Kliniczna mikroprzepływowa platforma chipowa do izolacji wszechstronnych krążących komórek nowotworowych

Protokół ten opisywał metodę liczenia czerwonych komórek nowotworowych i klinicznej izolacji CTC. Na początek hoduj komórki nowotworowe MCF-7, MDA-MB-231 i HeLa w kolbie do hodowli komórkowej raz 10 do jednej piątej w jednym milimetrze DMEM, uzupełnionym 10% płodową surowicą bydlęcą i 1% penicyliną-streptomycyną. Inkubuj komórki w temperaturze 37 stopni Celsjusza z 5% dwutlenkiem węgla.

Gdy linie komórkowe wyrosną jako przylegające monowarstwy do 95% konfluencji, odłącz je od naczynia hodowlanego z 0,25% roztworem trypsyny na dwie minuty. Wybarwić komórki nowotworowe, dodając trzy mikrolitry Calceiny AM i umieścić naczynie w inkubatorze na 30 minut. Pod koniec inkubacji trawić wszystkie komórki trypsyną.