Summary
Yeterli anestezi altında, fare kalbi interkostal boşluktan dışsallaştırıldı ve miyokard enfarktüsü, çoğu laboratuvarda kolayca bulunabilen malzemeler kullanılarak sol ön inen arteri (LAD) bağlayarak başarılı bir şekilde indüklendi.
Abstract
Miyokard enfarktüsü (MI) önde gelen ölüm nedenlerinden biridir. MI modelleri, MI sonrası yeniden şekillenmenin patomekanizmalarını araştırmak ve yeni terapötiklerin değerlendirilmesi için yaygın olarak kullanılmaktadır. MI'yı indüklemek için farklı yöntemler (örneğin, izoproterenol tedavisi, kriyoinjury, koroner arter ligasyonu, vb.) kullanılmıştır. İzoproterenol tedavisi ve kriyoyaralanma ile karşılaştırıldığında, koroner arter ligasyonu, MI sonrası iskemik yanıtı ve kronik yeniden şekillenmeyi daha iyi yansıtabilir. Bununla birlikte, farelerde koroner ligasyon için geleneksel yöntemler teknik olarak zordur. Bu çalışma, farelerde MI'nın indüksiyonu için basit ve verimli bir süreci hazır malzemelerle açıklamaktadır. Fare göğüs derisi stabil anestezi altında kesilerek açıldı. Kalp, pektoralis majör ve pektoralis minör künt olarak ayrıldıktan sonra interkostal boşluktan hemen dışsallaştırıldı. Sol ön inen dal (LAD) orijinden 3 mm kala 6-0 sütür ile bağlandı. LAD ligasyonunu takiben, 2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür (TTC) ile boyama, MI'nın başarılı bir şekilde indüksiyonunu ve MI sonrası skar boyutunun zamansal değişikliklerini gösterdi. Bu arada, sağkalım analizi sonuçları, esas olarak kalp rüptürüne bağlı olarak, MI'dan sonraki 7 gün içinde açık mortalite gösterdi. Ayrıca, MI sonrası ekokardiyografik değerlendirme, kontraktil disfonksiyonun ve ventriküler yeniden şekillenmenin başarılı bir şekilde indüklendiğini gösterdi. Bir kez ustalaştıktan sonra, farelerde 2-3 dakika içinde hazır malzemelerle bir MI modeli oluşturulabilir.
Introduction
Miyokard enfarktüsü (MI) dünya çapında önemli ölüm ve sakatlık nedenlerinden birini temsil eder 1,2,3,4,5. Zamanında reperfüzyona rağmen, şu anda MI sonrası kardiyak yeniden şekillenmeyi tedavi etmek için etkili tedaviler eksikliği vardır. Buna bağlı olarak, MI 6,7,8 için mekanik keşif ve terapi kullanımı için önemli çabalar sarf edilmiştir. Dikkat çekici bir şekilde, MI modellerinin kurulması bu amaçlara ulaşmak için bir ön koşuldur.
Küçük hayvanlarda MI modellerini indüklemek için çeşitli yöntemler (örneğin, izoproterenol tedavisi, kriyohasar, koroner arter ligasyonu, vb.) önerilmiştir. İzoproterenol tedavisi, MI indüksiyonu için basit bir yöntemdir, ancak hedeflenen alanın enfarktüsünü indükleyemez9. Kriyoyaralanma, doğrudan iskemi10'dan ziyade buz kristallerinin oluşumu ve hücre zarının bozulması yoluyla miyokardiyal nekroza yol açar. Buna karşılık, koroner arter ligasyonu, oklüzyon bölgesinin ve enfarktüs alanının kapsamının hassas kontrolüne izin verir ve enfarktüs sonrası yeniden şekillenme yanıtını aslına uygun olarak özetler11,12. Koroner arter ligasyonu tipik olarak entübasyon, mekanik ventilasyon ve teknik olarak zor olan torakotomi sonrasında gerçekleştirilir13,14. Koroner arter ligasyonu için çeşitli modifiye protokoller bildirilmiştir (ör., ventilasyon serbest) ve MI indüksiyonunu güçlendirmiştir, ancak ayrıntılı görsel gösterimler eksiktir15,16,17. Bu sorunlar, MI modellerini kullanarak araştırma yapmak isteyen gruplar için önemli bir finansal ve teknik engel oluşturmaktadır. Bu rapor, farelerde MI'nın indüksiyonu için bir yaklaşım sunmaktadır. Mevcut yöntem kolaydır, zaman kazandırır ve çoğu laboratuvarda kolayca bulunan cerrahi alet ve ekipmanları kullanır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Hayvan çalışmalarını içeren deneyler, Şanghay Jiao Tong Üniversitesi Tıp Fakültesi, Renji Hastanesi Laboratuvar Hayvanları Refahı Etik Kurulu'ndan (R52021-0506) gerekli tüm onaylarla gerçekleştirilir. Çalışmada 8-10 hafta arasında değişen dişi ve erkek C57BL/6J fareler kullanıldı.
