Quantificação de mediadores inflamatórios em células derivadas de tecidos humanos infectados

Durante uma infecção, os linfócitos ativados liberam mediadores inflamatórios - citocinas - para provocar uma resposta imune.

Para quantificar os mediadores inflamatórios em um tecido infectado, comece com uma suspensão celular contendo células imunes derivadas do tecido pulmonar humano.

Incube as células com Haemophilus influenzae - uma bactéria patogênica respiratória. Os antígenos de superfície da bactéria interagem com receptores de reconhecimento de padrões em células imunes fagocíticas. Isso inicia a internalização da bactéria, o processamento em peptídeos menores e a apresentação do peptídeo pela molécula principal do complexo de histocompatibilidade.

A molécula antígeno-MHC-II nas células fagocíticas liga-se aos linfócitos T através dos receptores de células T, juntamente com interações co-estimulatórias do receptor, resultando na ativação de linfócitos T e na produção de citocinas pró-inflamatórias.

Trate as células com bloqueadores de Golgi, prejudicando a liberação de citocinas - causando seu acúmulo dentro das células. Lave as células com um tampão de bloqueio para bloquear locais de ligação não específicos.

Manchar a suspensão celular com uma mistura de anticorpos marc