrowacikiem.Ostrożnie wypreparuj tkankę łączną wzdłuż CCA, aż do rozwidlenia pnia ramienno-głowowego, aby odsłonić tętnicę. Jeśli z tętnicy wyłaniają się małe gałęzie, skoaguluj je kauteryzatorem. Zastosuj dwa tymczasowe klipsy, z których pierwszy znajduje się na początku CCA, a drugi dwa centymetry dystalnie od niego.Umieść gumową podkładkę pod naczyniem i spłucz chlorowodorkiem papaweryny w celu rozszerzenia naczyń krwionośnych. Ostrożnie usuń przydankę za pomocą mikronożyczek. Wykonaj arteriotomię poniżej klipsa dystalnego za pomocą czterocewnika o rozmiarze 22 i wprowadź cewnik doogonowo do klipsa proksymalnego.Przepłukać segment śródświetlne heparynizowanym chlorkiem sodu, aż nie będzie widać krwi. Następnie zamocuj cewnik za pomocą ligatury 4-0. Przez cewnik wstrzyknąć od 0,1 do 0,2 mililitra elastazy do odcinka tętnicy i inkubować przez 20 minut.Po 20 minutach inkubacji z elastazą, wyczyść roztwór elastazy i zmień strzykawkę, aby przepłukać odcinek tętnicy około 10 razy 0,9% solą fizjologiczną. Zastosuj dwie ligatury, z których pierwsza znajduje się na pięciu milimetrach dystalnie od bliższego klipsa, a druga tuż proksymalnie pod arteriiotomią. Przeciąć naczynie około trzech milimetrów powyżej pierwszej ligatury i jeszcze raz między drugą ligaturą a dystalnym klipsem.Przechowuj ten autologiczny przeszczep w roztworze heparynizowanym do momentu powstania tętniaka bifurkacji. Ostrożnie otwórz pierwszy zacisk proksymalny i zmierz tętniaka. Aby utworzyć tętniaka bifurkacji, ostrożnie usuń przydankę i wykonaj około dwumilimetrowe podłużne nacięcie boczne w kikutu prawego CCA.Zastosuj dwa tymczasowe klipsy po lewej stronie CCA, aby wyznaczyć segment o około jeden centymetr i usuń przydankę pomiędzy nimi. Wykonaj arteriotomię za pomocą igły o rozmiarze 23. Następnie przepłukać segment heparynizowanym chlorkiem sodu.Powiększ arteriotomię za pomocą mikronożyczek do około czterech do pięciu milimetrów, aby umożliwić zszycie prawego CCA i worka tętniaka. Aby wykonać zespolenie, należy zszyć bliższą tylną ścianę prawej tętnicy szyjnej pięcioma szwami, zaczynając od bliższej krawędzi arteriotomii po lewej stronie CCA. Następnie zszyj tylną stronę worka tętniaka czterema do pięciu szwów, zaczynając od dystalnej krawędzi arteriotomii po lewej stronie CCA.Kontynuuj z dystalną tylną stroną na poziomie nacięcia w jamie ustnej ryby, aby zszyć pionową tylną stroną przeszczepu tętniaka za pomocą trzech szwów. Zszyj przednią stronę nacięcia pyska ryby trzema szwami, zaczynając od góry i przesuwając się w dół. Zakończ przednim szwem między lewym CCA a przednią stroną przeszczepu tętniaka i prawym CCA za pomocą około sześciu szwów.Przed zakończeniem zespolenia należy przepłukać naczynia heparynizowanym 0,9% roztworem soli fizjologicznej doświetlnie. Zdejmij klips z prawego CCA, wywierając pewien nacisk na zespolenie za pomocą mikrowacików do hemostazy. Następnie kontynuuj, usuwając dystalny zacisk z lewego CCA.Jeśli nie ma poważnego krwawienia, kontynuuj wyjmowanie bliższego klipsa z lewego CCA, aby umożliwić przepływ krwi. W obserwacji drożność tętniaka potwierdzono angiografią rezonansu magnetycznego. Pokazano trójwymiarową sekwencję TOF uzyskaną za pomocą rezonansu magnetycznego o masie trzech tesli skoncentrowanego na tętnicach szyjnych.Tętniak kikuta obserwuje się na prawej tętnicy podobojczykowej, a tętniak bifurkacyjny obserwuje się na rozwidleniu powstałym w wyniku zespolenia prawego CCA na lewej tętnicy podobojczykowej. Drożność tętniaka potwierdzono również w badaniu makroskopowym po ekstrakcji tkanki. Główne rowki na klipsie wskazują jeden milimetr, a mniejsze rowki wskazują 0,5 milimetra.Analizę mikroskopową tętniaków kikuta i bifurkacji przeprowadzono po wybarwieniu próbek hematoksyliną-eozyną. Podczas operacji kluczowe są dwa etapy, po pierwsze, odsłonięcie i rozwarstwienie prawej tętnicy szyjnej aż do pnia ramienno-głowowego, a po drugie, ochrona ważnych struktur, takich jak tchawica, żyła szyjna i nerw krtaniowy.

creation-two-saccular-elastase-digested-aneurysms-with-different

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

W niniejszym filmie pokazano, jak indukować tętniaki aorty brzusznej (AAA) u myszy poprzez przejściową infuzję wewnątrznaczyniową elastazy trzustkowej pochodzenia świńskiego do odcinka podnerkowego aorty brzusznej. Model ten pozwala na uzyskanie szerokiego wglądu w patobiologię AAA dzięki dostępności licznych myszy transgenicznych i z nokautem genowym.