1. Basitleştirilmiş anestezi ekipmanının hazırlanması (OPSİYONEL)
NOT: Bu, isteğe bağlı bir ameliyat öncesi kurulumdur ve bölüm 2'de belirtildiği gibi titre edilebilir anestezi ile değiştirilebilir. Bu düzen hayvan prosedürlerine uyarlanmadan önce kurumsal hayvan etik kuruluna ve veteriner hekim(ler)e danışılmalıdır.
- 15 mL'lik bir santrifüj tüpü alın ve açıklıktan yaklaşık 3 cm uzakta tüpün uzun eksenine dik bir kesim yapın.
NOT: Valfin başarılı bir şekilde yerleştirilebilmesi için kesimin boru lümeninin dairesel çevresinin yarısından büyük olduğundan emin olun. - Kesim ve tüp açıklığı arasındaki santrifüj tüpü duvarında delikler (çap, 2 mm) açın.
- Plastik bir tabakadan valfin uygun boyutta bir parçasını kesin ve valfi boru duvarındaki oyuğa yerleştirin.
NOT: Valf, yerleştirme derinliğini değiştirerek izofluranın salım hızını kontrol etmek için kullanılabilir. - Bir çeker ocak içinde, tüpün altını kesin ve oksijen kaynağına bağlayın. Tüpün alt ucuna yakın bir pamuk top yerleştirin, pamuk topunun üzerine 0.5 mL izofluran (elde edildiği gibi, Malzeme Tablosuna bakın) yükleyin ve valfi kapatın.
- Fareleri yukarıda tarif edildiği gibi hazırlanmış tüplerle maskeleyerek anestezi etkinliğini test edin. Solunum hızını ve anestezi derinliğini ayak parmağı sıkışma tepkisi ile izleyin.
NOT: Solunum hızının 10 kez/10 saniyeden az olması aşırı anestezi olduğunu gösterir ve valfin yerleştirme derinliği ayarlanmalıdır. Anestezi içeren tüm işlemler için içi aktif karbon levhalarla dolu bir gaz filtresi kullanılmalı (Şekil 1A-i) ve ameliyat bir başlık içinde yapılmalıdır.
2. Operatif hazırlık ve anestezi
- Bir çift forseps, bir mikro sivrisinek kanama durdurucu, bir çift cerrahi makas, iki çift iğne tutucu, 4-0 ipek cerrahi sütür, 6-0 ipek cerrahi sütür, bir gaz filtresi ve bir ışık kaynağı dahil olmak üzere ameliyat gününde gerekli tüm aletleri hazırlayın ve sterilize edin (bkz. Malzeme Tablosu) (Şekil 1A).
- Cerrahi maske ve steril eldiven giyin.
- Tüy dökücü kremi fare göğsüne sürün ve 1 dakika bekleyin. Tüy dökücü kremi ve saçı ıslak gazlı bezle nazikçe silin.
- Epilasyondan sonra fareyi baskın elinizle tutun. Buharlaştırılmış izofluranın (% 4) oksijen kaynağı (1L / dak) ile solunması yoluyla anesteziyi indükleyin ve% 2-3 izofluranda tutun.
- Ayak parmağı sıkışma tepkisi eksikliği ile yeterli anesteziyi onaylayın.
- Kornea kuruluğunu önlemek için her iki göze de steril göz kremi uygulayın.
- Fareleri sırtüstü pozisyonda bir ameliyat platformuna sabitleyin. Povidon-iyot bezlerini göğsüne üç kez uygulayın ( Malzeme Tablosuna bakınız) ve dezenfekte edilmiş göğsü steril bir örtü ile örtün.
