Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 4:17 min. • July 8th, 2025
Para isolar células assassinas naturais, ou células NK - glóbulos brancos especializados envolvidos na imunidade inata, comece com tecido hepático humano contendo diversas populações de células, incluindo células contendo gordura, eritrócitos, granulócitos, linfócitos e outras células associadas presas em uma matriz extracelular rica em colágeno ou MEC.
Pique o tecido em pequenos pedaços e transfira-os para um tubo contendo colagenase - uma enzima proteolítica. A colagenase cliva o colágeno, rompe a matriz e solta as células ligadas à MEC.
Insira o tubo em um dissociador de tecido. Essa dissociação mecânica desintegra ainda mais a ECM para liberar células frouxamente ligadas na solução. Filtrar o conteúdo para remover o tecido não digerido e os fragmentos de MEC e recolher o filtrado contendo várias células.
Ressuspenda as células em um tampão contendo polivinilpirrolidona ou esferas de sílica revestidas com PVP. Os grânulos de PVP se ligam seletivamente às células que contêm gordura, separando-as efetivamente do resto das células.
Centrifugar a baixa velocidade para peletar a população celular; rejeitar o sobrenadante que contém detritos e células adiposas ligadas a grânulos. Ress
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos