Stworzenie dwóch tętniaków trawionych elastazą workowatą o różnej hemodynamice u jednego królika

Nasz protokół opisuje powtarzalną technikę tworzenia modelu tętniaków królika z hemodynamiką zarówno kikuta, jak i bifurkacji oraz stanem zdegenerowanej ściany u jednego zwierzęcia i podczas jednego dostępu chirurgicznego z niskimi wskaźnikami zachorowalności i śmiertelności oraz wysokimi wskaźnikami drożności. Model pozwala na bezpośrednie porównanie naturalnego przebiegu tętniaków worka workowego pod kątem roli hemodynamiki, a także na badanie urządzeń wewnątrznaczyniowych w dwóch różnych konfiguracjach tętniaków i warunkach przepływu. Główna wada tej metody pozostaje taka sama, jak w przypadku stworzenia klasycznego modelu bifurkacji i tętniaków kikuta, potrzeba wyrafinowanego sprzętu laboratoryjnego i specyficznych umiejętności mikrochirurgicznych.

Użyj skalpela, aby wykonać środkowe nacięcie skóry od kości gnykowej do 1,5 centymetra ogonowego do manubrium sterni. Przygotuj tkankę podskórną i tłuszczową z nacięcia przyśrodkowego, wykonując skrupulatną hemostazę. Uwolnij mięsień mostkowy od przylegającej tkanki łącznej i stosuj miejscowo lidokainę, aby uniknąć mioklonie.

Odsłoń prawą tętnicę szyjną wspólną lub CCA przyśrodkowo mięśnia mostka i utrzymuj ją wilgotną za pomocą mokrych wacików. Przygotuj boczne i proksymalne części mięśnia mostka i wsuń go przyśrodkowo za pomocą pętli naczynia, aby odsłonić CCA. Zidentyfikuj żyłę szyjną zewnętrzną i zabezpiecz ją wilgotnym mikrowacikiem.

Ostrożnie wypreparuj tkankę łączną wzdłuż CCA, aż do rozwidlenia pnia ramienno-głowowego, aby odsłonić tętnicę. Jeśli z tętnicy wyłaniają się małe gałęzie, skoaguluj je kauteryzatorem. Zastosuj dwa tymczasowe klipsy, z których pierwszy znajduje się na początku CCA, a drugi dwa centymetry dystalnie od niego.

Umieść gumową podkładkę pod naczyniem i spłucz chlorowodorkiem papaweryny w celu rozszerzenia naczyń krwionośnych. Ostrożnie usuń przydankę za pomocą mikronożyczek. Wykonaj arteriotomię poniżej klipsa dystalnego za pomocą czterocewnika o rozmiarze 22 i wprowadź cewnik doogonowo do klipsa proksymalnego.

Przepłukać segment śródświetlne heparynizowanym chlorkiem sodu, aż nie będzie widać krwi. Następnie zamocuj cewnik za pomocą ligatury 4-0. Przez cewnik wstrzyknąć od 0,1 do 0,2 mililitra elastazy do odcinka tętnicy i inkubować przez 20 minut.

Po 20 minutach inkubacji z elastazą, wyczyść roztwór elastazy i zmień strzykawkę, aby przepłukać odcinek tętnicy około 10 razy 0,9% solą fizjologiczną. Zastosuj dwie ligatury, z których pierwsza znajduje się na pięciu milimetrach dystalnie od bliższego klipsa, a druga tuż proksymalnie pod arteriiotomią. Przeciąć naczynie około trzech milimetrów powyżej pierwszej ligatury i jeszcze raz między drugą ligaturą a dystalnym klipsem.

Przechowuj ten autologiczny przeszczep w roztworze heparynizowanym do momentu powstania tętniaka bifurkacji. Ostrożnie otwórz pierwszy zacisk proksymalny i zmierz tętniaka. Aby utworzyć tętniaka bifurkacji, ostrożnie usuń przydankę i wykonaj około dwumilimetrowe podłużne nacięcie boczne w kikutu prawego CCA.

Zastosuj dwa tymczasowe klipsy po lewej stronie CCA, aby wyznaczyć segment o około jeden centymetr i usuń przydankę pomiędzy nimi. Wykonaj arteriotomię za pomocą igły o rozmiarze 23. Następnie przepłukać segment heparynizowanym chlorkiem sodu.

Powiększ arteriotomię za pomocą mikronożyczek do około czterech do pięciu milimetrów, aby umożliwić zszycie prawego CCA i worka tętniaka. Aby wykonać zespolenie, należy zszyć bliższą tylną ścianę prawej tętnicy szyjnej pięcioma szwami, zaczynając od bliższej krawędzi arteriotomii po lewej stronie CCA. Następnie zszyj tylną stronę worka tętniaka czterema do pięciu szwów, zaczynając od dystalnej krawędzi arteriotomii po lewej stronie CCA.

Kontynuuj z dystalną tylną stroną na poziomie nacięcia w jamie ustnej ryby, aby zszyć pionową tylną stroną przeszczepu tętniaka za pomocą trzech szwów. Zszyj przednią stronę nacięcia pyska ryby trzema szwami, zaczynając od góry i przesuwając się w dół. Zakończ przednim szwem między lewym CCA a przednią stroną przeszczepu tętniaka i prawym CCA za pomocą około sześciu szwów.

Przed zakończeniem zespolenia należy przepłukać naczynia heparynizowanym 0,9% roztworem soli fizjologicznej doświetlnie. Zdejmij klips z prawego CCA, wywierając pewien nacisk na zespolenie za pomocą mikrowacików do hemostazy. Następnie kontynuuj, usuwając dystalny zacisk z lewego CCA.

Jeśli nie ma poważnego krwawienia, kontynuuj wyjmowanie bliższego klipsa z lewego CCA, aby umożliwić przepływ krwi. W obserwacji drożność tętniaka potwierdzono angiografią rezonansu magnetycznego. Pokazano trójwymiarową sekwencję TOF uzyskaną za pomocą rezonansu magnetycznego o masie trzech tesli skoncentrowanego na tętnicach szyjnych.

Tętniak kikuta obserwuje się na prawej tętnicy podobojczykowej, a tętniak bifurkacyjny obserwuje się na rozwidleniu powstałym w wyniku zespolenia prawego CCA na lewej tętnicy podobojczykowej. Drożność tętniaka potwierdzono również w badaniu makroskopowym po ekstrakcji tkanki. Główne rowki na klipsie wskazują jeden milimetr, a mniejsze rowki wskazują 0,5 milimetra.

Analizę mikroskopową tętniaków kikuta i bifurkacji przeprowadzono po wybarwieniu próbek hematoksyliną-eozyną. Podczas operacji kluczowe są dwa etapy, po pierwsze, odsłonięcie i rozwarstwienie prawej tętnicy szyjnej aż do pnia ramienno-głowowego, a po drugie, ochrona ważnych struktur, takich jak tchawica, żyła szyjna i nerw krtaniowy.