3. Miyokard enfarktüsünün indüksiyonu
- Steriliteyi sağlamak için kontamine eldivenleri değiştirin.
- Lidokain ile lokal bloktan sonra ksifoid ve koltuk altını birleştiren çizgi boyunca 0,5 cm'lik bir cilt kesimi yapın.
- Dördüncü interkostal boşluğu ortaya çıkarmak için forseps ve bir mikro-sivrisinek hemostatı kullanarak pektoral majör ve pektoral minör kasları künt olarak ayırın.
- Bir mikro sivrisinek hemostatı kullanarak dördüncü interkostal boşluğu açın.
- Sol elin işaret parmağı ile kalbi dördüncü interkostal boşluğa doğru iterek kalbi dışsallaştırın.
- Sol el ile kalbi sabitleyin ve sol ön inen dalı orijinden 3 mm uzakta 6-0 dikişle bağlayın.
- Kalbi hızlı bir şekilde göğüs boşluğuna geri yerleştirin.
NOT: Kalbi 30 saniyeden daha kısa bir süre için dışsallaştırmak güvenlidir. - Göğüs boşluğuna manuel olarak hafifçe bastırarak göğüs boşluğundaki havayı boşaltın.
- Kaburgaların üzerindeki kas tabakasını 6-0 ipek dikiş ile kapatın.
- Cildi 4-0 ipek dikiş ile kapatın.
- İşlemden hemen sonra fareleri bir ped (37 °C) üzerine yerleştirin.
- Ameliyat sonrası ağrıyı 72 saate kadar azaltmak için her 4-6 saatte bir deri altına buprenorfin (0.05-0.1 mg / kg) enjekte edin.
- Tamamen iyileştiğinde ameliyat edilen fareleri kafeslere geri koyun.
NOT: Fareler ameliyattan sonra 3-5 dakika içinde tamamen iyileşecektir. - Fareleri dikkatlice izleyin ve 7 güne kadar ıslak yiyecek sağlayın.
4. Dokuların toplanması
- Servikal çıkık ile MI kurulduktan sonra fareleri farklı zaman noktalarında feda edin.
- Kurban edilen fareleri sırtüstü pozisyonda ameliyat platformuna sabitleyin.
- Üst karın bölgesinde ventral bir kesi (~ 3-4 cm) yapın. Göğüs boşluğunun her iki tarafındaki kaburgaları kesin ve diyaframı çıkarın.
- İntraventriküler enjeksiyon yoluyla kalbi 10 mL soğuk fosfat tamponlu salin (1x PBS, 4 °C) ile perfüze edin.
- Aort kökünü keserek kalbi toplayın ve kalbi hemen -80 °C'de saklayın.
NOT: Yazarların deneyimlerine göre, depolamadan sonraki iki hafta içinde TTC boyama yapmak mümkündür. - Kalbi 2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür (TTC) ile boyayın.
- Donmuş kalbi jiletle buz üzerinde 1 mm kalınlığında bölümler halinde dilimleyin.
- Hazırlanan kalp dilimlerini %1 TTC solüsyonunda (1x PBS'de çözülmüş) 37 °C'de 10-15 dakika inkübe edin.
NOT: 15 dakikalık inkübasyondan sonra, TTC solüsyonunu atın ve lekeli kalp dilimlerini 1x PBS'ye daldırın.
- Bir dijital kamera kullanarak dilimlerin fotoğrafını çekin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Deneysel protokol ve bazı kritik adımlar Şekil 1'de gösterilmektedir. Basitleştirilmiş anestezi ekipmanı anesteziye neden oldu. Şekil 2A'da gösterildiği gibi, indüklenen anestezi, düzenli solunum hızlarının yansıttığı gibi stabildi (test edilen farelerde 90-107 nefes / dak arasında değişmiştir). Koroner arter ligasyonunu takiben, TTC boyama analizi, miyokard enfarktüsünün başarılı bir şekilde indüklendiğini ve MI sonrası skar boyutunda zamansal değişiklikleri gösterdi (Şekil 2B). Bu arada, sağkalım analizi sonuçları, erkek ve dişi C57BL / 6J farelerinde MI'dan sonraki 7 gün içinde açık mortalite gösterdi (Şekil 2C, D). Ventriküler rüptür (erkek farelerde %56; dişi farelerde %40) MI sonrası ölümün yaygın bir nedeniydi. Ayrıca, MI sonrası ekokardiyografik değerlendirme, kontraktil disfonksiyon ve ventriküler yeniden şekillenmenin başarılı bir şekilde indüklendiğini gösterdi (Şekil 2E, F).