Wytwarzanie eksperymentalnych tętniaków aorty brzusznej u myszy z użyciem elastazy

Opisano zoptymalizowaną technikę mikrosurgicalnego tworzenia tętniaków rozwidleń tętniczych, naśladujących ludzkie tętniaki rozwidleń naczyń mózgowych. Torebka żylna zostaje wszyta w sztucznie stworzone prawdziwe rozwidlenie obu tętnic szyjnych wspólnych. Zastosowanie ułatwionych technik mikrosurgicalnych oraz agresywnego przeciwkrzeplenia i analgezji pooperacyjnej prowadzi do zminimalizowania wskaźników zachorowalności oraz wysokiego stopnia drożności tętniaków.

Mikrochirurgiczne tętniaki rozwidleń tętniczych z wykorzystaniem zastawki żylnej w modelu królika: aspekty techniczne

Źródło: Wanderer, S.,  i inni. Model tętniaka mikrochirurgicznego bifurkacji u królika. J. Vis. Exp. (2020)Ten film pokazuje tworzenie eksperymentalnego modelu tętniaka u królika przy użyciu torebki naczyniowej poddanej elastazie. Po wycięciu fragmentu prawego CCA, worek jest traktowany elastazą, a następnie zszywany do lewego CCA w celu przywrócenia przepływu krwi. Powstałe naprężenia na osłabionych ściankach worka indukują powstawanie tętniaka.

Opracowanie eksperymentalnego modelu tętniaka u królika przy użyciu torebki naczyniowej nasączonej elastazą

Wprowadzenie cewnika poliuretanowego do światła aorty i podwiązanie szwem aorty powoduje przewlekłe niedotlenienie z powodu hipoperfuzji naczynia krwionośnego przybyszowego. W artykule opisano nowy zwierzęcy model tętniaka aorty brzusznej (AAA) o charakterystyce podobnej do AAA u ludzi.

Stworzenie modelu tętniaka aorty brzusznej u gryzoni poprzez zablokowanie przybyszowej perfuzji naczynia krwionośnego

Rozwój i testowanie urządzeń wewnątrznaczyniowych do leczenia tętniaków wewnątrzczaszkowych jest nadal bardzo ważne. Większość stosowanych obecnie modeli tętniaków pomija albo ważne cechy zwyrodniałej ściany tętnicy, albo hemodynamikę prawdziwego rozwidlenia. Dlatego naszym celem było zaprojektowanie nowatorskiego modelu bifurkacji worka tętniczego u królików.

Worek tętniczy Model tętniaka bifurkacji mikrochirurgicznej u królika

Obecny protokół opisuje ustandaryzowaną metodę chirurgiczną dla modelu AAA wywołanego elastazą poprzez bezpośrednie zastosowanie elastazy do przydanki podnerkowej aorty brzusznej u myszy.

Mysi model tętniaka aorty brzusznej indukowany przez okołonaczyniowe zastosowanie elastazy

Tutaj opisujemy technikę mikrochirurgicznego tworzenia gigantycznych tętniaków bifurkacyjnych u królików w celu oceny urządzeń wewnątrznaczyniowych.

Mikrochirurgiczne tworzenie gigantycznych tętniaków bifurkacji u królików w celu oceny urządzeń wewnątrznaczyniowych

Ten manuskrypt przedstawia protokół tworzenia mysiego modelu tętniaka aorty brzusznej myszy przy użyciu chlorku wapnia i elastazy, łącząc zalety poprzednich metod modelowania. Model ten można wykorzystać do badania mechanizmów patofizjologicznych leżących u podstaw tętniaków aorty brzusznej.

Mysi model tętniaka aorty brzusznej za pomocą okołoprzybytkowego nacieku chlorku wapnia i elastazy

Ten protokół zapewnia powtarzalną i niezawodną metodę wywoływania tętniaków tętnicy brzusznej (TTB) u myszy C57BL/6 przy użyciu uczulenia elastyny i przynaczynowego stosowania elastazy, jako model TTB, który obejmuje komponent uczulenia immunologicznego.

Wiarygodne stworzenie modelu tętniaka tętnicy brzusznej u myszy przy użyciu uczulenia na elastynę i peryvaskularnej elastazy

Cholestaza jest stanem klinicznym często spotykanym zarówno w praktyce chirurgów, jak i gastroenterologów. Stworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczura może być trudne ze względu na niewielki rozmiar oraz specyficzną anatomię hepatopankreatobiliarnej tych zwierząt. Niniejszy artykuł wideo prezentuje sposób stworzenia odwracalnego modelu cholestazy.

Tworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczura

Poznaj technikę tworzenia modelu tętniaka u królika z dwoma różnymi warunkami hemodynamicznymi w jednym zwierzęciu. Ta metoda umożliwia testowanie nowych urządzeń endowaskularnych przy niskiej śmiertelności.

Stworzenie dwóch tętniaków trawionych elastazą workowatą o różnej hemodynamice u jednego królika

Przeglądaj więcej filmów