Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:53 min. • July 8th, 2025
Para começar, pegue um tubo contendo células cancerígenas em meio sem soro para minimizar a interferência da esterase sérica durante o ensaio. Incubar com corante AM de calceína não fluorescente.
As esterases intracelulares ativas hidrolisam a calceína AM em corante de calceína fluorescente impermeável à membrana retido no citoplasma.
Células cancerígenas marcadas com calceína em placas e células NK efetoras nos poços de teste, enquanto os poços de controle contêm apenas células cancerígenas coradas com calceína sem células NK.
Os receptores de superfície celular ativadores das células NK se ligam aos ligantes ativadores nas células cancerígenas, formando uma sinapse imunológica. Essa ligação ativa a sinalização das células NK, polarizando os grânulos citotóxicos contendo perforinas e granzimas em direção à sinapse para liberação.
As perforinas formam os poros da membrana das células cancerígenas, facilitando a entrada celular das granzimas e iniciando a apoptose. A integridade da membrana comprometida causa vazamento de calceína fluorescente, reduzindo a fluorescência das células cancerígenas.
Capture imagens de fluorescência dos poços.
Um número reduzido de células cancerígenas v
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