Şekil 1: MI indüksiyonu için modifiye edilmiş yöntemlerdeki malzemeler ve kritik adımlar . (A) Bu protokol için gerekli cerrahi aletler ve malzemeler. (a) 4-0 ipek sütür. (b) 6-0 ipek sütür. (c) Forseps. (d) Makas. (e-f) İğne tutucular. (g) Mikro sivrisinek kanama durdurucu. (h) Işık kaynağı. (i) Gaz filtresi. (B) Farelerde MI'yı indüklemek için temel adımları gösteren temsili resimler. (a) Fare anesteziden sonra sabitlendi ve cerrahi bölgeye povidon-iyot uygulandı. (b) Ameliyat bölgesi örtülür. (c) Lidokain ile lokal bloklamadan sonra cerrahi bölgede 0,5 cm'lik bir kesi. (d) Açıkta kalan kaburgalar. Ok kaburgaları gösterir. (e) Dördüncü interkostal boşluğu ortaya çıkarmak için pektoral majör ve pektoral minör kasları diseke etti. (f) Dışsallaştırılmış kalp. (g-h) 6-0 ipek sütür ile bağlanmış LAD. Ok, LAD'yi gösterir. (i) Kalp tekrar göğüs boşluğuna yerleştirilir. (j) Göğüs boşluğundan hava boşaltıldı. (k) Kas tabakası kaburgaların üzerine 6-0 ipek sütür ile kapatıldı ve deri 4-0 ipek sütür ile kapatıldı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: Koroner arter ligasyonu sonrası histolojik ve fonksiyonel değişiklikler. (A) Basitleştirilmiş anestezi ekipmanı ile uyuşturulan farelerde solunum hızları (n = 10). (B ) Kalp dilimlerinin (her kalpten 4 dilim) TTC boyama sonuçları MI sonrası farklı zaman noktalarında toplandı. Beyaz alan enfarktüslü bir alanı gösterdi ve kırmızı alan canlı miyokard ortaya çıkardı. (C) Kaplan-Meier eğrisi, erkek farelerde MI sonrası ölüm oranını gösterir (grup başına n = 20). (D) Kaplan-Meier eğrisi, dişi farelerde MI sonrası ölüm oranını gösterir (grup başına n = 20). (E) MI'dan sonra farklı zaman noktalarında ekokardiyografik analizin temsili görüntüleri (sahte, 3 gün, 7 gün, 21 gün ve MI'dan 28 gün sonra). (F) Belirtilen gruplar arasında sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonu (LVEF), sol ventrikül fraksiyonel kısalması (LVFS), sol ventrikül sonu sistolik çapı (LVsD) ve sol ventrikül diyastol sonu boyutu (LVdD) değerlerinin kantitatif analizi (grup başına n=5). **p<0.01 veya ***p<0.001 vs. sahte; ##p<0.01 veya ###p<0.001 vs. MI'dan 3 gün sonra. İstatistiksel analiz için posthoc Tukey HSD (Honestly Significant Difference) testi ile tek yönlü varyans analizi yapıldı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu rapor, Gao16 tarafından bildirilen bir yöntemden modifiye edilen, hazır materyallere sahip farelerde MI indüksiyonu için kolay bir protokol göstermiştir. Murine MI modelleri, MI sonrası disfonksiyon ve yeniden şekillenme için mekanik keşif ve ilaç taraması için vazgeçilmezdir12. MI indüksiyonu için mevcut teknikler arasında koroner arter ligasyonu en sık uygulananı temsil eder. Koroner arter ligasyonu, miyokard enfarktüsünün iskemi doğasını sadık bir şekilde özetler ve klinik senaryoya benzer bir yara iyileşmesi ve yeniden şekillenme yanıtına yol açar18,19. Bununla birlikte, koroner arter ligasyonu için geleneksel protokol, teknik olarak zor ve zaman alıcı olan entübasyon, ventilasyon ve göğsün geniş bir şekilde açılmasını içerir. Son yıllarda, koroner arter ligasyonu için farklı protokoller bildirilmiş ve bir dereceye kadar MI oluşumunu güçlendirmiştir15,16,17. Bu çalışma, çoğu laboratuvarda kolayca bulunan cerrahi alet ve ekipmanları kullanarak basit ve etkili bir protokol sundu.
Kritik adımlar ve sorun giderme
Bu yöntemin uygulanmasında optimum performans için, birkaç önemli adım kayda değerdir. Kalbi dışsallaştırmak için göğüs boşluğu şiddetli bir şekilde sıkılmamalıdır, bu da koroner kan akışını olumsuz yönde etkiler ve koroner arteri gizler, bu da koroner arterin görünmezliğine ve LAD ligasyonunun başarısızlığına yol açar. Ayrıca, bu ciddi akciğer hasarına neden olabilir. Çoğu durumda, göğüs duvarının sağ tarafına doğru hafif bir itme, kalbi açılan interkostal boşluktan başarılı bir şekilde dışsallaştıracaktır. Bazen, kalp eksegnizasyonu sırasında bir direnç hissi, kalp tepesi ve interkostal açıklığın uyumsuzluğunu gösterebilir. Bu, mikro-sivrisinek hemostatının midaksiller hat boyunca hafif hareketleriyle ele alınabilir. Bir diğer kritik nokta, kasları ve cildi dikmeden önce göğüs boşluğunda kalan havanın yeterli şekilde boşaltılmasıdır. Bunun yapılmaması pnömotoraksa bağlı postoperatif mortaliteyi artıracaktır.
Avantajlar ve sınırlamalar
Konvansiyonel koroner ligasyon yöntemleri entübasyon, mekanik ventilasyon, kaburgaların kesilmesini gerektirir ve yüksek kalp hızı nedeniyle koroner arterin tanımlanması kolay değildir. Bu sorunlar operasyon süresini önemli ölçüde uzatmakta ve operasyona bağlı mortaliteyi artırmaktadır. Konvansiyonel yöntemlerle karşılaştırıldığında, modifiye edilmiş protokol aşağıdaki avantajları sunar: (1) zaman kazandırır (yani, anesteziden, LAD ligasyonundan başarılı cilt dikişine kadar yaklaşık 3 dakika sürer); (2) Gerekli cerrahi alet ve malzemeler çoğu laboratuvarda kolayca bulunabilir. Bununla birlikte, bu benzersiz yöntemin önemli bir sınırlaması, mekanik ventilasyon desteğinin olmaması nedeniyle kalp eksegizasyondan sonra LAD ligasyonu için izin verilen sınırlı süredir. Bu nedenle, yeni başlayanlar için pnömotoraksın neden olduğu yüksek mortalite beklenebilir. Yazarların deneyimlerine dayanarak, 30 saniyeden daha kısa bir süre için kalp dışsallaştırması, test edilen tüm fareler tarafından iyi tolere edilir. Bu zaman aralığı, deneyimli bir teknisyenin MI indüksiyonunu düşük perioperatif mortalite (%<5) ile bitirmesi için yeterlidir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.
Acknowledgments
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81930007, 81625002, 81800307, 81470389, 81500221, 81770238), Şanghay Üstün Akademik Liderler Programı (18XD1402400), Şanghay Belediyesi Bilim ve Teknoloji Komisyonu (201409005200), Şanghay Pujiang Yetenek Programı (2020PJD030) ve Çin Doktora Sonrası Bilim Vakfı (2020M671161, BX20190216).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride | SIGMA | T8877-25G | TTC staining |
| 4-0 silk suture | YUANKANG | 4-0 | Surgical instrument |
| Autoclave | HIRAYAMA | HVE-50 | Sterilization for the solid |
| Buprenorphine | Qinghai Pharmaceutical FACTORY Co., Ltd. | H10940181 | reduce post-operative pain |
| Centrifugation tube | Biological Hope | 1850-K | 15ML |
| Depilatory cream | ZIKER BIOTECHNOLOGY | ZK-L2701 | Depilation agent for laboratory animals |
| Forcep | RWD | F12028 | Surgical instrument |
| Gas filter | ZHAOXIN | SA-493 | Operator protection |
| Isoflurane | RWD | 20071302 | Used for anesthesia |
| Light source | Beijing PDV | LG-150B | Operating lamp |
| Micro-mosquito hemostat | FST | 13011-12 | Surgical instrument |
| Needle | BINXIONG | 42180104 | Surgical instrument |
| Needle and the 6-0 silk suture | JIAHE | SC086 | Surgical instrument |
| Needle holder | ShangHaiJZ | J32030 | Surgical instrument |
| Needle holder | ShangHaiJZ | J32010 | Surgical instrument |
| Povidone-iodine swabs | SingleLady | GB26368-2010 | Skin disinfection |
| Scissors | CNSTRONG | JYJ1030 | Surgical instrument |
| Sterile eye cream | Shenyang Xingqi Pharmaceutical Co., Ltd. | H10940177 | prevent corneal dryness |
| Ultra-high resolution ultrasound imaging system for small animals | VisualSonics | Vevo 2100 | Echocardiographic analysis |
References
- Fu, Y., et al. A simple and efficient method for in vivo cardiac-specific gene manipulation by intramyocardial injection in mice. Journal of Visualized Experiments. (134), e57074 (2018).
- Pell, S., Fayerweather, W. E. Trends in the incidence of myocardial infarction and in associated mortality and morbidity in a large employed population. The New England Journal of Medicine. 312 (16), 1005-1011 (1985).
- Ramunddal, T., Gizurarson, S., Lorentzon, M., Omerovic, E. Antiarrhythmic effects of growth hormone--in vivo evidence from small-animal models of acute myocardial infarction and invasive electrophysiology. Journal of Electrocardiology. 41 (2), 144-151 (2008).
- Tabrizchi, R. β-blocker therapy after acute myocardial infarction. Expert Review of Cardiovascular Therapy. 11 (3), 293-296 (2013).
- Virani, S. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association. Circulation. 141 (9), 139 (2020).
- Cahill, T. J., Choudhury, R. P., Riley, P. R. Heart regeneration and repair after myocardial infarction: Translational opportunities for novel therapeutics. Nature Reviews Drug Discovery. 16 (10), 699-717 (2017).
- Froese, N., et al. Anti-androgenic therapy with finasteride improves cardiac function, attenuates remodeling and reverts pathologic gene-expression after myocardial infarction in mice. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 122, 114-124 (2018).
- Wang, W., et al. Defective branched chain amino acid catabolism contributes to cardiac dysfunction and remodeling following myocardial infarction. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 311 (5), 1160-1169 (2016).
- Acikel, M., et al. Protective effects of dantrolene against myocardial injury induced by isoproterenol in rats: Biochemical and histological findings. International Journal of Cardiology. 98 (3), 389-394 (2005).
- vanden Bos, E. J., Mees, B. M. E., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).
- Guo, Y., et al. Demonstration of an early and a late phase of ischemic preconditioning in mice. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 275 (4), 1375-1387 (1998).
- Kumar, M., et al. Animal models of myocardial infarction: Mainstay in clinical translation. Regulatory Toxicology and Pharmacology. 76, 221-230 (2016).
- Das, S., MacDonald, K., Chang, H. Y., Mitzner, W. A simple method of mouse lung intubation. Journal of Visualized Experiments. (73), e50318 (2013).
- Johns, T. N., Olson, B. J. Experimental myocardial infarction. I. A method of coronary occlusion in small animals. Annals of Surgery. 140 (5), 675-682 (1954).
- Ahn, D., et al. Induction of myocardial infarcts of a predictable size and location by branch pattern probability-assisted coronary ligation in C57BL/6 mice. American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 286 (3), 1201-1207 (2004).
- Gao, E., Koch, W. J. A novel and efficient model of coronary artery ligation in the mouse. Methods in Molecular Biology. 1037, 299-311 (2013).
- Most, P., et al. Cardiac S100A1 protein levels determine contractile performance and propensity toward heart failure after myocardial infarction. Circulation. 114 (12), 1258-1268 (2006).
- Christia, P., et al. Systematic characterization of myocardial inflammation, repair, and remodeling in a mouse model of reperfused myocardial infarction. Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 61 (8), 555-570 (2013).
- Frantz, S., Bauersachs, J., Ertl, G. Post-infarct remodelling: Contribution of wound healing and inflammation. Cardiovascular Research. 81 (3), 474-481 (2008).
